应用二温式多重PCR技术鉴别鸡传染性支气管炎病毒和鸡传染性喉气管炎病毒

为了简化聚合酶链反应 (PCR)程序和加快检测速度 ,将二温式 PCR与多重 PCR结合起来 ,建立一种同时检测鸡传染性支气管炎病毒 (IBV)和鸡传染性喉气管炎病毒 (IL TV)的二温式多重 PCR技术。试验根据IBV和 IL TV的基因文库 ,设计 2对分别与 IBV和 IL TV某段基因序列互补的引物 ,用这 2对引物对同一样品中的 IBV、IL TV核酸模板进行二温式多重 PCR扩增 ,结果均同时得到 2条特异性大小与实验设计相符的172 0 bp (IBV)和 6 47bp (IL TV)的扩增带 ,而对其他 6种禽病病原的扩增结果均为阴性 ;敏感性测定结果表明 ,该二温式多重 PCR技术能检出 10 pg的 IBV RNA模板和 10 pg的 IL TV

牛瑟氏泰勒虫二温式PCR检测方法的建立及应用

为建立一种能快速、特异、敏感地检测牛瑟氏泰勒虫的方法,根据GenBank中的牛瑟氏泰勒虫MPSP基因(GQ180198.1)设计合成了1对特异性引物,建立了检测牛瑟氏泰勒虫的二温式PCR方法。该方法与犬新孢子虫、猪支原体和弓形虫RH株均无交叉反应,能检测到的最低DNA含量为1.7pg/μL。结果表明,该二温式PCR检测方法具有较高的特异性和敏感性。本研究为牛瑟氏泰勒虫的快速检测提供了一种方法。