二烯丙基三硫对胃癌MGC-803细胞的生长抑制作用

目的 研究二烯丙基三硫 (DATS)在体外对胃癌MGC 80 3细胞的生长抑制作用。方法 采用MTT法、集落形成率及生长曲线绘制分别观察不同浓度DATS对胃癌MGC 80 3细胞生长的影响。结果 DATS处理后 ,培养的MGC 80 3细胞增殖抑制而稀少。不同浓度DATS对胃癌MGC 80 3细胞的作用 ,4、8、12、16、2 4mg·L-1的细胞生长抑制率分别为 2 6 %、4 6 %、6 5 %、76 %、89% ,其半数抑制浓度(IC50 )为 8 2mg·L-1。 8、12、16、2 4mg·L-1的细胞集落形成率和集落形成相对数各为 32 4 %和 5 8 7%、2 4 8%和4 2 5 %、19%和 33 5 %、8 8%和 15 1% ,皆具有明显的量效关系 ,且随着浓度增高 ,细胞生长曲线趋于低平。结论 DATS在体外对胃癌MGC 80

二烯丙基二硫对人胃癌细胞裸鼠移植瘤的抗肿瘤作用

背景与目的:既往研究发现二烯丙基二硫(diallyldisulfide,DADS)在体外可抑制多种肿瘤细胞生长,但在体内抗肿瘤作用的研究报道较少。本实验旨在探讨DADS对人胃癌细胞移植瘤在BALB/C裸鼠体内生长的影响。方法:未经药物处理和经30mg/LDADS处理1天的胃癌细胞MGC803接种于裸鼠皮下;观察体外DADS处理MGC803细胞裸鼠移植瘤的成瘤情况和未处理MGC803细胞移植瘤成瘤后腹腔注射DADS对胃癌移植瘤在BALB/c裸鼠体内生长情况的影响。Westernblot检测瘤组织中增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen,PCNA)的表达情况。结果:30mg/LDADS处理的MGC803细胞移植裸鼠体内无一成瘤。荷瘤裸鼠腹腔注射DADS剂量为50、100和200mg/kg时的抑瘤率分别为27.8%、66.1%和73.0%,同时可抑制移植瘤癌细胞PCNA的表达。结论:DADS可明显降低胃癌细胞裸鼠移植瘤的成瘤性,并对移植瘤生长有明显抑制作用。

二烯丙基二硫对人结肠癌SW480细胞增殖抑制的作用

目的探讨二烯丙基二硫(diallyl disulfide，DADS)对人结肠癌细胞系SW480增殖抑制作用及机制。方法以人结肠癌SW480细胞为实验研究对象，通过MTT法测定DADS对SW480细胞的增殖抑制效应，采用HE染色及流式细胞仪检测药物作用前后细胞形态学及细胞周期分布等方面的变化。结果MTT法测定结果显示DADS可抑制SW480细胞增殖。呈浓度依赖性；形态学观察发现DADS诱导SW480细胞呈现出成熟分化的特征；随着DADS浓度加大，阻滞在G2／M期的细胞数目增多，亚二倍体峰逐渐增高。结论DADS可抑制人结肠癌SW480细胞增殖，使癌细胞阻滞于G2/M期。

二烯丙基二硫通过miR-7下调XIAP抑制人胃癌SGC7901细胞增殖与迁移侵袭

目的探讨二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)是否通过miR-7下调X连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP),抑制胃癌SGC7901细胞增殖、迁移和侵袭。方法构建XIAP过表达SGC7901细胞株;qRT-PCR、Western blot检测DADS对过表达细胞XIAP表达的影响;CCK-8和平板克隆形成实验分析DADS对XIAP过表达细胞增殖的影响;划痕和Transwell实验分析DADS对XIAP过表达细胞迁移和侵袭的影响;qRT-PCR检测DADS对miR-7表达的影响;双荧光素酶报告实验、qRT-PCR和Western blot验证miR-7对XIAP靶向负调控作用。结果XIAP过表达增强SGC7901细胞增殖、迁移和侵袭能力;DADS下调XIAP、抑制XIAP过表达细胞增殖、迁移和侵袭;DADS上调miR-7表达;miR-7靶向调控XIAP 3′UTR,过表达miR-7降低XIAP表达,而敲低miR-7则上调XIAP表达。结论DADS通过miR-7下调XIAP抑制SGC7901细胞增殖、迁移和侵袭。

二烯丙基二硫对人结肠癌HT-29细胞的生长抑制和细胞周期阻滞作用

二烯丙基二硫（diallyl disulfide，DADS）是大蒜中一种有效的脂溶性成分，对多种肿瘤细胞有直接抑制作用。我们以人结肠癌HT-29细胞为研究对象来观察不同浓度的DADS对癌细胞生长抑制和细胞周期的调控作用，现报道如下。

二烯丙基二硫对人胃癌MGC803细胞生长的影响

目的:研究二烯丙基二硫(DADS)对人胃癌MGC803细胞生长的抑制作用。方法:采用MTT法、生长曲线分析、细胞活力检测、双层软琼脂集落形成率、及倒置显微镜等方法,观察DADS对体外培养的人胃癌MGC803细胞的影响。结果:DADS对MGC803细胞具有明显的生长抑制效应,且呈剂量-效应依赖关系(P<0.05)。培养96 h,35mg/LDADS的抑制作用呈时间-效应依赖关系(P<0.05)。细胞群体倍增时间由33.8 h处长至DADS处理后的84.0 h(P<0.05);细胞存活率分别为阴性对照组97.4％和DADS处理组80.4％(P>0.05);软琼脂集落形成率由 1.23％下降到0.33％(P<0.05)。阴性对照组细胞多角形、圆形,体积大,多形性明显,核大小不一,见双核及核仁,细胞生长紧密呈堆叠生长,DADS处理后细胞异型性降低,为形态一致的梭形,体积小,境界清楚而分散,胞质丰富,核明显变小。结论:DADS对体外培养的MGC803细胞具有明显的增生抑制作用,且呈现剂量-效应依赖关系。

二烯丙基二硫诱导人白血病HL-60细胞分化差异表达cDNA文库的构建

目的 应用抑制性消减杂交技术构建二烯丙基二硫(diallyldisulfide ,DADS)诱导人白血病细胞分化的消减杂交cDNA文库 ,以期克隆DADS诱导人白血病HL 6 0细胞分化的相关基因。方法 用DADS诱导人白血病HL 6 0细胞分化 ,提取polyA+ RNA ,反转录合成cDNA ,消化成短片段后分成两组 ,分别与两种不同的接头连接 ,再与未处理的白血病细胞cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性PCR扩增 ,将PCR产物与pGEM T线性载体连接 ,转化大肠杆菌进行文库扩增 ,随机挑取克隆进行酶切鉴定。结果 成功地构建了具有高消减效率的DADS诱导白血病细胞分化的cDNA文库 ,随机挑取消 2 0 0个克隆制备质粒并酶切分析 ,其中 84 5 %的克隆均具有 1 0 0～ 6 0 0bp左右的插入片段 ,说明每一克隆中均含有特异性的目的片段 ,从而为大批量筛选、克隆DADS诱导人白血病细胞分化的相关未知新基因奠定了基础。结论 DADS能诱导人白血病HL 6 0细胞分化 ,并引起相关的基因发生改变 ,而抑制性消减杂交技术能有效地分离差异表达的基因。

二烯丙基二硫诱导人胃癌细胞差异表达基因cDNA文库的建立

目的 建立二烯丙基二硫 (DADS)诱导人胃癌细胞MGC80 3细胞差异表达基因的cDNA文库。方法 采用抑制消减杂交技术 ,筛选DADS处理人胃癌细胞MGC80 3细胞后差异表达的相关基因。经过抑制消减杂交和巢式聚合酶链反应扩增 ,获得富集的差异表达的cDNA文库 ,PCR检测插入片断的阳性克隆。结果 建立DADS诱导人胃癌MGC80 3细胞差异表达基因的cDNA文库 ,并从消减文库中随机挑取的 10 0个白色克隆中筛选个阳性克隆 ,发现插入片断为 10 0～ 6 0 0bp。结论 应用抑制消减杂交方法可有效筛选DADS处理人胃癌细胞MGC80 3细胞后差异表达的相关基因 ,其消减cDNA文库的建立 ,为进一步寻找胃癌发生相关新基因 ,深入揭示DADS对肿瘤细胞的作用机制提供了新的重要线索。

二烯丙基二硫诱导HT-29细胞差异表达cDNA文库的构建

目的：构建二烯丙基二硫（diallyl disulfide，DADS）诱导人结肠癌HT-29细胞差异表达cDNA文库，以期寻找、克隆DADS特异性作用靶点基因。方法：用120μmol／L的DADS处理人结肠癌HT-29细胞，从DADS处理组及对照组HT-29细胞中提取polyA＋RNA，应用高效、灵敏的抑制性消减杂交（SSH）技术构建DADS诱导人结肠癌细胞差异表达cDNA消减文库，再转染大肠杆菌进行文库扩增。结果：成功构建具有高消减效率的DADS诱导人结肠癌细胞差异表达cDNA文库，文库扩增得到了500个克隆，随机挑取100个制备质粒，酶切分析均得到150-1300bp大小插入片段，这些片段可能就是载有高度特异性的目的片段。结论：建立了DADS诱导人结肠癌细胞差异表达cDNA文库，为进一步寻找、克隆DADS特异性作用靶点基因奠定了基础。

二烯丙基二硫对小鼠生精细胞的辐射防护作用

目的研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)对小鼠生精细胞的辐射防护效应。方法利用4Gy剂量X射线建立动物辐射损伤模型。观察辐照小鼠睾丸组织变化、精子活力及精子畸形率,检测蛋白质羰基含量、丙二醛(MDA)及8-羟基脱氧鸟苷(8-OHd G)含量,评估生精细胞的辐照损伤程度及DADS对生精细胞的防护效果。测定睾丸组织抗氧化酶系超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力及谷胱甘肽(GSH)含量,western blot检测Nrf2信号蛋白表达,探讨DADS的辐射防护机制。结果与单纯照射组相比,DADS预处理组睾丸组织损伤较轻,精子活力显著提高(P<0.05),精子畸形率降低(P<0.05),蛋白质羰基含量、MDA及8-OHd G水平明显下降(P<0.05)。SOD、CAT、GSH-Px及GSH等抗氧化指标显著提升(P<0.05),Nrf2表达明显增强。结论 DADS通过其抗氧化能力对雄性小鼠生精细胞急性辐射损伤具有一定的防护效应。

二烯丙基二硫与全反式维甲酸合用对HL-60细胞的影响

目的探讨二烯丙基二硫(DADS)与全反式维甲酸(ATRA)联合用药对HL-60细胞生长抑制及诱导分化的影响。方法采用MTT、流式细胞术检测细胞周期及生长抑制,用HL-60细胞表面分化抗原CD11b及NBT实验检测HL-60的诱导分化作用。结果DADS与ATRA联合使用可以增加HL-60细胞的生长抑制率,并将HL-60细胞阻滞在G0/G1期。CD11b的表达和NBT实验结果表明两者合用对HL-60细胞的诱导分化作用与任何一种药物单独使用差异无显著性,但当两者剂量各自减少一半时,其诱导分化作用却增加,与任何一种药物单独使用时的诱导分化作用相似。结论DADS与AT-RA联合使用可以协同抑制HL-60细胞的生长,剂量减半合用时可协同对HL-60细胞的诱导分化作用。

2,3-二羟基丙基二硫代碳酸钠在西藏柯月铜铅锌矿的浮选应用研究

应用2,3-二羟基丙基二硫代碳酸钠取代重铬酸钠,对西藏隆子县柯月铜铅锌矿进行了浮选分离试验研究,闭路试验获得了含铜20.57%、含锑12.76%、含银5 695.0 g/t、铜回收率78.08%、锑回收率20.67%、银回收率48.53%的铜锑混合精矿,含铅53.02%、含锑9.90%、含银1 177.0 g/t、铅回收率92.54%、锑回收率62.04%、银回收率38.80%的铅锑混合精矿和锌品位49.35%、锌回收率82.63%的锌精矿,获得了良好的经济效益和社会效益。

5-叔丁基-5-(1'羟基-2’-甲基丙基)-2,2-二甲基-1,3-二氧六环的合成研究

双环硫化磷酸酯类化合物具有潜在的杀虫活性．1976年和1977年，Bellet，Bowery和Koenaga等报道双环有机磷酸酯类化合物是γ-氨基丁酸(GABA)受体的抑制剂。20世纪80年代中期，通过电生理和同位素示踪技术证明，双环硫(氧)化磷酸酯类化合物为1-氨基丁酸A型(GABA)受体非竞争性拮抗剂，作用于苦毒宁(picrotoinin)位点并表现出较高的杀虫活性。

二烯丙基二硫对HL-60细胞SCID小鼠移植瘤的生长抑制作用

二烯丙基二硫（DADS）为大蒜的主要有效成分之一，我们的前期研究表明，DADS对HL-60细胞、MGC803细胞均有生长抑制与诱导分化作用^[1-3]。我们在前期研究的基础上，从组蛋白乙酰化水平进一步探讨DADS对小鼠体内HL-60细胞生长的抑制作用及其机制。

氨基甲酸酯类化合物的合成及其AChE抑制活性研究

以松节油主要组分3-蒈烯为原料首先合成了3-异丙基-5-甲酚(1)和香芹酚(2),从这2个化合物出发通过异氰酸酯法(方法A)和氨基甲酰氯法(方法B)进一步制备了14个含异丙基甲酚结构的氨基甲酸酯类化合物,并测定了所合成16个化合物对乙酰胆碱脂酶(AChE)的抑制活性。研究结果表明:酚类化合物与异氰酸酯反应是制备氨基甲酸酯的高效合成工艺,其中异氰酸酯中N-取代基结构越大反应越容易发生,芳基取代产物的摩尔得率可达90%以上。在AChE抑制活性方面,3-异丙基-5-甲酚衍生物的抑制活性普遍高于香芹酚衍生物,N-脂基取代产物的抑制活性显著高于N-芳基取代产物,且短链脂基取代产物的抑制活性高于长链脂基和环脂基。3-异丙基-5-甲酚的N-甲基取代产物表现出优良的AChE抑制活性,抑制效率达到石杉碱甲的90.5%,超过同为氨基甲酸酯阳性对照利凡斯的明(89.6%),而其N,N-二甲基取代产物的抑制活性又明显高于N-甲基取代产物,抑制效率达到石杉碱甲的97.9%。浓度与抑制率关系表明:3-异丙基-5-甲基苯基-N,N-二甲基氨基甲酸酯(Ⅰ-2)在浓度大于1.25 mmol/L后表现出与石杉碱甲基本等同的AChE抑制活性,具有开发为阿尔兹海默症治疗药物或者杀虫剂的潜力。

二烯丙三硫对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和侵袭的抑制及对uPA系统的调节

目的研究二烯丙三硫(DATS)对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和侵袭能力的影响及对尿激酶型纤溶酶激活物(uPA)系统的调节作用。方法实时定量PCR法(real-time PCR)检测乳腺癌细胞株uPA系统中uPA、uPA受体(uPAR)和uPA抑制物(PAI-1)的表达;使用不同浓度DATS处理乳腺癌细胞,MTS比色法测定细胞的增殖能力;Matrigel体外浸润实验检测DATS(20～60μmol/L)对细胞浸润能力的影响;Transwell小室迁移实验和划痕试验评价60μmol/L DATS对细胞迁移能力的影响;RT-PCR和Western blot分别测定60μmol/L DATS作用后,乳腺癌细胞中uPA、uPAR和PAI-1 mRNA和蛋白表达的变化;ELISA法检测细胞培养液中PAI-1蛋白含量的变化。结果 20～80μmol/L DATS对高侵袭性乳腺癌细胞株MDA-MB-231的生长有明显的抑制作用,且呈浓度和时间依赖性。60μmol/L DATS明显抑制MDA-MB-231细胞的浸润和迁移能力,并在mRNA和蛋白水平上,显著上调PAI-1的表达,但对uPA和uPAR的表达水平无显著影响。结论 DATS抑制MDA-MB-231细胞的增殖和侵袭能力,并在mRNA和蛋白水平上,显著上调PAI-1的表达。