N,N'-二环己基-N-山嵛酸酰脲的合成及其抗肿瘤活性研究

以山嵛酸、DCC为原料,DMAP为催化剂首次合成新型化合物N,N’-二环己基-N-山嵛酸酸酰脲,并对合成路线进行优化,核磁共振谱确定结构;检测其体外抗BEL-7404细胞的活性。结果表明,通过对合成路线的优化可以快速,简便的合成N,N’-二环己基-N-山嵛酸酰脲,产率可以达到85%以上;其在400μg/mL以上浓度以上对人肝癌7404细胞有较为明显的杀伤。该物质有望成为新型的抗肿瘤先导化合物。

N,N′-二环己基-N-二十二碳酸酰脲解离常数测定

目的:测定N,N′-二环己基-N-二十二碳酸酰脲解离常数。方法:采用紫外分光光度法及A-pH曲线法测定N,N′-二环己基-N-二十二碳酸酰脲解离常数。结果:紫外分光光度法测得N,N′-二环己基-N-二十二碳酸酰脲的pKa为7.16±0.24,A-pH曲线法求得pKa为6.98。

N,N’-二环己基-N-山嵛酸酰脲体内外抗肿瘤作用

目的:观察N,N’-二环己基-N-山嵛酸酰脲的体内外抗肿瘤作用。方法:镜下观察N,N’-二环己基-N-山嵛酸酰脲体外对肿瘤细胞的影响。以小鼠S180腹水瘤细胞腹腔造模,ip给药,每天1次,至动物全部死亡,分别观察小鼠的生存时间和体重增长,计算生命延长率。结果:体外实验中,在200μg/mL以上对肿瘤细胞具有明显的抑制作用。体内给予N,N’-二环己基-N-山嵛酸酰脲50 mg/kg、5 mg/kg和0.5 mg/kg对S180腹水瘤小鼠的生命延长率分别为28.86%、25.37%和7.96%。结论:N,N’-二环己基-N-山嵛酸酰脲在体内外均具有明显的抗肿瘤作用。

N,N’-二环己基-N-山嵛酸酰脲溶解度的测定及其纯化工艺的优化

[目的]:测定N,N’-二环己基-N-山嵛酸酰脲在不同溶剂中的溶解度,并对其纯化工化艺进行优化。[方法]:应用气相色谱法(GC)测定N,N’-二环己基-N-山嵛酸酰脲在石油醚、乙酸乙酯、无水乙醇、水中的溶解度,以改良快速干柱柱层析及重结晶法对大量合成的N,N’-二环己基-N-山嵛酸酰脲进行纯化。[结果]:N,N’-二环己基-N-山嵛酸酰脲在石油醚、乙酸乙酯、无水乙醇、水中的溶解度分别为0.7087、2.216、0.8107、0.0002 mg/m L。以改良快速干柱柱层析及重结晶法可以得到大量高纯度的N,N’-二环己基-N-山嵛酸酰脲,产率为65.5%,纯度为99.45%。[结论]:获得大量高纯度N,N’-二环己基-N-山嵛酸酰脲的方法为改良快速干柱柱层析与重结晶法并测定N,N’-二环己基-N-山嵛酸酰脲在不同溶液中的溶解度。

N,N’-二环己基-N-亚麻酸酰脲的体外抗肿瘤活性

目的探讨板蓝根组酸衍生物N,N′-二环己基-N-亚麻酸酰脲(化合物MSR405)的体外抗肿瘤活性。方法取对数生长期肝癌细胞Bel-7402、Hep-G2、SMMC-7721和卵巢癌细胞SKOV3,均分别应用500μg/mL、250μg/mL、125μg/mL、62.5μg/mL、31.25μg/mLMSR405进行干预,检测细胞的增殖抑制情况。应用60μg/mL、80μg/mL、100μg/mL、120μg/mLMRS405干预肝癌细胞Bel-7402、SMMC-7721,以未进行干预的细胞作为阴性对照,24h后检测细胞的凋亡情况,并观察细胞形态。结果不同浓度MSR405作用下,Bel-7402、SMMC-7721、Hep-G2和SKOV3细胞的增殖受到不同程度地抑制。与阴性对照组比较,经各浓度MSR405处理后肝癌细胞Bel-7402、SMMC-7721的凋亡率均升高(均P<0.05);MSR405浓度为80~120μg/mL时,Bel-7402和SMMC-7721细胞的凋亡率随着MSR405浓度增大而升高(均P<0.05)。各药物组的细胞多呈凋亡细胞的形态。结论不同浓度MSR405对肝癌及卵巢癌细胞的增殖均有不同程度的抑制作用,在一定浓度范围内其对肝癌细胞Bel-7402、SMMC-7721的促凋亡作用具有浓度依赖性。

阿司匹林-维生素E酯的合成

以3种不同的路径分别合成了阿司匹林-维生素E酯的中间体,并通过红外光谱、高效液相色谱、核磁共振等手段对产物的结构进行了表征,证明所得均为目标产物。通过比较,确定以酰氯为酰化剂的合成方法产率较高,成本低,适合工业化生产。

恩他卡朋中间体中DCC和DCU的GC-FID法测定

建立了GC-FID法测定恩他卡朋(1)中间体中杂质二环己基碳二亚胺(DCC,4)和二环己基脲(DCU,7)的含量。采用HP-5柱(0.32 mm×30 m×0.25μm),程序升温,FID检测器温度为320℃;进样口温度为300℃,进样量为1μl,分流比为10∶1。结果表明,4和7在相应浓度范围内线性关系良好,平均回收率分别为98.75%和100.05%。以外标法计算6批样品中4和7的含量均低于0.1%。建立的方法简单、准确、重复性好,可用于1中间体中4和7的测定。