抗氧化剂和NF-κB对大肠癌细胞IL-8表达的作用及机制

目的:探讨NF-κB在大肠癌细胞IL-8诱导表达中的作用及抗氧化剂对大肠癌细胞IL-8诱导表达的影响及其机制。方法:IL-8mRNA表达采用逆转录/聚合酶链反应(RT/PCR)检测,培养上清IL-8蛋白含量用ELISA检测,EMSA法测定细胞核内NF-κB结合活性。结果:抗氧化剂可阻断大肠癌细胞培养体系TNF-α诱导的IL-8生成及IL-8mRNA的表达,TNF-α可诱导大肠癌细胞NF-κB的激活并被抗氧化剂阻断。结论:TNF-α诱导的大肠癌细胞IL-8基因和蛋白表达依赖于NF-κB的激活;抗氧化剂可通过抑制NF-κB的活化而阻断IL-8基因和蛋白的诱导表达。

抗氧化剂对大肠癌细胞MMP-3表达的影响及其机制

采用FQ-PCR检测大肠癌细胞中MMP-3 mRNA的表达,EMSA法测定细胞核内核因子-κB(NF-κB)结合活性。结果发现,抗氧化剂可阻断大肠癌细胞培养体系TNF-α诱导的MMP-3 mRNA的表达,TNF-α可诱导大肠癌细胞NF-κB的激活并被抗氧化剂阻断。认为TNF-α诱导的大肠癌细胞MMP-3基因表达依赖于NF-κB的激活,抗氧化剂可通过抑制NF-κB的活化而阻断MMP-3基因的诱导表达。

抗氧化剂PDTC对酸性环境诱导的人卵巢癌SKOV3细胞IL-8表达的作用及机制

目的:探讨二硫氨基甲酸吡啶(PDTC)对酸性环境中培养的人卵巢癌细胞SKOV3的增殖活性及白细胞介素8(IL-8)表达的影响,以及细胞核转录因子-κB(NF-κB)在此过程中的作用。方法:将SKOV3细胞分为5组:常规培养液组(对照组)和酸性培养组以及酸性培养液加PDTC组(分别加入终浓度为25、50、100μmol·L-1的PDTC);各组培养12h后,MTT法检测PDTC对SKOV3细胞增殖的影响,ELISA法检测培养上清中IL-8蛋白含量,Western blotting检测核内NF-κB蛋白的表达。结果:SKOV3细胞在酸性环境中IL-8表达水平[(1384.211±42.320)ng·L-1]高于对照组[(617.505±47.850)ng·L-1](P<0.01)。加入不同浓度PDTC(25、50、100μmol·L-1),IL-8表达逐步降低[(1239.053±14.490)、(1113.578±29.140)、(1014.457±55.490)ng·L-1],均低于酸性培养组(P<0.05)。在酸性环境中的SKOV3细胞可观察到颜色较深的核内NF-κB蛋白条带,应用PDTC后NF-κB在核内的蛋白条带颜色变浅。结论:PDTC对酸性环境中SKOV3细胞IL-8的表达具有抑制作用,该作用与PDTC抑制NF-κB的活化有关。