隐孢子虫PCR检测中模板DNA提取方法比较

用 4种不同方法抽提隐孢子虫卵囊DNA作模板 ,以 1对人工合成的寡聚核苷酸为引物进行聚合酶链反应 ,均能扩增出 5 40bp特异性DNA片段 ;比较这 4种方法的操作过程和卵囊最低检测量对它们进行综合评价 ,其中 2 0 g/L二硫苏糖醇冻融法最佳 ,具有敏感、简便、快速等优点。

不同疾病阶段多发性骨髓瘤患者的疑难配血与解决策略

目的探讨不同疾病阶段多发性骨髓瘤(MM)患者的疑难配血及解决策略。方法对1名首诊MM、拟输血患者的血液采用微柱凝胶法、试管法与献血者的血液做交叉配血,对于主侧凝集者,取患者的血浆采用凝聚胺法及患者血浆稀释后采用微柱凝胶法再与献血者悬浮红细胞做交叉配血;对1名复发难治MM、拟输血患者的血液采用微柱凝胶法与献血者的血液做交叉配血试验。结果(1)病例1:为首诊MM患者,采用微柱凝胶法患者血液与2名献血者血液交叉配血的主侧均呈细线状凝集,试管法配血主侧同样凝集--显微镜下凝集呈缗钱状;接着用凝聚胺法及患者血浆稀释后用微柱凝胶法和上述2名献血者的血液再次配血:患者血液与献血者血液的交叉配血相合。(2)病例2:诊断为复发难治的MM,用微柱凝胶法患者血液与2名献血者血液交叉配血的主次侧均呈颗粒状凝集;针对患者在使用达雷妥尤单抗(CD38单抗)治疗,以二硫苏糖醇(DTT)处理献血者红细胞后,再用微柱凝胶法与患者的血浆交叉配血,结果配得相合的悬浮红细胞。结论凝聚胺法和患者血浆稀释后微柱凝胶法交叉配血适用于初诊MM的配血;对于CD38单抗治疗的MM患者,加做DTT法即可消除药物对其交叉配血的影响。

抗药物-药物复合物引起的不规则抗体筛查假阳性结果的消除

目的消除抗药物-药物复合物引起的不规则抗体筛查假阳性结果。方法对微柱凝胶法不规则抗体筛查阳性的29例患者标本,采用盐水介质法、吸收试验和二硫苏糖醇(DTT)法平行检测,将初步确定为抗药物-药物复合物引起的假阳性标本置于4℃冰箱3 d后,再用微柱凝胶法、吸收试验和DTT法平行检测确认抗药物-药物复合物。结果 29例微柱凝胶法不规则抗体筛查阳性的标本中,因抗药物-药物复合物引起的假阳性占62.07%(18/29):置4℃冰箱3 d前后吸收试验和DTT法检测均阳性14例,均为吸收试验阴性和DTT法检测阳性4例。其余11例吸收试验阳性、DTT法阴性标本,置4℃冰箱3 d微柱凝胶法、吸收试验及DTT法检测均为阴性。结论 DTT能够降解抗药物-药物复合物,消除由后者引起的不规则抗体筛查假阳性。