二磷酸腺苷抑制率指导轻型脑卒中或高危短暂性脑缺血发作双联抗血小板方案

目的探讨二磷酸腺苷(ADP)抑制率指导轻型脑卒中或高危短暂性脑缺血发作(TIA)患者调整双联抗血小板方案的可行性和安全性。方法选取2020-01—2022-03在陕西省人民医院接受治疗的轻型脑卒中或高危TIA患者268例,所有患者在发病24 h内采用阿司匹林联合氯吡格雷进行抗血小板治疗,治疗3 d后检测ADP抑制率,根据ADP抑制率分为A组、B组和C组。A组患者不调整治疗方案,B组和C组患者在医师指导下选择原方案治疗或将氯吡格雷改为替格瑞洛。观察出院时间、治疗期间的血小板反应指数(PRI)和血小板-纤维蛋白凝块强度(MAADP)、出血事件和不良反应以及随访3个月的再发脑卒中率。结果A组119例患者中未调整治疗方案,B组79例患者中40例调整了治疗方案,C组70例患者中36例调整了治疗方案。A组患者的住院时间、MAADP、PRI、再发脑卒中率均低于B组和C组(P<0.05),B组和C组的住院时间、MAADP、PRI、再发脑卒中率比较差异无统计学意义(P>0.05)。B组和C组中调整治疗方案患者的住院时间、MAADP、PRI、再发脑卒中率均低于未调整治疗方案者(P<0.05)。B组和C组中调整治疗方案患者的住院时间、MAADP、PRI、再发脑卒中率与A组比较差异无统计学意义(P>0.05)。各组患者均未发生出血事件。各组患者的不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论ADP抑制率>70%的轻型脑卒中或高危TIA患者采用阿司匹林联合氯吡格雷方案治疗可取得满意的治疗效果,ADP抑制率较低的患者更换治疗方案可获益。

多(二磷酸腺苷-核糖)水解酶抑制剂单宁酸对糖尿病大鼠肾脏病变的影响及其机制

目的:研究多(二磷酸腺苷-核糖)水解酶(PARG)抑制剂单宁酸(GLTN)对糖尿病大鼠肾脏病变的影响并探讨其可能的机制。方法:将实验动物随机分为正常对照组(NC组)、糖尿病组(DM组)、糖尿病3-氨基苯甲酰胺(3-AB)处理组(CDT组)、糖尿病GLTN低剂量(20mg·kg-1·d-1)处理组(LDT组)和糖尿病GLTN高剂量(30mg·kg-1·d-1)处理组(HDT组),12周后检查各组动物血糖、血肌酐、尿素氮、尿蛋白排泄率水平及肾脏病变情况,免疫组织化学法检测各组大鼠肾组织PARP阳性信号表达。结果:与DM组比较,LDT和HDT组血糖水平明显降低(P<0.01),血肌酐、尿素氮水平和尿蛋白排泄率也明显降低(P<0.01,P<0.05,P<0.01),LDT和HDT组糖尿病大鼠的肾脏病变程度减轻,肾组织PARP蛋白表达降低(P<0.05)。但LDT和HDT组之间上述肾功能参数比较差异无显著性(P>0.05)。结论:GLTN可降低糖尿病大鼠的血糖水平,抑制肾组织PARP表达,改善肾脏功能和形态异常。

二磷酸腺苷核糖多聚酶的研究进展

二磷酸腺苷核糖多聚酶[Poly(ADP-Ribose)Polymerase,PARP]是一类具有重要生理功能的蛋白酶。PARP能催化二磷酸腺苷核糖多聚化反应。二磷酸腺苷核糖多聚化对DNA修复和基因组稳定性起着重要作用。但PARP的过激活与许多疾病的病理机制有关。介绍了PARP的结构和功能,PARP家族的同族体以及PARP在一些疾病病理机制中的作用。

穿心莲内酯对二磷酸腺苷诱导血小板聚集的拮抗作用

目的 :观察不同浓度穿心莲内酯提取物 (APN)、穿心莲内酯单体 (穿琥宁 )对二磷酸腺苷 (ADP)诱导血小板聚集的拮抗作用。方法 :不同浓度穿心莲内酯提取物、穿心莲内酯单体分别加入人富含血小板血浆 (PRP)中 ,用多功能血小板聚集仪测定ADP诱导的血小板聚集作用。结果 :APN对ADP诱导血小板聚集有剂量依赖性抑制作用。结论 :穿心莲内酯具有对抗ADP诱发的血小板聚集作用。

莫诺苷对二磷酸腺苷诱导局灶性脑缺血再灌注大鼠血小板聚集的影响

目的观察莫诺苷对二磷酸腺苷(ADP)诱导的局灶性脑缺血再灌注大鼠血小板聚集指数的影响。方法用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。将48只Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组,模型组,莫诺苷低、中、高剂量组(30 mg/kg、90mg/kg、270 mg/kg)和阿司匹林组(10 mg/kg)。利用透光比浊法检测大鼠血小板聚集率。结果与模型组相比,高剂量莫诺苷组血小板最大聚集率显著降低(P<0.001)。结论莫诺苷具有抑制血小板聚集的作用。

三磷酸腺苷、二磷酸腺苷和一磷酸腺苷的毛细管电泳分析研究

研究了三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)和一磷酸腺苷(AMP)的毛细管电泳行为,考察了运行缓冲液的pH值、磷酸盐浓度、分离电压、分离温度等因素对这三种化合物的迁移时间和分离效果的影响。结果发现,这些因素对上述三种化合物的分离有显著的影响,在优化的分离条件下,三种物质在10min内可得到分离。方法的检出限为0.125mg/mL,线性范围为0.125～2.00mg/mL,相关系数为0.991～0.997。

血塞通注射液对二磷酸腺苷(ADP)诱导血小板聚集的抑制作用

目的:观察血塞通注射液对二磷酸腺苷(ADP)诱导血小板聚集的抑制作用。方法:血塞通注射液加入兔富含血小板血浆(PRP)中,用血小板聚集凝血因子分析仪测定其对ADP诱导血小板聚集的抑制作用。结果:血塞通注射液对ADP诱导血小板聚集有剂量依赖性抑制作用。结论:血塞通注射液具有较强的抑制ADP诱导的血小板聚集作用。

精-甘-天冬-丝氨酸四肽对二磷酸腺苷诱导大鼠血小板活化的信号转导的影响

本工作在二磷酸腺苷（ADP）活化的大鼠血小板上，观察精-甘-天冬-丝氨酸四肽（RGDS肽）对血小板聚集、蛋白磷酸化、蛋白激酶C和丝裂素活化蛋白激酶活性的影响。结果发现，50μmol／LADP引起血小板聚集时，蛋白激酶C（PKC）及丝裂素活化蛋白激酶（MAPK）活性增加，并引起95和66kD蛋白磷酸化。应用50，100和200μmol／LRGDS肽与其共同孵育，呈浓度依赖地抑制ADP引起的血小板聚集和对PKC及MAP的激活作用，两个作用均呈正相关（r=0.9397和r=0.9368，P＜0．01）。RGDS肽亦呈浓度依赖地抑制ADP诱导的95和66kD蛋白磷酸化，与其抑制PKC及MAPK的激活也明显正相关。上述结果提示，RGDS肽干扰ADP激活血小板的细胞内信号转导可能是其抗栓作用机理之一。

花生四烯酸和二磷酸腺苷浓度对血小板聚集的影响

目的探讨花生四烯酸（AA）和二磷酸腺苷（ADP）浓度对血小板聚集的影响。方法随机收集47例门诊体检健康志愿者静脉血标本，枸橼酸钠抗凝，离心后分离富血小板血浆（PRP）和贫血小板血浆（PPP），AA（0．4，0．5，0．7，0．8，1．0，1．5和2．0mmol／L）或ADP（2．5，5，7．5，10，15，20，40和100μmol／L）各浓度上机，采用血浆比浊法测血小板聚集率。结果在诱导剂AA浓度在0．4～2．0mmol／L时，血小板聚集率为（53．9±29．5）％～（64．0±14．5）％（F=5．19，P〈0．05）；在诱导剂ADP浓度在2．5～100／μmol／L时，血小板聚集率为（51．5±8．7）％～（74．9±7．1）0A（F=78．44，P〈0．05）。AA诱导血小板聚集在AA0．7mmol／L时血小板聚集率最高，随AA浓度进一步增高，聚集率有降低的趋势；ADP诱导血小板聚集率随ADP浓度逐渐增高而增高，ADP浓度与血小板聚集率呈线性相关（P〈0．05，r=0．7649）。结论诱导剂浓度对血小板聚集的影响明显，在PRP血小板浓度250×10-9／L左右时，诱导剂AA0．7mmol／L和ADP10μmol／L为诱导血小板聚集的适宜浓度。

二磷酸腺苷琼脂糖亲和层析法纯化HSP70多肽复合物

采用二磷酸腺苷 (ADP)琼脂糖亲和层析的方法 ,从小鼠肝脏或肿瘤组织中纯化热休克蛋白 (HSP) 70多肽复合物。用 Western blot和硝酸银染色对所纯化的蛋白质进行鉴定 ,表明纯化的蛋白质为均一的 HSP70。为了证实纯化的 HSP70是否为 HSP70多肽复合物 ,将此纯化物与 10 mmol/ L ATP,3mm ol/ L Mg Cl2 ,0 .5 mmol/ L Ca Cl2 孵育后 ,用centricon 10滤过并收集小分子片段 ,经反向高压液相色谱分析 ,发现在 2 15 nm和 2 2 0 nm有很多吸收峰 ,证明此 HSP70为 HSP70多肽复合物。一般情况下 ,采用 ADP琼脂糖亲和层析方法 1g组织可以获得 12 0μg

多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1通过激活NF-κB途径导致高糖人视网膜血管内皮细胞凋亡

目的探讨多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1[poly(adenosine diphosphate-ribose)polymeras-1,PARP-1]和核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)在高糖人视网膜血管内皮细胞(retinal vascular endothelial cells,RVEC)中的相互作用及其在人RVEC中的表达定位及作用机制。方法体外培养人RVEC及HEK293T细胞,并进行传代,同时构建高糖人RVEC细胞模型。构建PARP-EGFP及Flag-NF-κB质粒,酶切鉴定后转染高糖培养的人RVEC,Western blot法检测重组质粒表达目的基因的效果,并应用Western blot法和免疫共沉淀法检测高糖人RVEC中PARP-1和NF-κB的相互作用。PARP-EGFP和Flag-NF-κB质粒共转染人RVEC,激光共聚焦扫描显微镜检测PARP-1和NF-κB在高糖人RVEC中的定位及其相互作用。结果人RVEC复苏后24 h贴壁,细胞呈扁平梭形,3 d左右细胞开始融合呈铺路石样,单层生长,铺满瓶底,并可见接触抑制现象。成功构建PARP-EGFP及Flag-NF-κB质粒,并有效表达目的基因。免疫共沉淀结果显示PARP-1和NF-κB是相互作用的蛋白质,高糖组NF-κB p50的条带比正常对照组明显增粗,并且高糖情况下PARP-1结合NF-κB的量较正常对照组明显增加。激光共聚焦扫描显微镜结果显示PARP和NF-κB均表达于正常的人RVEC的细胞核和核周区域,当受到高浓度葡萄糖影响后,PARP-1和NF-κB均集中表达于细胞核内,尤以NF-κB最显著。结论 PARP-1和NF-κB是相互作用的蛋白质,血糖增高时,PARP-1可能进入细胞核内并结合同时进入细胞核的NF-κB,激活NF-κB信号通路,引起RVEC凋亡,导致DR的发生。

Notch1和多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1在糖尿病小鼠视网膜中的表达

背景 多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1（PARP-1）在糖尿病视网膜病变（DR）发生过程中具有重要作用,而Notch1是生物体重要的信号转导通路,可能参与对视网膜新生血管性疾病的拮抗过程,Notch1是否参与了DR的发生还未得到证实. 目的 探讨Notch1、Dll4、PARP-1、Akt、核因子-κB（NF-κB）及caspase-3在糖尿病小鼠视网膜组织及高糖视网膜血管内皮细胞（RVECs）中的表达. 方法 建立糖尿病小鼠模型,应用免疫组织化学法和Western blot法检测Notch1、Dll4、PARP-1、Akt、NF-κB及caspase-3在糖尿病小鼠视网膜组织及RVECs的表达.结果 Notch1、Dll4、p-Akt在糖尿病小鼠视网膜组织中的表达量比正常对照组明显降低,而PARP-1、caspase-3在糖尿病小鼠视网膜组织中的表达量比正常对照组明显增加,差异均有统计学意义（均P＜0.05）,但NF-κB的表达量无明显变化,差异无统计学意义（t=0.748,P=0.530）.RVECs中Notch1、p-Akt的表达量随葡萄糖浓度的增高而增加,而剪切型PARP-1、caspase-3的表达量则随葡萄糖浓度的增高而降低,在葡萄糖浓度为30 mmol/L时上述变化最显著,与正常对照组比较差异均有统计学意义（均P＜0.05）,而NF-κB的表达量无明显变化. 结论 在糖尿病小鼠视网膜中,剪切型PARP和caspase-3蛋白的表达上调,但Notch1、p-Akt蛋白的表达量下调.剪切型PARP和caspase-3表达量随葡萄糖浓度的增高而增加,Notch1、p-Akt则相反.

二磷酸腺苷诱导的血小板聚集率测定方法研究

目的:研究二磷酸腺苷(ADP)诱导的血小板聚集率的测定方法。方法:收集30例急性冠脉综合征(ACS)患者的血样,选择5,10,20μmol·L^(-1)不同浓度的ADP测定血小板1,3,5min的聚集率和最大聚集率。结果:5μmol·L^(-1)ADP组不同时间点的血小板聚集率与10,20μmol·L^(-1)ADP组差异显著(P<0.01),10μmol·L^(-1)ADP组不同时间点的血小板聚集率与20μmol·L^(-1)ADP组差异无统计学意义。研究发现血小板聚集率有直方双曲线和波形图两组有代表性的图形。结论:对于普利生公司的LBY-NJ4四通道血小板聚集仪,10μmol·L^(-1)为最适ADP诱导剂浓度。初步推断患者的血小板聚集率的图形为直方双曲线,可能对氯吡格雷的反应较高,氯吡格雷能起到较好的抗血小板作用。

自体冷血心脏停搏液对未成熟心肌细胞三磷酸腺苷及二磷酸腺苷的影响

目的通过对比自体冷血心脏停搏液与含血停搏液、St.Thomas液、HTK液对未成熟心肌细胞三磷酸腺苷(ATP)及二磷酸腺苷(ADP)含量的影响,提示自体冷血心脏停搏液对未成熟心肌细胞的保护作用。方法年龄≤12个月行体外循环室间隔缺损修补术的患儿80例,随机分成自体冷血停搏液组(A组)、冷血停搏液组(B组)、St.Thomas液组(C组)和HTK液组(D组),每组各20例。于主动脉阻断前、主动脉开放后30 min取右心耳标本50 mg,用HPLC法测定心肌ATP、ADP含量。结果主动脉阻断前各组患儿心肌ATP与ADP含量无统计学差异(P>0.05);各组患儿主动脉开放后30 min心肌ATP与ADP含量均较阻断前显著减少(P<0.01);A组患儿主动脉开放后30 min心肌ATP与ADP含量较B组显著增高(P<0.01)。结论自体冷血停搏液可显著提升体外循环心内直视手术术后未成熟心肌细胞ATP含量,效果明显优于含血停搏液、St.Thomas液以及HTK液。

补阳还五汤对中风后遗症“气虚血瘀”大鼠脑组织三磷酸腺苷及二磷酸腺苷和单胺类神经递质的影响

目的:在中风后遗症“气虚血瘀”大鼠模型的基础上,观察补阳还五汤对其脑组织三磷酸腺苷(ATP),二磷酸腺苷(ADP)及单胺类神经递质的影响,探讨其对中风后遗症脑损伤的治疗保护作用。方法:复制了中风后遗症“气虚血瘀”大鼠模型,并设空白对照组(正常组)、病理对照组(模型组)和低、中、高剂量组,补阳还五汤用传统方法煎制,大鼠灌胃15d后取脑组织,采用高效液相色谱法测定大鼠模型脑组织中ATP,ADP及去甲肾上腺素(NE),多巴胺和5-羟色胺的含量。结果:ATP含量模型组(95.7300±43.8137)μg/L显著低于正常组(439.4700±103.4430)μg/L(F=26.642,P<0.001),各给药组显著高于模型组(P<0.001～0.01);ADP含量模型组(126.7722±24.1103)μg/L显著低于正常组(557.1229±87.5038)μg/L(P<0.001),各给药组显著高于模型组(P<0.001);NE含量模型组显著低于正常组(P<0.001),各给药组显著高于模型组(P<0.05～0.01);多巴胺含量模型组显著低于正常组(557.1229±87.5038)μg/L(P<0.001),各给药组显著高于模型组(P<0.05～0.01);5-羟色胺含量模型组显著低于正常组(P<0.001),中剂量组显著高于模型组(P<0.05)。结论:中风后遗症“气虚血瘀”大鼠由于能量代谢障碍而出现脑组织ATP,ADP含量降低,并伴有大脑分泌NE,多巴胺和5-羟色胺增加及脑组?

苯中毒与多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶假基因多态等的相关性研究

目的探讨慢性苯中毒与微核率、姊妹染色单体互换(SCE)、多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶(PARP)假基因多态的关系,为寻找苯中毒的易感者提供依据.方法对33例苯中毒病例与83例对照组进行微核率、SCE、PARP假基因多态的测定,并对其分布进行统计学分析.结果苯中毒病人外周血淋巴细胞微核率为0‰～6‰、中位数为2‰,对照组0‰～3‰,中位数为1‰;苯中毒病人SCE率为(6.31±1.26)次/细胞,对照组(5.59±0.18)次/细胞;苯中毒组与对照组微核率、SCE率差异有显著性(P＜0.05);苯中毒组和对照组的PARP假基因中B基因频率分别为0.104和0.116,苯中毒组与对照组PARP假基因多态分布一致(P＞0.05).结论慢性苯中毒可引起微核率、SCE的增高,未发现PARP假基因多态与慢性苯中毒有关联.

猪二磷酸腺苷-核糖基化因子6的克隆与原核表达

为了探索二磷酸腺苷-核糖基化因子6(ADP-ribosylation factor 6,ARF6)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)感染的关系及ARF6在PRRSV感染过程中的调控作用,本试验克隆猪arf6基因和构建PGEX-4T-arf6融合蛋白质原核表达载体。结果显示:arf6包含一个长度为528bp的开放阅读框(Open reading frame,ORF),预测编码175个氨基酸,理论分子质量为20 080,pI为8.97。结构特征分析显示,猪ARF6蛋白质含有典型的p loop、switch区、interswitch区和N端疏水区的Hasp,在N端第二位含有可被肉豆蔻酰基化的甘氨酸。arf6分布没有组织特异性。经过表达和纯化的ARF6-GST融合蛋白质可作为制备抗血清的抗原。

降钙素基因相关肽对二磷酸腺苷和去乙酰毛花甙丙引起实验性心律失常的影响

用药物造成大鼠实验性心律失常模型,观察CGRP的作用。实验表明,CGRP可减轻二磷酸腺苷(ADP)造成的房室传导阻滞的程度,对抗窦性停搏和室颤的发生,并能促进窦性心律的恢复;CGRP可明显对抗去乙酰毛花甙丙引起的窦性停搏、房室传导阻滞和异位性节律的发生。以上结果表明,CGRP具有明显抗心律失常的作用。

血小板二磷酸腺苷受体阻断剂治疗急性冠脉综合征的临床评估

按照循证医学的原则,回顾分析血小板二磷酸腺苷受体阻断剂治疗急性冠脉综合征的大型随机对照临床研究,明确噻氯匹定和氯吡格雷是急性冠脉综合征患者的二级预防药物,其疗效至少与阿司匹林相当。适用于阿司匹林过敏或有胃肠道禁忌证而不能耐受阿司匹林的急性冠脉综合征患者。而且,与噻氯匹定相比,应优先选用氯吡格雷,因为后者能迅速抑制血小板,对患者可能更安全。