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长链非编码RNA二磷酸腺苷依赖的葡萄糖激酶反义RNA1通过靶向miR-200b-5p促进视网膜母细胞瘤细胞增殖抑制凋亡
1
作者
邢枫
李永明
高明敏
《中华肿瘤杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第3期230-237,共8页
目的探讨长链非编码RNA二磷酸腺苷依赖的葡萄糖激酶反义RNA1(lnc RNA ADPGK-AS1)对视网膜母细胞瘤细胞增殖及凋亡的影响及其可能的作用机制。方法收集2020年2—6月河南省立眼科医院收治的31例视网膜母细胞瘤患者的肿瘤组织及其相应癌旁...
目的探讨长链非编码RNA二磷酸腺苷依赖的葡萄糖激酶反义RNA1(lnc RNA ADPGK-AS1)对视网膜母细胞瘤细胞增殖及凋亡的影响及其可能的作用机制。方法收集2020年2—6月河南省立眼科医院收治的31例视网膜母细胞瘤患者的肿瘤组织及其相应癌旁正常组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测视网膜母细胞瘤组织和癌旁正常组织中lncRNA ADPGK-AS1、miR-200b-5p的表达水平。体外培养人视网膜上皮细胞ARPE-19、人视网膜母细胞瘤细胞Y-79和WERI-Rb-1,qRT-PCR法检测lncRNA ADPGK-AS1、miR-200b-5p的表达水平。以Y-79细胞为研究对象,随机分组si-con组、si-lncRNA ADPGK-AS1组、miR-con组、miR-200b-5p组、si-lncRNA ADPGK-AS1+anti-miR-con组、si-lncRNA ADPGK-AS1+anti-miR-200b-5p组。四甲基偶氮唑蓝法、平板克隆形成实验与流式细胞术分别检测各组细胞的增殖、克隆及凋亡情况,双荧光素酶报告实验检测lncRNA ADPGK-AS1与miR-200b-5p的靶向关系,Western blot法检测Cleaved-caspase-3蛋白的表达水平。结果视网膜母细胞瘤组织中lncRNA ADPGK-AS1的表达水平高于癌旁正常组织,miR-200b-5p的表达水平低于癌旁正常组织(均P<0.05);Y-79、WERI-Rb-1细胞中lncRNA ADPGK-AS1的表达水平高于ARPE-19细胞,miR-200b-5p的表达水平低于ARPE-19细胞(均P<0.05)。si-lncRNA ADPGK-AS1组细胞吸光度(A)值(0.53±0.05)、细胞克隆形成数[(57.00±4.13)个]低于si-con组[分别为1.06±0.09和(114.00±8.03)个,均P<0.05],细胞凋亡率[(25.43±1.94)%]高于si-con组[(7.93±0.68)%,P<0.05],Cleaved-caspase-3蛋白水平高于si-con组(P<0.05)。miR-200b-5p组细胞A值(0.57±0.05)、细胞克隆形成数[(64.00±5.13)个]低于miR-con组[分别为1.05±0.08和(118.00±10.02)个,均P<0.05],细胞凋亡率[(23.15±1.62)%]高于miR-con组[(7.89±0.71)%,P<0.05],Cleaved-caspase-3蛋白水平高于miR-con组(P<0.05)。lncRNA ADPGK-AS1可靶向调控miR-200b-5p的表达。si-lncRNA ADPGK-AS1+anti-miR-200b-5p组细胞A值(1.25±0.10)、细胞克隆形成数[(125.00±10.03)个]高于si-lncRNA ADPGK-AS1+anti-miR-con组[分别为0.53±0.04和(54.00±4.39)个,均P<0.05],细胞凋亡率[(9.76±0.71)%]低于si-lncRNA ADPGK-AS1+anti-miR-con组[(25.38±1.53)%,P<0.05],Cleaved-caspase-3蛋白水平低于si-lncRNA ADPGK-AS1+anti-miR-con组(P<0.05)。结论抑制lncRNA ADPGK-AS1表达可通过靶向调控miR-200b-5p表达而抑制视网膜母细胞瘤细胞增殖及克隆形成,并可诱导细胞凋亡。
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关键词
视网膜母细胞瘤
二磷酸腺苷依赖的葡萄糖激酶反义rna1
miR-200b-5p
细胞增殖
细胞凋亡
原文传递
lncRNA ADPGK-AS1对视网膜母细胞瘤细胞生物学行为的抑制作用及其调控机制
被引量:
3
2
作者
张俊
刘彩林
卜战云
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第3期207-215,共9页
目的探讨长链非编码RNA二磷酸腺苷依赖的葡萄糖激酶反义RNA1(lncRNA ADPGK-AS1)对人视网膜母细胞瘤(RB)细胞增生、迁移和侵袭的影响及其调控机制。方法收集2017年2月至2018年11月在驻马店市中心医院和郑州大学第一附属医院接受RB手术治...
目的探讨长链非编码RNA二磷酸腺苷依赖的葡萄糖激酶反义RNA1(lncRNA ADPGK-AS1)对人视网膜母细胞瘤(RB)细胞增生、迁移和侵袭的影响及其调控机制。方法收集2017年2月至2018年11月在驻马店市中心医院和郑州大学第一附属医院接受RB手术治疗的RB患者39例39眼的术中瘤旁组织和瘤体组织标本,采用实时荧光定量PCR法检测ADPGK-AS1和miR-623在标本组织中的相对表达量。体外培养人RB细胞Y-79,将培养细胞分为小干扰RNA正常对照组(siRNA-NC组)、siRNA-ADPGK-AS1组、微小RNA正常对照组(miR-NC组)、miR-623组、siRNA-ADPGK-AS1+anti-miR-NC组和siRNA-ADPGK-AS1+anti-miR-623组,采用MTT法检测各组细胞增生率;采用Transwell小室实验检测各组细胞迁移及侵袭数;采用双荧光素酶报告实验检测Y-79细胞中ADPGK-AS1和miR-623的靶向关系;采用Western blot法检测不同干预组细胞中Ki-67、基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9蛋白表达量。结果与瘤旁组织比较,RB组织中ADPGK-AS1相对表达量升高,miR-623相对表达量明显降低,差异均有统计学意义(t=40.522、48.497,均P<0.01);与siRNA-NC组比较,siRNA-ADPGK-AS1组细胞中Ki-67蛋白相对表达量明显下降,Y-79细胞增生A值显著降低,差异均有统计学意义(t=26.833、18.522,均P<0.01);siRNA-ADPGK-AS1组细胞中MMP-2和MMP-9蛋白相对表达量明显低于siRNA-NC组,差异均有统计学意义(t=22.123、26.183,均P<0.01);siRNA-ADPGK-AS1组迁移细胞数和侵袭细胞数均明显少于siRNA-NC组,差异均有统计学意义(t=12.385、19.201,均P<0.01);双荧光素酶报告实验证实ADPGK-AS1可靶向结合miR-623;miR-623组细胞中Ki-67、MMP-2、MMP-9蛋白相对表达量明显低于miR-NC组,差异均有统计学意义(t=22.137、22.200、21.094,均P<0.01);与miR-NC组比较,miR-623组Y-79细胞增生A值显著降低且迁移细胞数和侵袭细胞数均明显减少,差异均有统计学意义(t=16.398、11.400、17.846,均P<0.01);siRNA-ADPGK-AS1+anti-miR-623组细胞中Ki-67、MMP-2和MMP-9蛋白相对表达量均明显高于siRNA-ADPGK-AS1+anti-miR-NC组,差异均有统计学意义(t=20.795、17.493、23.479,均P<0.01);与siRNA-ADPGK-AS1+anti-miR-NC组比较,siRNA-ADPGK-AS1+anti-miR-623组增生A值明显升高且迁移细胞数及侵袭细胞数明显增多,差异均有统计学意义(t=15.600、14.495、17.855,均P<0.01)。结论敲低ADPGK-AS1基因可抑制RB细胞增生、迁移和侵袭,其作用机制与miR-623的表达上调有关。
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关键词
长链非编码
rna
二磷酸
腺
苷
依赖
性
葡萄糖
激酶
反义
rna
1
微小
rna
视网膜母细胞瘤
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职称材料
题名
长链非编码RNA二磷酸腺苷依赖的葡萄糖激酶反义RNA1通过靶向miR-200b-5p促进视网膜母细胞瘤细胞增殖抑制凋亡
1
作者
邢枫
李永明
高明敏
机构
河南省立眼科医院河南省人民医院眼科
河南省人民医院神经外科
出处
《中华肿瘤杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第3期230-237,共8页
文摘
目的探讨长链非编码RNA二磷酸腺苷依赖的葡萄糖激酶反义RNA1(lnc RNA ADPGK-AS1)对视网膜母细胞瘤细胞增殖及凋亡的影响及其可能的作用机制。方法收集2020年2—6月河南省立眼科医院收治的31例视网膜母细胞瘤患者的肿瘤组织及其相应癌旁正常组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测视网膜母细胞瘤组织和癌旁正常组织中lncRNA ADPGK-AS1、miR-200b-5p的表达水平。体外培养人视网膜上皮细胞ARPE-19、人视网膜母细胞瘤细胞Y-79和WERI-Rb-1,qRT-PCR法检测lncRNA ADPGK-AS1、miR-200b-5p的表达水平。以Y-79细胞为研究对象,随机分组si-con组、si-lncRNA ADPGK-AS1组、miR-con组、miR-200b-5p组、si-lncRNA ADPGK-AS1+anti-miR-con组、si-lncRNA ADPGK-AS1+anti-miR-200b-5p组。四甲基偶氮唑蓝法、平板克隆形成实验与流式细胞术分别检测各组细胞的增殖、克隆及凋亡情况,双荧光素酶报告实验检测lncRNA ADPGK-AS1与miR-200b-5p的靶向关系,Western blot法检测Cleaved-caspase-3蛋白的表达水平。结果视网膜母细胞瘤组织中lncRNA ADPGK-AS1的表达水平高于癌旁正常组织,miR-200b-5p的表达水平低于癌旁正常组织(均P<0.05);Y-79、WERI-Rb-1细胞中lncRNA ADPGK-AS1的表达水平高于ARPE-19细胞,miR-200b-5p的表达水平低于ARPE-19细胞(均P<0.05)。si-lncRNA ADPGK-AS1组细胞吸光度(A)值(0.53±0.05)、细胞克隆形成数[(57.00±4.13)个]低于si-con组[分别为1.06±0.09和(114.00±8.03)个,均P<0.05],细胞凋亡率[(25.43±1.94)%]高于si-con组[(7.93±0.68)%,P<0.05],Cleaved-caspase-3蛋白水平高于si-con组(P<0.05)。miR-200b-5p组细胞A值(0.57±0.05)、细胞克隆形成数[(64.00±5.13)个]低于miR-con组[分别为1.05±0.08和(118.00±10.02)个,均P<0.05],细胞凋亡率[(23.15±1.62)%]高于miR-con组[(7.89±0.71)%,P<0.05],Cleaved-caspase-3蛋白水平高于miR-con组(P<0.05)。lncRNA ADPGK-AS1可靶向调控miR-200b-5p的表达。si-lncRNA ADPGK-AS1+anti-miR-200b-5p组细胞A值(1.25±0.10)、细胞克隆形成数[(125.00±10.03)个]高于si-lncRNA ADPGK-AS1+anti-miR-con组[分别为0.53±0.04和(54.00±4.39)个,均P<0.05],细胞凋亡率[(9.76±0.71)%]低于si-lncRNA ADPGK-AS1+anti-miR-con组[(25.38±1.53)%,P<0.05],Cleaved-caspase-3蛋白水平低于si-lncRNA ADPGK-AS1+anti-miR-con组(P<0.05)。结论抑制lncRNA ADPGK-AS1表达可通过靶向调控miR-200b-5p表达而抑制视网膜母细胞瘤细胞增殖及克隆形成,并可诱导细胞凋亡。
关键词
视网膜母细胞瘤
二磷酸腺苷依赖的葡萄糖激酶反义rna1
miR-200b-5p
细胞增殖
细胞凋亡
Keywords
Retinoblastoma
ADPGK-AS
1
MiR-200b-5p
Cell proliferation
Cell apoptosis
分类号
R739.7 [医药卫生—肿瘤]
原文传递
题名
lncRNA ADPGK-AS1对视网膜母细胞瘤细胞生物学行为的抑制作用及其调控机制
被引量:
3
2
作者
张俊
刘彩林
卜战云
机构
驻马店市中心医院检验科
郑州大学第一附属医院检验科
郑州大学第一附属医院眼科
出处
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第3期207-215,共9页
基金
河南省科学技术计划项目(2017225037)。
文摘
目的探讨长链非编码RNA二磷酸腺苷依赖的葡萄糖激酶反义RNA1(lncRNA ADPGK-AS1)对人视网膜母细胞瘤(RB)细胞增生、迁移和侵袭的影响及其调控机制。方法收集2017年2月至2018年11月在驻马店市中心医院和郑州大学第一附属医院接受RB手术治疗的RB患者39例39眼的术中瘤旁组织和瘤体组织标本,采用实时荧光定量PCR法检测ADPGK-AS1和miR-623在标本组织中的相对表达量。体外培养人RB细胞Y-79,将培养细胞分为小干扰RNA正常对照组(siRNA-NC组)、siRNA-ADPGK-AS1组、微小RNA正常对照组(miR-NC组)、miR-623组、siRNA-ADPGK-AS1+anti-miR-NC组和siRNA-ADPGK-AS1+anti-miR-623组,采用MTT法检测各组细胞增生率;采用Transwell小室实验检测各组细胞迁移及侵袭数;采用双荧光素酶报告实验检测Y-79细胞中ADPGK-AS1和miR-623的靶向关系;采用Western blot法检测不同干预组细胞中Ki-67、基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9蛋白表达量。结果与瘤旁组织比较,RB组织中ADPGK-AS1相对表达量升高,miR-623相对表达量明显降低,差异均有统计学意义(t=40.522、48.497,均P<0.01);与siRNA-NC组比较,siRNA-ADPGK-AS1组细胞中Ki-67蛋白相对表达量明显下降,Y-79细胞增生A值显著降低,差异均有统计学意义(t=26.833、18.522,均P<0.01);siRNA-ADPGK-AS1组细胞中MMP-2和MMP-9蛋白相对表达量明显低于siRNA-NC组,差异均有统计学意义(t=22.123、26.183,均P<0.01);siRNA-ADPGK-AS1组迁移细胞数和侵袭细胞数均明显少于siRNA-NC组,差异均有统计学意义(t=12.385、19.201,均P<0.01);双荧光素酶报告实验证实ADPGK-AS1可靶向结合miR-623;miR-623组细胞中Ki-67、MMP-2、MMP-9蛋白相对表达量明显低于miR-NC组,差异均有统计学意义(t=22.137、22.200、21.094,均P<0.01);与miR-NC组比较,miR-623组Y-79细胞增生A值显著降低且迁移细胞数和侵袭细胞数均明显减少,差异均有统计学意义(t=16.398、11.400、17.846,均P<0.01);siRNA-ADPGK-AS1+anti-miR-623组细胞中Ki-67、MMP-2和MMP-9蛋白相对表达量均明显高于siRNA-ADPGK-AS1+anti-miR-NC组,差异均有统计学意义(t=20.795、17.493、23.479,均P<0.01);与siRNA-ADPGK-AS1+anti-miR-NC组比较,siRNA-ADPGK-AS1+anti-miR-623组增生A值明显升高且迁移细胞数及侵袭细胞数明显增多,差异均有统计学意义(t=15.600、14.495、17.855,均P<0.01)。结论敲低ADPGK-AS1基因可抑制RB细胞增生、迁移和侵袭,其作用机制与miR-623的表达上调有关。
关键词
长链非编码
rna
二磷酸
腺
苷
依赖
性
葡萄糖
激酶
反义
rna
1
微小
rna
视网膜母细胞瘤
Keywords
Long noncoding
rna
Adenosine diphosphate-dependent glucokinase antisense
rna
1
Micro
rna
Retinoblastoma
分类号
R739.7 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
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1
长链非编码RNA二磷酸腺苷依赖的葡萄糖激酶反义RNA1通过靶向miR-200b-5p促进视网膜母细胞瘤细胞增殖抑制凋亡
邢枫
李永明
高明敏
《中华肿瘤杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023
0
原文传递
2
lncRNA ADPGK-AS1对视网膜母细胞瘤细胞生物学行为的抑制作用及其调控机制
张俊
刘彩林
卜战云
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021
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