二精灵抗衰老作用的药理实验研究

目的：研究开发中医古方二精丸。方法：运用跳台法，水迷宫法和相关指标的测定进行二精灵对Ｄ半乳糖所致亚急性衰老模型小鼠影响的研究。结果：表明本品可显著提高衰老模型小鼠的学习和记忆力、明显提高肝组织ＳＯＤ活性、明显降低肝组织ＬＰＯ含量以及显著增加胸腺免疫器官指数等。结论：提示本品具有明显改善衰老模型小鼠学习记忆功能和延缓衰老的作用。

复方二精灵多糖对谷氨酸诱导的海马神经元凋亡的保护作用

目的探讨中药复方二精灵多糖(EJL)预防阿尔茨海默病的机制。方法实验分为正常对照组、模型(100μmol.L-1谷氨酸诱导)组、阳性对照组(50μmol.L-1多奈哌齐)及EJL实验组(0.5,1.0,2.0及3.0g.L-1)。体外培养9d的海马神经元先用各药物预处理一定时间后,加入谷氨酸。采用MTT法、Hoechst 33258荧光染色、流式细胞术和Western蛋白质印迹法等方法检测细胞凋亡。结果MTT检测发现,随着EJL浓度的增加,细胞的存活率也增加;与模型组〔(59.6±4.6)%〕比较,EJL2.0及3.0g.L-1组细胞存活率明显升高〔(82.8±2.8)%和(89.4±4.1)%;n=3,P<0.05〕。荧光染色观察形态学变化发现,EJL预处理组凋亡细胞明显减少。FITC-Annexin Ⅴ和PI双染,在直方图中可以发现,模型组的凋亡率为32.33%,EJL预处理组则分别为24.33%,22.01%及12.12%。Western蛋白质印迹法结果显示,与模型组比,EJL2.0g.L-1预处理可以显著提高Bcl-2蛋白表达量,减少Bax蛋白表达量。结论EJL对海马神经元有一定的保护作用。

复方二精灵多糖抗脑缺血缺氧损伤的分子机理

目的:研究复方二精灵多糖抗脑缺血损伤的分子机理。方法:采用全细胞膜片钳技术记录急性分离的小鼠海马CA1区神经元电压门控性钠电流,观察复方二精灵多糖对钠电流的影响,拟从离子通道水平揭示复方二精灵的抗缺血缺氧脑损伤作用。结果:0.1%复方二精灵多糖显著抑制海马神经元电压门控性钠通道电流锋值,使钠电流的半激活电压向去极化方向偏移,不影响钠电流的稳态失活及复活曲线。结论:复方二精灵多糖对海马神经元电压门控性钠电流的抑制作用可能为复方二精灵抗缺血缺氧脑损伤的重要机理。

复方二精灵多糖的分离纯化与结构的初步研究

目的从复方二精灵中分离多糖并研究其结构。方法以黄精和枸杞子为材料,经热水提取、乙醇沉淀得二精灵多糖,通过二乙氨基乙基纤维素柱、凝胶渗透柱层析分离纯化,并采用高效液相色谱、红外吸收光谱、气相色谱进行结构分析。结果得两个多糖组分2 JLⅠ-和2 JLⅡ,2 JLⅠ主要是由阿拉伯糖、木糖、半乳糖、甘露糖和葡萄糖组成,相对分子量为811000;2 JLⅡ由半乳糖、葡萄糖和甘露糖组成,相对分子量为2000。结论首次从复方二精灵中提取分离出两种纯多糖,该实验方法为以后二精灵多糖的研究提供了基础。

复方二精灵抗老年性痴呆的药理实验研究

目的 :研究复方二精灵 (2JL)对谷氨酸 (Glu)及过氧化氧 (H2 O2 )引起的离体培养神经细胞损伤的保护作用和整体抗痴呆作用。方法 :运用体外原代胚胎大鼠皮层神经细胞培养技术建立皮层神经细胞损伤的模型 ,观察服用了 2JL的兔血清对神经细胞的生长发育、细胞组织形态学变化以及其他有关生化指标的影响 ;对急性不完全性缺血缺氧大鼠脑组织乳酸 (LA)含量、脑组织形态学的影响 ;对三氯化铝所致拟痴呆小鼠的学习记忆能力、脑组织超微结构的影响等。结果 :服药血清 2JL可拮抗Glu介导的神经兴奋性毒作用和对H2 O2 引起的离体培养神经细胞损伤有不同程度的保护作用 ,见神经细胞存活率明显提高 ,LDH漏出减少、细胞膜LPO含量降低、GSH PX活性升高 ;2JL能明显降低缺血缺氧大鼠脑组织LA含量 ,明显提高拟痴呆小鼠的脑重系数、学习记忆能力 ;改善脑组织超微结构的变化 ,使神经元变性及细胞肿胀情况减轻 ,管周间隙减小。结论 :结果提示 ,2JL具有明显的保护脑细胞而发挥抗老年痴呆作用。