目的从少量猪肝组织中分离纯化硫酸乙酰肝素(HS)并进行二糖组成分析。方法分别采用胰蛋白酶及中性蛋白酶对猪肝组织进行酶解,再分别采用AG 50W-X2强阳离子交换色谱、Sephadex G-10凝胶过滤色谱、Q-Sepharose Fast Flow强阴离子交换色谱...目的从少量猪肝组织中分离纯化硫酸乙酰肝素(HS)并进行二糖组成分析。方法分别采用胰蛋白酶及中性蛋白酶对猪肝组织进行酶解,再分别采用AG 50W-X2强阳离子交换色谱、Sephadex G-10凝胶过滤色谱、Q-Sepharose Fast Flow强阴离子交换色谱法纯化。将纯化的HS分别采用肝素酶Ⅰ和Ⅲ降解,所得到的二糖经2-氨基苯甲酰胺标记后,采用PA03色谱柱分析其二糖组成。结果经色谱和电泳分析,所得到的HS不含蛋白质及其它糖胺聚糖,其二糖组成以非硫酸化和低硫酸化二糖为主。结论该方法可以有效分离、纯化猪肝组织中的HS,并适用于少量组织中HS二糖组成分析。展开更多
目的从平颏海蛇皮中提取分离糖胺聚糖(GAGs),并对其结构进行初步表征。方法对海蛇皮进行脱脂处理后,采用木瓜蛋白酶和胰蛋白酶联合酶解提取粗多糖,采用氯代十六烷基吡啶(CPC)沉淀和Q-Sepharose Fast Flow离子交换树脂对粗多糖进行分离...目的从平颏海蛇皮中提取分离糖胺聚糖(GAGs),并对其结构进行初步表征。方法对海蛇皮进行脱脂处理后,采用木瓜蛋白酶和胰蛋白酶联合酶解提取粗多糖,采用氯代十六烷基吡啶(CPC)沉淀和Q-Sepharose Fast Flow离子交换树脂对粗多糖进行分离纯化。运用醋酸纤维素薄膜电泳分析其GAGs种类,采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生高效液相色谱(HPLC)法分析其单糖组成,利用硫酸软骨素酶降解结合质谱和强阴离子交换色谱(SAX-HPLC)法分析其二糖组成。结果获得了2种GAGs纯化组分,并对其中1种含量较高的纯化组分(HSAP-2)进行了初步结构表征。HSAP-2中含有4种二糖,主要为单硫酸化二糖(4S和6S);单糖组成中含有艾杜糖醛酸(IdoA)、葡萄糖醛酸(GlcA)和乙酰氨基半乳糖(GalNAc);是1种高度杂合的新型硫酸皮肤素(DS)。结论从平颏海蛇皮中分离纯化获得了1种结构新颖的DS,为平颏海蛇多糖结构与生物活性的深入研究提供了基础。展开更多
文摘目的从少量猪肝组织中分离纯化硫酸乙酰肝素(HS)并进行二糖组成分析。方法分别采用胰蛋白酶及中性蛋白酶对猪肝组织进行酶解,再分别采用AG 50W-X2强阳离子交换色谱、Sephadex G-10凝胶过滤色谱、Q-Sepharose Fast Flow强阴离子交换色谱法纯化。将纯化的HS分别采用肝素酶Ⅰ和Ⅲ降解,所得到的二糖经2-氨基苯甲酰胺标记后,采用PA03色谱柱分析其二糖组成。结果经色谱和电泳分析,所得到的HS不含蛋白质及其它糖胺聚糖,其二糖组成以非硫酸化和低硫酸化二糖为主。结论该方法可以有效分离、纯化猪肝组织中的HS,并适用于少量组织中HS二糖组成分析。
文摘目的从平颏海蛇皮中提取分离糖胺聚糖(GAGs),并对其结构进行初步表征。方法对海蛇皮进行脱脂处理后,采用木瓜蛋白酶和胰蛋白酶联合酶解提取粗多糖,采用氯代十六烷基吡啶(CPC)沉淀和Q-Sepharose Fast Flow离子交换树脂对粗多糖进行分离纯化。运用醋酸纤维素薄膜电泳分析其GAGs种类,采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生高效液相色谱(HPLC)法分析其单糖组成,利用硫酸软骨素酶降解结合质谱和强阴离子交换色谱(SAX-HPLC)法分析其二糖组成。结果获得了2种GAGs纯化组分,并对其中1种含量较高的纯化组分(HSAP-2)进行了初步结构表征。HSAP-2中含有4种二糖,主要为单硫酸化二糖(4S和6S);单糖组成中含有艾杜糖醛酸(IdoA)、葡萄糖醛酸(GlcA)和乙酰氨基半乳糖(GalNAc);是1种高度杂合的新型硫酸皮肤素(DS)。结论从平颏海蛇皮中分离纯化获得了1种结构新颖的DS,为平颏海蛇多糖结构与生物活性的深入研究提供了基础。