中心切割二维液相色谱-串联质谱法测定卷烟主流烟气中4种芳香胺类化合物的含量

提出了中心切割二维液相色谱-串联质谱法(2DLC-MS/MS)测定卷烟主流烟气中1-氨基萘(1-NA)、2-氨基萘(2-NA)、3-氨基联苯(3-ABP)和4-氨基联苯(4-ABP)等4种芳香胺类化合物含量的方法。用剑桥滤片捕集20支卷烟烟气粒相物,加入200μL 1 mg·L^(-1)混合内标溶液和20 mL 5%(质量分数)盐酸溶液,超声萃取30 min。分取10 mL,加入1 mL 50%(质量分数)氢氧化钠溶液调节溶液酸度至pH 7,再加入2 mL二氯甲烷,涡旋振荡15 min,有机相经0.2μm聚四氟乙烯滤膜过滤。第一维液相色谱法采用强阳离子交换(SCX)色谱柱对目标物进行分离除杂,通过补偿泵在线稀释、中和有机相,目标物被保留于捕集柱,随后目标物被洗脱至第二维反相(RP)色谱系统,分离后在质谱检测器的多反应监测(MRM)模式下,采用内标法定量分析。结果表明:1-NA和2-NA标准曲线的线性范围为0.50~50.0μg·L^(-1),3-ABP和4-ABP标准曲线的线性范围为0.25~50.0μg·L^(-1),检出限(3S/N)为0.002~0.008 ng·支^(-1);4种目标物在3个加标浓度水平下的回收率为86.0%~97.4%,日间精密度与日内精密度试验所得测定值的相对标准偏差均小于8.0%。对市售烤烟型和混合型卷烟样品进行分析,所得混合型卷烟烟气芳香胺类化合物的测定值与盒标焦油量呈正相关,而烤烟型卷烟无明显线性关系。

二维液相色谱检测脑胶质瘤患者同步放化疗及辅助化疗期间的血浆替莫唑胺峰浓度

目的 建立胶质瘤患者血浆替莫唑胺峰浓度的快速测定方法,并分析同步放化疗及辅助化疗期间其血药浓度分布的特点。方法 血浆以盐酸酸化后加冰乙腈去蛋白处理,离心分取上清。样本经Aston SNCB一维色谱柱(4.6 mm×50 mm,5 μm)在线萃取,在Aston SBR二维色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱分离。一维流动相为 MVV-1C型样本萃取液,流速为0.8 mL·min^(-1);二维流动相由OPI-2A型、BPI-2C型、API-2C型、MPI-2A型样本萃取液组成,流速为1.2 mL·min^(-1);进样量200 μL,柱温40℃,检测波长330 nm。结果 血浆替莫唑胺在0.4~25.6 μg·mL^(-1)与峰面积线性关系良好(r=0.9995),转移回收率大于96.50%,提取回收率大于95.72%,日内、日间准确度和精密度良好。测定53例患者血浆样本,同步放化疗期间患者替莫唑胺剂量标准化平均峰浓度明显大于其辅助化疗期间(8.25 μg·mL^(-1) vs 5.82 μg·mL^(-1));同步放化疗期间男性剂量标准化平均峰浓度低于女性(5.86 μg·mL^(-1) vs 12.33 μg·mL^(-1))。结论 该方法简便、快速、准确,适合替莫唑胺血浆峰浓度监测。

基于捕集柱阵列的制备型二维液相色谱纯化烟草中的4个组分

二维液相色谱(2D-LC)因具有较高的峰容量,在复杂样品的分离分析中获得了广泛的关注。然而,制备型2D-LC以纯化高纯单体为目标,在方法开发和设备构成等方面与分析型2D-LC有较大的不同,目前尚未得到充分的开发,在大规模的制备纯化中应用较少。本文以一套制备液相色谱模块为分离系统,以稀释泵、切换阀和捕集柱阵列为接口,构建了新型的制备型2D-LC系统,旨在规模化纯化多个活性成分。以烟叶中可以用作医药原料的烟碱、绿原酸、芦丁和茄尼醇等组分为目标物,考察了不同类型填料对样品的捕集效率、过载条件下的色谱保留行为等,优化了制备色谱条件。进而利用在线2D-LC系统实现了烟叶提取物的纯化,通过一次运行获得了4个高纯化合物。该系统具有中压色谱纯化成本低、系统在线运行自动化程度高、稳定性好及容易放大等优点。烟叶中活性化学成分的回收利用对促进烟草行业的发展及带动地方农业经济开发具有重大的意义。

固相萃取-二维液相色谱法同时测定婴儿配方乳粉中V_(A)、V_(D)和V_(E)

建立了同时测定婴儿配方乳粉中V_(A)、V_(D)和V_(E)含量的固相萃取-二维液相色谱法。通过正交试验优化皂化条件,样品皂化液经TUP-E76-2060固相萃取柱净化后,以赛默飞FOODKIT1 ADE-C18色谱柱(150 mm×3.0 mm,3μm)作为一维分析柱,完成V_(A)和V_(E)的定量及V_(D)的净化,以赛默飞FOCDKIT1&2ADE-C18色谱柱(100 mm×4.6 mm,2.6μm)作为二维分析柱,完成对V_(D)的定量分析。结果显示,V_(A)、V_(D)和V_(E)分别在质量浓度为0.005~5、0.01~10和0.5~500μg/mL范围内与色谱峰面积具有良好的线性,相关系数分别为0.9996、0.9998和0.9999。与国标法比较,该方法在灵敏度、准确度及精密度等方面均有不同程度的提升,尤其是V_(A)的定量限提高了30倍,V_(D)的回收率提升了1.6倍。该方法样品处理过程简便快捷,准确稳健,可满足实验室大批量样品快速分析的需求。

二维液相色谱技术及其在中药研究中的应用

随着分析技术的进步,基于高效液相色谱发展出二维液相色谱技术。二维液相色谱是将分离机制不同而又相互独立的两根色谱柱串联起来构成的分离系统。相比于传统的一维液相色谱,二维液相色谱具有峰容量大、特异性强、灵敏度高、分离能力强等优点,广泛应用于药品、食品等研究领域。中药成分复杂,许多成分结构相似、极性差异小,难以分离,传统的分析技术对于中药基质的研究具有一定局限性,二维液相色谱的出现使中药分析更加简便、快速、全面,推动了中药研究的进展。文章总结了二维液相色谱技术的概念、特点,以及对近年来不同分离模式的二维液相色谱在中药研究中的应用,为该技术今后的进一步发展与应用提供一定参考。

基于超滤管过滤联合二维液相色谱荧光法测定血浆中替考拉宁游离浓度

目的建立超滤管过滤联合二维液相色谱荧光法测定血浆中替考拉宁游离浓度的方法,用于临床患者血液中游离低浓度替考拉宁的测定。方法血浆样本经超滤离心管过滤后,取150μL下层滤液,加入150μL的40%叔丁醇溶液后进样。采用“柱柱”二维模式分离,流动相为水(A,1.0 mmol/L磷酸氢二铵水溶液,磷酸调pH至7.40)、水(B,1.0 mmol/L磷酸氢二铵水溶液,pH为3.00)、乙腈(C),发射波长333 nm,灵敏度设置为“中”,增益为“×4”,柱温为40℃,进样量为80μL。第一维色谱柱为苯基柱SRC,流动相为A∶B∶C=33∶45∶22(V/V/V),流速:0.8 mL/min;第二维色谱柱为C_(18)柱SCB,流动相为A∶B∶C=23∶40∶37(V/V/V),流速1.2 mL/min。结果替考拉宁在0.5—50.0μg/mL与峰面积线性关系良好(R^(2)=0.9998),定量限为0.5μg/mL,相对回收率为96.8%—99.7%。日内精密度RSD为0.3%—3.8%,日间精密度RSD为0.3%—3.5%。结论建立的方法专属性强、操作简便、结果准确,可以用于临床多种合并用药情况下的替考拉宁血药浓度检测,为医生和药师临床剂量调整和个体化用药提供参考。

在线二维液相色谱法测定发酵虫草菌粉(Cs-4)中6种活性物质

目的:建立发酵虫草菌粉(Cs-4)中尿嘧啶、尿苷、腺苷、腺嘌呤、鸟苷、麦角甾醇6种活性物质的二维液相色谱测定方法。方法:采用二维液相色谱测定法,第一维色谱系统采用亲水相互作用色谱柱,第二维系统采用C18色谱柱。样品经乙腈溶液提取,过滤后进样,5种核苷和碱基在第一维液相系统分离测定,麦角甾醇在第二维液相系统测定。结果:方法中各物质线性范围:尿嘧啶,0.3~30μg·mL-1;尿苷,0.4~40μg·mL-1;腺苷,0.8~80μg·mL-1;腺嘌呤,1.0~100μg·mL-1;鸟苷,2.5~250μg·mL-1;麦角甾醇1.5~150μg·mL-1。方法中各物质加样回收率范围与精密度:尿嘧啶,96.7%~103.4%,1.8%~3.1%;尿苷,98.9%~101.4%,1.7%~2.6%;腺苷,95.9%~104.7%,1.5%~3.5%;腺嘌呤,97.0%~104.0%,1.4%~4.0%;鸟苷,98.2%~101.4%,1.9%~3.1%;麦角甾醇,96.0%~102.0%,2.5%~3.7%。结论:本研究方法显著提高了分析效率,准确度高,可满足药物评价、质量监督等工作的需求;对发展发酵虫草菌粉(Cs-4)等中药复杂成分分离方法,指导药物临床使用具有重要意义。

在线固相萃取/二维液相色谱法同时测定婴幼儿配方奶粉中多种脂溶性维生素

利用在线固相萃取技术结合二维液相色谱仪,建立婴幼儿配方奶粉中维生素A、D、E、K 1同时测定的方法。将奶粉样品皂化后,利用PLRP-S聚合物为填料的在线固相萃取柱净化强碱性皂化液,以五氟苯基柱为一维色谱柱,在紫外检测器上分离维生素A、E,以多环芳烃柱为二维色谱柱,在二极管阵列检测器上分离维生素D 2、D 3和K 1,建立在线固相萃取/二维液相色谱分析方法。对该方法进行方法验证,并与现行食品安全国家标准进行结果对比。维生素A、D、E、K 1在标准曲线浓度范围内线性良好,维生素A、维生素D 2、维生素D 3、α-维生素E、β-维生素E、δ-维生素E、γ-维生素E和维生素K 1检出限分别为4.0、1.0、1.0、40.0、40.0、40.0、40.0、4.0μg/100g,定量限分别为10、2.5、2.5、100.0、100.0、100.0、100.0、10.0μg/100g,加标回收率为91.23%~107.2%,相对标准偏差为0.67%~8.06%。该方法操作简单,重复性好,准确度高,能够满足婴幼儿配方奶粉中多种脂溶性维生素的同时检测。

在线固相萃取-二维液相色谱法同时测定儿童配方奶粉中维生素A、D、E

建立在线固相萃取(SPE)-二维液相色谱法同时测定儿童配方奶粉中脂溶性维生素A、D_(2)、D_(3)和α-、β-、γ-、δ-维生素E含量的方法。样品经皂化后直接进样,以聚合物为填料的PLRP-S色谱柱为在线固相萃取柱净化皂化液,采用SPE泵反向洗脱目标组分,并通过引入在线稀释将目标组分聚焦在第一维色谱柱柱头。以NuovaSil^(TM)PFP(4.6 mm×150 mm,3μm)为第一维色谱柱,甲醇-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,分离维生素A和E的4种异构体。以ChromCore PAH(4.6 mm×150 mm,3μm)为第二维色谱柱,甲醇-乙腈(90:10,v/v)为流动相,分离维生素D_(2)和D_(3)。结果表明,维生素A在5.0~500.0 ng/mL、维生素D在1.0~100.0 ng/mL、维生素E在50.0~5000.0 ng/mL线性范围内线性良好,相关系数均大于0.9999。维生素A、D_(2)、D_(3)和α-、β-、γ-、δ-维生素E的定量限分别为5.11、1.22、1.25、83.82、57.27、56.61、54.82μg/100 g。加标回收率为91.20%~104.47%,相对标准偏差为0.94%~3.34%。结果表明本文建立的在线固相萃取-二维液相色谱系统,前处理简单、自动化程度高、分析效率高、准确度高、重复性好,适用于儿童配方奶粉中维生素A、D、E的含量测定。

二维液相色谱法同时测定婴幼儿配方奶粉中的维生素A、D、E

本文建立了二维液相色谱法同时测定婴幼儿配方奶粉中维生素A、E、D含量。样品经皂化、萃取、浓缩、定容,经二维反相色谱法测定,对所建立的方法进行方法学验证,结果表明:维生素A、D、E标准曲线线性良好,R^(2)>0.999,维生素A、E、D检出限分别为8、0.65、30μg/100 g;定量限分别为25、2、100μg/100 g,加标回收率为87.3%~96.5%,RSD为0.45%~3.80%,同时与国标法进行比较,该方法更加简便快捷,灵敏度高,结果也相对较准。

在线固相萃取-二维液相色谱法同时测定特殊医学用途配方食品中VA、VD、VE的含量

采用在线固相萃取结合二维液相色谱技术,建立一种快速测定特殊医学用途配方食品中VA、VD(VD2、VD3)和VE(α-、β-、γ-、δ-VE)含量的方法。样品皂化处理后,经过在线固相萃取小柱自动完成VA、VD、VE的富集和净化,利用第一维色谱完成VA和4种VE的定量分析,通过中心切割,将VD转移至二维色谱系统完成分离和测定。考察不同填料固相萃取柱、上样溶剂及洗脱溶剂比例,并对二维色谱分离条件进行系统优化。结果表明,各类维生素在其范围内线性良好,相关系数R2均大于0.997,平均回收率在84.4%~109.0%之间,相对标准偏差为0.34%~6.55%(n=6)。该方法自动化程度高,有效降低检测误差,检测效率高,可用于特殊医学用途配方食品中脂溶性维生素的测定。

二维液相色谱法测定人血浆中泊沙康唑药物浓度及其在儿科临床的应用

目的建立一种测定血浆中泊沙康唑的二维液相色谱方法,并应用于临床检测。方法全血经过离心、去蛋白前处理后进样分析,通过一维液相色谱柱Aston SX1(3.5 mm×25 mm,5μm)对泊沙康唑进行初步萃取分离,由中间柱Aston SCB(4.6 mm×125 mm,5μm)转移至二维液相色谱柱Aston SCB(4.6 mm×10 mm,3.5μm)进行最终的分离分析。一维流动相为甲醇-乙腈-磷酸铵盐水溶液=1∶3∶3(V/V/V,氨水调pH至7.00),流速0.7 mL·min^(-1);二维液相色谱系统流动相为25 mmol·L^(-1)磷酸铵盐水溶液-1.0 mmol·L^(-1)磷酸氢二铵溶液-乙腈=18∶22∶60,流速1.0 mL·min^(-1)。柱温40℃,紫外检测波长262 nm,进样量200μL。结果泊沙康唑与血浆中其他杂质分离良好,质量浓度在0.042~3.04 mg·L^(-1)与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9993),平均回收率为100.74%。结论本法准确可靠,适用于临床开展常规泊沙康唑血药浓度监测及药动学研究。

二维液相色谱模拟柱后衍生系统检测粮食中黄曲霉毒素总量

为建立一种由二维液相色谱模拟柱后衍生系统测定粮食中黄曲霉毒素B族G族总量的检测方法。以水68%+乙腈16%+甲醇16%为流动相,等度洗脱,流速:1.0 mL/min;柱温:40℃;进样体积:100μL;衍生溶液:5 mg/L三溴化吡啶(TECH)水溶液;衍生液流速:0.3 mL/min;衍生反应器温度:70℃;荧光检测器参数设置为EM=360 nm,EX=440 nm。经检测,黄曲霉毒素总量均有较好的线性关系,线性相关系数r^(2)均大于0.999。检出限在0.01~0.03μg/kg之间。加标回收率为87%~103%。用所建方法同LS/T 6128-2017从时间、样品处理及最后结果上进行对比分析,该方法简单、快速,结果准确,灵敏度高。

二维液相色谱在食品检测方面的应用进展

色谱技术在食品分离分析方面应用广泛。随着食品工业的发展,对现代分析技术提出了更高要求,二维液相色谱在揭示食品复杂基质组成、提供高分离能力和未知调味化合物识别方面具有明显优势。二维液相色谱通过将两个独立的色谱分离过程组合到一起实现。文章首先介绍了二维液相色谱技术,然后对二维液相色谱在食品溯源和安全、食品质量和添加剂、食品营养和健康方面的应用展开了讨论。随着技术的发展,二维液相色谱在食品分离分析方面的应用价值将会持续增大。

在线柱切换二维液相色谱法测定市售液态乳品中维生素D3的含量

采用双梯度中心切割液相色谱分离系统,建立在线柱切换二维高效液相色谱法测定液态乳品中维生素D3含量的方法。样品经过60℃皂化1h、萃取浓缩后进样,一维色谱采用C8色谱柱初步分离,确定维生素D3的中心切割时间,经捕获柱捕集维生素D3馏分转入二维色谱PAH柱进一步分离。一维梯度以甲醇-水体系作为流动相,流速为0.8 mL/min,二维梯度以甲醇-乙腈体系作为流动相,流速为0.3mL/min,检测波长为264nm。维生素D3在0.1~0.8mg/L范围内的相关系数r为0.9993;回收率为91.2%~98.2%;相对标准偏差为1.6%~3.8%(n=6);将该方法对实际样品的检测结果与国标法的测定结果进行对比,结果表明其准确度和稳定性均优于标准方法。本方法操作简便,回收率高,重现性好,可用于市售液态乳品中维生素D3的检测。

在线二维液相色谱技术在中药研究中的应用进展

中药的组成复杂,其化学成分的表征和识别一直是中药研究的基础和关键。在线二维液相色谱是基于两种分离模式构建的色谱分析技术,主要包括中心切割二维液相色谱和全二维液相色谱两种模式,因二者具有更高的峰容量而在中药研究中备受青睐。该文对在线二维液相色谱技术的概念和特点进行了讨论,并对二维液相色谱在中药研究中的应用进行了综述,以期为该技术在中药质量控制、物质基础表征、活性成分筛选等研究方面提供一定参考。

运用二维液相色谱-质谱联用技术快速测定伊沙佐米合成过程中微量杂质

目的:建立一种运用二维液相色谱-质谱联用技术快速测定伊沙佐米合成过程中微量杂质的新方法。方法:一维体系中,使用质谱不兼容流动相0.1%三氟乙酸水溶液(A)-乙腈(B)对伊沙佐米与杂质进行正常分离,二维体系中使用质谱兼容流动相0.5%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)连接高分辨质谱对杂质进行质荷比的检测。通过软件控制阀切换,使一维体系中的目标杂质峰切入二维体系中,根据测定的分子离子峰及二级碎片质荷比,结合合成工艺,进行杂质初步推断。结果:液相分离出的杂质结合质谱精确分子量,参考伊沙佐米可能的断裂机制,解析了杂质结构。并在实验室进行了定向合成,通过液相色谱分析,进一步佐证了鉴定杂质结果的准确性。结论:建立的二维液相色谱-质谱联用新方法,可快速实现伊沙佐米合成过程中微量杂质的定性分析,为伊沙佐米的合成工艺优化与质量控制提供参考。

二维液相色谱法对特殊医学用途配方食品中维生素A、D、E含量的检测

特殊医学用途配方食品的基质较为复杂,且目标物含量较低,因此对其中维生素准确定量具有较大难度。本方法采用了一个同时测定维生素A、D、E的稳定高效的在线固相萃取-二维液相色谱方法。本方法利用SPE柱净化皂化液,通过六通阀的转化后注入一维色谱柱进行洗脱分离,利用阀切换模式进入二维系统再次分离。该方法的测定结果与国标方法基本一致,方法学满足国标要求。本方法采用三泵两个检测器,实现了皂化液定容后直接上样测定,简化了前处理步骤,提高了分析效率,对环境更友好。

在线二维液相色谱技术及其在中药质量控制中的应用与展望

由于复杂体系样品分离需要更强的分离能力,二维色谱能使样品组分在两个不同的分离条件下进行分离,显著提高分离能力,降低色谱峰重叠,同时改善色谱峰鉴定的可靠性,在中药质量控制中发挥重要作用。不同的二维色谱技术中,在线全二维液相色谱技术由于其在较短时间内可以获得高峰容量、样品损失低、重现性好及自动化程度高,成为对于复杂体系分离时最受关注,发展最迅速的技术。本文讨论了二维液相色谱技术,尤其是在线全二维色谱技术的概念、特点和分离优势,及其在中药复杂体系质量控制分析中的应用,为该技术在中药质量控制中提供一定参考。

二维液相色谱切换技术及其应用

多维液相色谱已成为复杂样品研究的重要工具。本文在介绍多维液相色谱原理与方法的基础上,重点讨论了二维液相色谱接口切换技术的近期发展,并对其应用现状进行了总结分析。