新型微填充柱－毛细管柱二维色谱系统的理论研究（Ⅱ）──双柱条件对柱效的影响

从色谱动力学角度探讨了改变微填充柱－毛细管柱二维色谱系统中双柱条件对柱效的影响规律，进一步证实了短填充柱接长毛细管柱及高预柱柱温、快预柱载气线速有利于提高双柱系统柱效的结论；同时，通过对主柱柱温、载气线速及柱间分流比的讨论，从理论和实验上也证实了相对较低的主柱柱温、较慢主柱线速以及稍大的分流比有益于柱效利用率的提高．

新型二维色谱系统建立重症医院获得性肺炎患者中替加环素含量的测定方法研究

目的研究新型二维色谱系统建立重症医院获得性肺炎患者中替加环素含量的测定方法。方法60例重症医院获得性肺炎患者为研究对象,建立新型二维色谱系统,包括一维液相色谱柱、中间色谱柱、二维色谱柱,测定血清中替加环素质量浓度,计算方法为内标法,观察应用效果。结果替加环素为1500~2500 ng/ml时的线性关系最好(r=0.999),符合方法学验证要求;替加环素低、中、高质量浓度的绝对回收率分别94.9%、95.3%、96.2%,符合转移回收率要求(90%~110%);日间、日内精密度均<3%。结论新型二维色谱系统是一种可靠的重症医院获得性肺炎患者中替加环素含量的测定方法,操作简便,精密度高。

正相模式/反相模式的二维液相色谱系统的构建与应用

以50mm×4.6mm的Hypersil SiO2正相色谱柱为第一维色谱系统,250mm×4.6mm的Kromasil C18反相色谱柱为第二维色谱系统,通过升高第二维色谱温度增加两维色谱流动相间互溶性的方法构建了定量环-阀切换接口的二维液相色谱系统(NPLC×RPLC)。根据有机溶剂的特征,在第一维正相色谱流动相中加入二氧六环,第二维反相色谱流动相中加入异丙醇,由此改善流动相兼容性的同时,有效地调整了分离选择性。采用此系统对中成药正天丸样品进行分离分析,峰容量达到1220的色谱系统。

IEX/RP二维液相色谱中弱保留组分收集模式的构建及系统评价

以十通阀和捕集柱接口形式,构建了弱阴离子交换/反相(WAX/RP)二维液相色谱分离系统。通过将第一维离子交换色谱分析中的前部集中洗脱出的弱保留组分收集后单独分析,剩余样品进一步采用二维液相色谱分析,可以有效避免第二维色谱柱对特殊样品局部集中流出导致的第二维分离超柱容量问题,提高了系统的整体分离能力。使用4种蛋白胰蛋白酶酶解后的多肽样品评价该系统,在不分流的系统中共检测到115个峰。对第一维分离的前15 m in分流后得到的组分单独分析,共识别出58个峰,后续的二维分离中共得到78个峰。2种方法相比,第二种方法检测峰数增加了21个,一些低丰度的组分在弱保留组分收集后被识别。

NPLC×RPLC二维液相色谱系统分离分析牛黄解毒片提取物成分的实验研究

构建了定量环-阀切换接口的二维液相色谱系统(NPLC×RPLC),采用此系统对牛黄解毒片样品进行分离分析,以4.6mm×50 mm i. d.的SiO_2正相色谱柱为第一维,4.6mm×250 mm i. d.的C18反相色谱柱为第二维。根据有机溶剂的特征,在第一维正相色谱流动相中加入1,4—二氧六环;第二维反相色谱流动相中加入异丙醇,同时通过升高第二维色谱温度的方法增加两维流动相间互溶性,在改善流动相兼容性的同时,有效调整分离选择性。最终,通过总共440min的七次切割共检测出了153个峰,达到950的峰容量。

基于二维液相色谱系统的沙利度胺血药浓度测定

目的建立使用全自动二维液相色谱系统(2D-LC-UV)测定人血清中沙利度胺含量的方法,并对全自动二维色谱特征及方法学进行考察。方法人血清经过蛋白沉淀处理后进样,在一维Aston SC2色谱柱上进行在线富集及初级分离,通过中间柱Aston SH4富集保留,最后转移到第二维Aston SBR色谱柱上进一步分离检测。第一维流动相为甲醇-乙腈-10 mmol·L^-1磷酸铵水溶液=1∶1∶10(V/V/V)(pH=4.50),泵流速0.6 mL·min^-1;第二维流动相为1.0 mmoL·L^-1磷酸氢二铵水溶液(pH=7.40)-1.0 mmoL·L^-1磷酸氢二铵水溶液(pH=3.00)-甲醇-乙腈=20∶30∶8∶42(V/V/V/V),泵流速1.2 mL·min^-1,柱温40℃,检测波长298 nm。结果沙利度胺在0.0488~4.8800 μg·mL^-1内线性关系良好,定量限为0.0488 μg·mL^-1;方法回收率在105.6%~110.4%,日内、日间变异系数均小于7.4%;稳定性试验结果表明血清样品在处理过程中较稳定。结论该方法灵敏度高,稳定性好,适用于人血清沙利度胺的血药浓度含量测定研究。

全谱二维液相色谱检测丹参中的活性成分

本文利用岛津全谱二维液相色谱系统,建立了一针进样分析丹参中脂溶性和水溶性活性成分的液相色谱方法.相对于2020年版《中华人民共和国药典》需要分两个方法进行分析,本方法仅用21 min,可以实现丹参酮ⅡA、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ和丹酚酸B的同时分离,分离度良好,满足药典要求.方法学验证结果表明,4种成分在线性范围内相关性良好,线性相关系数均大于0.999;连续6次重复进样分析中,4种成分的保留时间的RSD在0.018%—0.085%之间,峰面积的RSD在0.10%—0.38%之间,说明本方法稳定性良好.加标回收实验,4种成分的加标回收在89.63%—118.15%之间,RSD在0.31%—4.99%之间.使用本方法检测某丹参样品含量,平行6次分析结果的RSD在2.64%—4.21%之间.

高温二维液相色谱系统的构建及其评价

在二维液相色谱中,第二维的分离速度是制约其发展的重要因素.升高色谱柱温度可以有效降低流动相粘度,加快溶质在两相间的传质速率,有效加快分析速度.以离子交换色谱法(WAX)为第一维分离模式和反相色谱法(RP)为第二维分离模式,十通阀和两个捕集柱为接口,通过将第二维色谱柱温度升高到80℃和提高流量到3 mL/min,构建了高温WAX/RP二维液相色谱系统.以4种标准蛋白的酶解物为样品评价系统的分离性能,第一维共有33个馏分被捕集并导入到第二维分析,高温二维液相色谱系统识别出187个色谱峰.