建立2D-HPLC同时检测钩藤碱、异钩藤碱、去氢钩藤碱、异去氢钩藤碱的方法

目的建立二维高效液相色谱法(2D-HPLC)同时检测钩藤碱、异钩藤碱、去氢钩藤碱、异去氢钩藤碱四种钩藤生物碱含量的方法。方法采用Aston SC2(3.5 mm×25 mm,5μm)一维色谱柱,Aston SH C_(18)(3.5 mm×10 mm,5μm)中间色谱柱,Aston SCB(4.6 mm×125 mm,5μm)分析色谱柱,一维流动相为CAA-1,分析流动相为BPI-1∶MPI-1∶OPI=45∶14∶41,流速1.0 mL/min,柱温40℃,检测波长254 nm,进样量500μL,分析时间9.5 min。结果钩藤碱、异钩藤碱、去氢钩藤碱、异去氢钩藤碱线性范围分别为9.77~10000.00 ng/mL(r=0.9996)、10.74~11000.00 ng/mL(r=0.9997)、10.74~11000.00 ng/mL(r=0.9997)、10.74~11000.00 ng/mL(r=0.9996),精密度、稳定性和重复性相对标准偏差(RSD)<5.00%,准确度为95.20%~104.01%,方法回收率为93.63%~101.38%。结论建立的2D-HPLC同时检测钩藤中四种生物碱含量的方法简单准确,可作为钩藤药材质量控制的新方法。