1α,25-二羟基维生素D_(3)对哮喘小鼠SIRT1、GATA-3表达及气道炎症水平的影响

目的探究1α,25-二羟基维生素D_(3)对哮喘小鼠气道炎症变化的影响及可能机制。方法将24只SPF级BALB/c小鼠随机分为对照组、哮喘组、哮喘+1α,25-二羟基维生素D_(3)(哮喘+VD_(3))组,每组8只。哮喘组和哮喘+VD_(3)组小鼠于第1、8、15天给予卵清蛋白(OVA)混悬液0.2 ml致敏,对照组给予生理盐水0.2 ml;哮喘组和哮喘+VD_(3)组于第22~28天使用1%OVA雾化吸入激发,对照组给予等量生理盐水雾化吸入,每次雾化30 min,1次/d,连续激发7 d;哮喘+VD_(3)组每次雾化前30 min给予1α,25-二羟基维生素D_(3)注射液(4μg/kg),对照组和哮喘组给予等量生理盐水。最后一次激发后麻醉处理采集小鼠血清、支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织标本。采用HE染色和PAS染色观察肺组织病理学改变及气道黏液水平的变化;ELISA法检测血清IgE及BALF中炎性因子白细胞介素(IL)-4、IL-5、IL-13水平;免疫组化、Western blotting检测小鼠肺组织中沉默信息调节因子1(SIRT1)和GATA结合蛋白-3(GATA-3)的表达情况。采用Pearson直线相关分析肺组织SIRT1、GATA-3表达水平(SIRT1、GATA-3的平均OD值)与小鼠血清IgE及BALF中IL-4、IL-5、IL-13浓度的相关性。结果与对照组比较,哮喘组小鼠肺组织气管及伴行血管周围炎性细胞浸润明显增多,其中以嗜酸性粒细胞为主,支气管管腔狭窄,气道黏膜上皮增生,气管内黏液分泌增多;哮喘+VD_(3)组小鼠上述改变较哮喘组减轻。与对照组比较,哮喘组小鼠血清IgE和BALF中IL-4、IL-5、IL-13等炎性因子水平及肺组织中GATA-3表达均增高(P<0.05),肺组织中SIRT1表达降低(P<0.05);与哮喘组比较,哮喘+VD_(3)组小鼠血清IgE和BALF中IL-4、IL-5、IL-13水平及肺组织GATA-3表达均降低(P<0.05),肺组织SIRT1表达增高(P<0.05)。相关性分析结果显示,小鼠肺组织SIRT1表达水平与GATA-3表达量、血清IgG及BALF中IL-4、IL-5、IL-13水平均呈负相关(P<0.05);小鼠肺组织GATA-3表达水平与血清IgG及BALF中IL-4、IL-5、IL-13水平均呈正相关(P<0.05)。结论1α,25-二羟基维生素D_(3)可缓解哮喘小鼠的气道炎症,其机制可能是通过上调肺组织中SIRT1的表达,抑制GATA-3的表达,进而降低炎性因子(IL-4、IL-5、IL-13)水平。

1,25-二羟基维生素D3在临床医学领域中的研究进展

维生D具有调节钙、磷代谢,影响细胞分化等生理功能。越来越多的研究表明维生素D缺乏与多种疾病的发生与发展相关,例如骨质疏松症、免疫性疾病、帕金森病、动脉粥样硬化、肿瘤等。本文主要就维生素D在临床医学治疗领域的研究进展作一综述。

长波紫外线和中波紫外线对去卵巢骨质疏松大鼠1,25-二羟基维生素D_3和骨代谢影响的比较

目的:探讨长波紫外线(ultraviolet A,UVA)和中波紫外线(ultraviolet B,UVB)对去卵巢骨质疏松(osteo-porosis)模型大鼠的血清1,25-二羟基维生素D3[1,25-dihydroxy-vitamin D3,1,25(OH)2D3]和骨代谢的影响,并比较UVA和UVB的治疗效果。方法:将40只健康雌性6月龄SD大鼠随机分为假手术对照组(sham)、模型组(OVX)、UVA照射组(OVX+UVA)、UVB照射组(OVX+UVB)。除假手术对照组外,其余各组经双侧卵巢切除术建立骨质疏松大鼠模型。模型建立后,对UVA照射组和UVB照射组分别使用波长340 nm和313 nm的紫外线进行照射治疗,15周后测定大鼠骨密度及血清1,25(OH)2D3、骨钙素(bone gamma-carboxyglutamic acid protein,BGP)、钙(calcium,Ca)和磷(phosphorus,P)的含量。结果:去卵巢术后6个月,与假手术对照组相比,模型组、UVA照射组和UVB照射组大鼠体重[(486.5±55.7)g,(488.3±32.1)g,(494.1±49.8)g,vs.(408.6±36.1)g,P<0.01]显著升高,股骨近心端骨密度[(0.318±0.025)g/cm2,(0.316±0.031)g/cm2,(0.322±0.036)g/cm2,vs.(0.386±0.027)g/cm2,P<0.01]、中心骨密度[(0.321±0.038)g/cm2,(0.319±0.051)g/cm2,(0.320±0.053)g/cm2,vs.(0.347±0.044)g/cm2,P<0.05)]和远心端骨密度[(0.320±0.028)g/cm2,(0.318±0.030)g/cm2,(0.322±0.036)g/cm2,vs.(0.361±0.046)g/cm2,P<0.01]显著降低,差异有统计学意义。紫外线照射15周后,与假手术对照组相比,模型组大鼠股骨近心端骨密度[(0.162±0.125)g/cm2vs.(0.293±0.076)g/cm2,P<0.01]、中心骨密度[(0.205±0.102)g/cm2vs.(0.306±0.031)g/cm2,P<0.01]和远心端骨密度[(0.153±0.119)g/cm2vs.(0.274±0.017)g/cm2,P<0.01]显著降低,血清1,25(OH)2D3[(19.80±1.67)ng/L vs.(28.35±4.32)ng/L,P<0.01]、骨钙素[(11.00±0.01)ng/L vs.(16.64±0.01)ng/L,P<0.01]和钙[(2.14±0.10)mmol/L vs.(2.68±0.16)mmol/L,P<0.01]含量显著降低,差异有统计学意义。与模型组相比,UVA照射组和UVB照射组股骨近心端骨密度[(0.248±0.092)g/cm2,(0.218±0.123)g/cm2,vs.(0.162±0.125)g/cm2,P<0.01]、中心骨密度[(0.272±0.010)g/cm2,(0.275±0.036)g/cm2,vs.(0.205±0.102)g/cm2,P<0.01]、远心端骨密度[(0.251±0.009)g/cm2,(0.242±0.063)g/cm2,vs.(0.153±0.119)g/cm2,P<0.01]显著升高,血清1,25(OH)2D3[(29.47±4.54)ng/L,(27.56±6.33)ng/L,vs.(19.80±1.67)ng/L,P<0.01]、骨钙素[(15.70±0.01)ng/L,(15.62±0.02)ng/L,vs.(11.00±0.01)ng/L,P<0.01]、钙[(2.48±0.22)mmol/L,(2.58±0.13)mmol/L,vs.(2.14±0.10)mmol/L,P<0.01]含量显著升高,差异有统计学意义。与UVB照射组相比,UVA照射组大鼠血清1,25(OH)2D3、骨钙素、钙和磷含量及骨密度的差异无统计学意义。结论:UVA和UVB均能提高去卵巢骨质疏松模型大鼠血清1,25(OH)2D3含量,促进骨形成,升高骨密度,缓解骨质疏松造成的骨质丢失。

1,25-二羟基维生素D_3抑制K562细胞增殖及其机制

目的观察1,25二-羟基维生素D3〔1,25(OH)2D3〕对白血病细胞株K562增殖的影响并初步探讨其作用机制。方法间接免疫荧光法鉴定维生素D受体(VDR)在K562细胞的表达;四噻唑蓝法(MTT)、AO/EB、流式细胞PI单染分析细胞生长抑制率、细胞凋亡率及细胞周期;比色法检测凋亡信号蛋白———天冬酰胺特异酶切的半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)活性。结果①K562细胞核阳性表达VDR;②10-8mol.L-11,25(OH)2D3可明显抑制K562细胞增殖,促进凋亡,凋亡率从4.1%(对照组)增至26.5%,P<0.01;③1,25(OH)2D3作用后K562细胞的Caspase-3活性增加,P<0.05,提示细胞凋亡伴随着Caspaes-3活性升高。结论1,25(OH)2D3可明显抑制K562细胞增殖,促进细胞凋亡,其作用机制与Caspase-3活性增加相关。

1,25-二羟基维生素D_3对原发性骨质疏松骨折愈合影响的骨形态计量学研究

目的观察1,25-二羟基维生素D3(1,25-dihydroxyvitaminD3,1,25(OH)2D3)对原发性骨质疏松骨折愈合中骨形态计量学的影响。方法通过对Ⅰ型骨质疏松骨折模型和Ⅱ型骨质疏松骨折模型进行1,25(OH)2D3干预,8周后对骨痂组织进行形态计量学测定。结果在Ⅰ型骨质疏松骨折模型和Ⅱ型骨质疏松骨折模型中,1,25(OH)2D3干预组的骨体积和骨小梁厚度均较无1,25(OH)2D3干预组显著提高(P<0.05或P<0.01),1,25(OH)2D3干预组的骨小梁间距较无1,25(OH)2D3干预组明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论1,25(OH)2D3对Ⅰ型和Ⅱ型骨质疏松骨折愈合均有促进作用。

利用薯蓣皂甙元完整骨架形式合成1α,25-二羟基维生素D_3

首次利用薯蓣皂甙元的完整骨架经16步反应以7.6%的总收率合成了骨化三醇(1α,25-二羟基维生素D3)的光化反应前体.3-苄基保护的薯蓣皂甙元经还原开E/F环产生3,16,26-胆甾三醇-3-苄醚(5).除去化合物5C-16羟基后,其C-26羟基经消除和羟基化反应转移到C-25位.目标分子A/B环结构单元通过薯蓣皂甙元A/B环的官能团转化被构筑.按照已知的光化反应,(1S,3R)-胆甾-5,7-二烯-1,3,25-三醇能被转化成为1α,25-二羟基维生素D3.

1,25二羟基维生素D3与冠状动脉钙化积分的相关性及临床诊断价值研究

目的探讨1,25二羟基维生素D3[1,25(OH)2D3]与冠状动脉钙化积分的关系及其临床诊断价值。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测健康人和冠状动脉不同钙化积分冠心病患者血清中1,25(OH)2D3水平,并进行统计分析,绘制ROC曲线分析其诊断性能。结果 1,25(OH)2D3在对照组与不同钙化积分疾病组之间、以及对照组与疾病组之间其血清水平浓度差异显著,疾病组血清中1,25(OH)2D3含量明显下降;钙化积分与1,25(OH)2D3呈负相关(P<0.05);ROC曲线显示1,25(OH)2D3曲线下面积为0.616,诊断阈值为70.77pg/mL,诊断灵敏度为48.50%,特异性为95.80%,约登指数为0.43。结论1,25(OH)2D3在对照组和疾病组中表达不同,与钙化积分呈负相关,对冠心病诊断价值明显,可以为动脉粥样硬化的预防和治疗提供一种新的策略。

1,25-二羟基维生素D_3对Th17细胞调控的研究进展

1,25-二羟基维生素D3[1,25（OH）2D3]是维生素D在体内的主要活性代谢产物。在体内具有多方面活性,如调节肾、肠道钙、磷代谢及组织生长分化等功能,主要通过维生素D受体（VDR）来介导。1,25（OH）2D3具有免疫调节作用,可多方位调控机体免疫功能,

小青龙汤对支气管哮喘寒饮蕴肺证大鼠1,25二羟基维生素D_3水平的影响

目的:探讨小青龙汤对支气管哮喘寒饮蕴肺证大鼠的可能作用机制。方法:将52只SPF级Wistar雄性大鼠随机分为空白对照组、模型组、1,25(OH)_2D_3组和小青龙汤组,每组13只。除空白对照组外,其余各组均进行支气管哮喘寒饮蕴肺证模型造模。各组大鼠从第2天起灌胃,每次1.6 m L/100 g,1次/d,持续至第22天实验结束。空白对照组给予生理盐水灌胃,1,25(OH)_2D_3组腹腔注射1,25(OH)_2D_3混合液5×103U/100g,小青龙汤组给予小青龙汤煎剂灌胃。观察大鼠一般行为学及体征变化,检测大鼠血清IL-5和1,25(OH)_2D_3的含量。结果:通过综合评价发现小青龙汤和1,25(OH)_2D_3对大鼠支气管哮喘寒饮蕴肺证的症状和体征改善均发挥一定作用,小青龙汤组最明显,1,25(OH)_2D_3次之;与模型组比较,小青龙汤组IL-5含量有非常显著差异(P<0.01),1,25(OH)_2D_3组IL-5含量有显著差异(P<0.05),以小青龙汤组最显著;模型组与空白对照组大鼠1,25(OH)_2D_3的含量对比有显著性差异(P<0.05),小青龙汤组大鼠1,25(OH)_2D_3的含量与模型组对比有显著性差异(P<0.05),提示小青龙汤能提升大鼠体内1,25(OH)_2D_3的含量。结论:小青龙汤能有效提升支气管哮喘寒饮蕴肺证大鼠体内1,25二羟基维生素D3水平,从而提高多种免疫细胞的活性,增强机体免疫力,抑制支气管哮喘的炎症反应、改善哮喘气道重塑。这可能是其治疗哮喘的作用机制之一。

1,25-二羟基维生素D_3对小鼠非酒精性脂肪肝性肝纤维化进程的抑制作用

目的:探讨1,25-二羟基维生素D3[1,25-dihydroxyvitamin D3,1,25(OH)2D3]对蛋氨酸-胆碱缺乏(methionine-choline-deficient,MCD)饮食诱导的非酒精性脂肪肝性肝纤维化的抑制作用及其可能机制.方法:将30只C57BL/6J小鼠随机分为正常组、模型组和干预组,每组10只.采用MCD饮食诱导建立非酒精性脂肪肝性肝纤维化模型.其中,模型组和干预组饲以MCD饲料.干预组给予1,25(OH)2D3(5μg/kg)腹腔注射,正常组和模型组给予同样剂量的生理盐水腹腔注射,2次/wk.干预8wk后,试剂盒检测小鼠血清谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)和谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)水平;肝组织苏木素和伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色观察组织形态学变化;RT-PCR检测转化生长因子β(transforming growth factor beta,TGF-β)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)和Ⅰ型胶原mRNA的表达.结果:与正常组相比,模型组小鼠ALT和AST水平以及TGF-1,α-SMA和Ⅰ型胶原mRNA的表达均明显升高(P=0.000,P=0.000,P=0.044,P=0.003,P=0.027);而与模型组相比,1,25(OH)2D3干预组除了TGF-β1mRNA的表达无变化外,其他指标均显著下降(P=0.000,P=0.005,P=0.020,P=0.027).HE染色结果显示,模型组肝组织可见大量脂肪变性(胞质内充满大小较一致的脂滴空泡),且血管周围炎症细胞浸润严重;而干预组两者程度都有减轻,但后者效果更明显.结论:1,25(OH)2D3可改善肝功能,且可能通过对-SMA和Ⅰ型胶原基因的调控达到减缓MCD饮食诱导的非酒精性脂肪肝性肝纤维化进程的目的.

2型糖尿病患者血清1,25-二羟基维生素D_3的变化及意义

目的:比较2型糖尿病患者与正常人之间血清1,25-二羟基维生素D3[1,25(OH)2D3]水平的差异,分析维生素D与2型糖尿病的关系。方法:选择2型糖尿病患者110例为病例组,同期本院健康体检者105例为对照组。用ELISA法测定血清1,25(OH)2D3水平,同时进行问卷调查并检测相关临床及生化指标,统计分析。结果:血清1,25(OH)2D3在病例组和对照组中的差异明显(P<0.01),血清1,25(OH)2D3与空腹血糖呈显著负相关(rs=-0.696,P<0.01)。结论:血清1,25(OH)2D3在2型糖尿患者中明显低于正常人。空腹血糖越高,血清1,25(OH)2D3越低。

1,25-二羟基维生素D_3对肠黏膜屏障的保护作用及机制探讨

目的观察1,25-二羟基维生素D3[1,25-(OH)_2VitD_3]对肠黏膜屏障的保护作用,并探讨其可能的机制,为其在结肠炎治疗中的应用提供依据。方法培养结肠癌Caco-2细胞,模拟人小肠上皮细胞单层细胞屏障;将细胞随机分为3组,A组不处理,B组加2%右旋葡聚糖硫酸钠(DSS)1 m L模拟结肠炎损伤,C组先用10-8mmol/L的1,25-(OH)_2VitD_3处理24 h再加入DSS 1 m L,干预后培养1 h。透射电镜下观察Caco-2单层细胞屏障超微结构变化,采用免疫荧光染色法检测紧密连接蛋白claudin-1、zo-1和occludin的表达。结果透射电镜下,A组细胞顶部出现排列整齐、分化良好的微绒毛状结构,相邻细胞间的顶端呈现紧密连接样结构;B组细胞局部微绒毛消失或减少,紧密连接样结构消失;C组细胞微绒毛分化较B组好,相邻细胞间的局部微绒毛消失不明显。免疫荧光染色显示,A组3种紧密连接蛋白荧光条带连续完整,荧光强度高;B组紧密连接蛋白荧光条带断续不完整,荧光强度弱;C组紧密连接蛋白荧光条带较清晰连续,且荧光强度增强。结论 1,25-(OH)_2VitD_3可通过增加细胞间紧密连接蛋白的表达发挥其对肠黏膜屏障的保护作用,为其在结肠炎中的应用提供了理论依据。

盐酸埃克替尼联合1α,25-二羟基维生素D_3对人肺腺癌A549细胞增殖及EGFR表达的影响

目的:研究盐酸埃克替尼和1α,25-二羟基维生素D3单药及联合用药对人肺腺癌A549细胞增殖及表皮生长因子受体(EGFR)表达的影响。方法:盐酸埃克替尼和1α,25-二羟基维生素D3单药及联合用药处理A549细胞后,用CCK-8法检测细胞增殖抑制率的变化;用Western blot法及RT-PCR法分别检测细胞EGFR蛋白及EGFR mRNA表达的变化。结果:与单药盐酸埃克替尼组和1α,25-二羟基维生素D3组相比,联合用药组具有更强的细胞增殖抑制作用(P均<0.05);联合用药组及1α,25-二羟基维生素D3单药组EGFR蛋白及EGFR mRNA表达水平较阴性对照组及盐酸埃克替尼单药组有明显升高(P均<0.05)。结论:盐酸埃克替尼与1α,25-二羟基维生素D3联合用药对人肺腺癌A549细胞具有协同抗增殖作用;其机制可能与1α,25-二羟基维生素D3升高了EGFR mRNA及EGFR蛋白的表达,从而更有利于盐酸埃克替尼发挥抗肿瘤作用有关。

葛根素抑制1，25-二羟基维生素D3促破骨细胞骨吸收功能的最佳剂量

背景:近年来国内外学者对葛根素的骨形成研究较多,但对于葛根素抑制1,25-(OH)2D3促破骨细胞骨吸收功能尚未见报道。目的:观察不同浓度葛根素在体外对1,25-(OH)2D3促破骨细胞骨吸收功能的抑制作用。方法:收集3周龄小鼠骨髓细胞并接种到24孔培养板中。实验组培养液为1,25-(OH)2D3+α-MEM完全培养基+不同质量浓度的葛根素,对照组不加葛根素。结果与结论:不同浓度组葛根素处理的培养体系均诱导出破骨样细胞且形态差异不明显;除100μg/L葛根素组在第3天时碱性磷酸酶表达显著增高外,各组之间培养液上清中碱性磷酸酶水平无显著性差异(P>0.05);10μg/L葛根素组培养液上清Ca2+水平在第3,5,12天时较对照组显著降低(P<0.05～0.01),50μg/L葛根素组培养液上清Ca2+水平在第12天时较对照组显著降低(P<0.01),100μg/L葛根素组培养液上清Ca2+水平在所有检测点较10μg/L葛根素组显著上升(P<0.05)。提示葛根素最佳抑制剂量在10～50μg/L之间。

1,25-二羟基维生素D_3对溃疡性结肠炎小鼠免疫调节机制的研究

目的探讨1,25-二羟基维生素D_3[1,25(OH)_2D_3]对溃疡性结肠炎模型小鼠IL-23/IL-17的免疫调节机制。方法 2009年1—12月在河北中医药研究所,将30只小鼠随机分为1,25(OH)_2D_3干预组、模型组、对照组,前2组建立慢性期肠炎模型;观察小鼠一般情况及结肠病理变化,应用免疫组织化学染色测定结肠组织TNF-α、TGF-β炎性因子的变化;Western blot检测结肠组织IL-17、IL-23蛋白的表达。结果模型组小鼠结肠黏膜缺损,腺体破坏或消失,显微镜下可见黏膜、黏膜下层甚至肌层大量炎性细胞浸润;但1,25(OH)_2D_3干预后小鼠一般情况明显改善,炎性细胞浸润减少,炎性反应程度较模型组明显减轻;与模型组比较,干预组结肠组织TNF-α、TGF-β阳性细胞染色面积明显减小(F=280.48、358.75,P<0.01),结肠组织中IL-17、IL-23蛋白表达量显著降低(F=1 447.52、1457.57,P<0.01)。结论 1,25(OH)_2D_3对溃疡性结肠炎模型小鼠的肠黏膜组织及其IL-23/IL-17具有免疫调节作用。

1,25-二羟基维生素D_3对鼠宫颈癌免疫作用的研究

目的探讨1,25-二羟基维生素D3(1,25-(OH)2D3)对裸鼠宫颈癌移植瘤生长的抑制作用。方法制备BALC/c裸鼠皮下宫颈癌模型20只,随机分为4组:1,25-(OH)2D3组、单纯放疗组、1,25-(OH)2D3+放疗组及对照组,每组5只。观察各组裸鼠肿瘤的生长情况、裸鼠的一般情况,测量肿瘤直径并计算瘤体积。断颈处死裸鼠,天平称量肿瘤的重量。测定引流淋巴结中单个核细胞中CD4+、CD4+CD25+含量。结果 1,25-(OH)2D3组及单纯放疗组对肿瘤生长均有抑制作用,二者联合作用抑制更显著。1,25-(OH)2D3组、单纯放疗组及1,25-(OH)2D3+放疗组抑瘤率分别为34.8%、52.1%、54.1%。1,25-(OH)2D3干预后CD4+、CD4+CD25+含量与对照组及放疗组差异无统计学意义,而CD4+CD25+/CD4+在1,25-(OH)2D3组与对照组相比差异显著(P<0.05),1,25-(OH)2D3+放疗组与对照组相比差异显著(P<0.01)。结论 1,25-(OH)2D3+放疗对对裸鼠移植瘤宫颈癌生长有显著免疫抑制作用,为宫颈癌的综合治疗提供了实验依据。

1,25二羟基维生素D_3对大鼠脾CD4^+CD25^+调节性T细胞及Foxp3基因表达的影响

目的:探究1,25二羟基维生素D3[1,25(OH)2D3]对大鼠脾CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)及其特异性转录因子Foxp3基因表达的影响。方法:近交系雄性Lewis大鼠,随机分成对照组和3个剂量的VitD3组:0.125μg组,0.25μg组和1μg组,每组30只;灌胃给药,3次/周,共2周后对照组给予赋形剂;各组随机抽取20只大鼠,于第15 d腹腔注射脂多糖(LPS)(10 mg/kg),随机选择其中10只于6 h后切取脾,其余10只观察注射LPS后96 h大鼠的病死率,同时留取未注射LPS大鼠的脾;流式细胞仪检测脾CD4+CD25+Treg数量变化,RT-PCR检测脾Foxp3 mRNA表达。结果:1,25(OH)2D3明显上调大鼠脾CD4+CD25+Treg的数量及特异性转录因子Foxp3mRNA的表达;1,25(OH)2D3能保护大鼠抵抗LPS的攻击。结论:1,25(OH)2D3对大鼠脾CD4+CD25+调节性T细胞及特异性转录因子Foxp3 mRNA的表达有显著影响。1,25(OH)2D3保护大鼠抵抗LPS攻击可能与其促进CD4+CD25+Treg的发育和功能有关。

不同剂量1,25二羟基维生素预处理对局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨不同剂量1,25二羟基维生素预处理对局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法将60只SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组和VD30.5、1.0、1.5μg/kg预处理组,比较各组神经行为评分、炎性因子及TRL2、4水平。结果与模型组相比,随着VD3剂量的增加,神经行为评分和脑梗死面积均明显减少,VD3-3组改善最为明显(P<0.05);随着剂量的增高,各实验组IL-6和TNF-α水平降低越明显,具有明显的剂量变化趋势(P<0.05);IL-10、MDA各组变化差异无统计学意义(P>0.05);VD3各组TRL2和TRL4均明显低于模型组,且随着VD3剂量增加,TRL2和TRL4降低程度明显增加(P<0.05);再灌注5d后观察各组大鼠存活情况,以VD3-3组为最高83.33%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 VD3对局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用具有剂量依赖性,其机制可能与抑制TLR2、4信号转导通路,减少炎性因子产生有关。

不同剂量1,25二羟基维生素D3预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制探讨

目的探讨不同剂量1,25二羟基维生素D3预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法将60只SD雄性大鼠随机分为假手术组、局灶性脑缺血再灌注损伤模型组,并用高、中、低不同剂量1,25二羟基维生素D3对大鼠进行预处理,比较各组氧化/抗氧化指标、微血管密度(MVD)和微血管面积密度(MVA)、血管内皮生长因子(VEGF)和核因子-κB(NF-κB)结果。结果随着剂量增加,各组神经行为学评分和脑梗死面积逐渐降低,高剂量组与中、低剂量组差异具有统计学意义(P<0.05);不同1,25二羟基维生素D3剂量大鼠超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)明显升高,脂质过氧化物(LPO)和晚期蛋白质氧化产物(AOPP)明显下降,LPO和CAT三个剂量组间两两比较差异具有统计学意义(P<0.05),高剂量组SOD、AOPP与中、低剂量组差异有统计学意义(P<0.05),但中、低剂量组差异无统计学意义(P>0.05);MVD、MVA和VEGF均有增加趋势,且各组间差异具有统计学意义(P<0.05);随着剂量增加,各组NF-κB均呈现下降趋势,且随着反应时间延长,高剂量组干预效果更为明显(P<0.05),中、低剂量组差异逐渐减少(P>0.05)。结论 1,25二羟基维生素D3对局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用具有剂量依赖性,其机制可能与抑制NF-κB炎性信号通路、减少氧自由基损伤和促进微血管再生有关。

1,25-二羟基维生素D_3对大鼠非酒精性脂肪性肝炎的防治作用及机制

目的探讨1,25-二羟基维生素D3〔1,25(OH)2D3〕对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的防治作用及可能的机制。方法将雄性Wistar大鼠采用(自由摄取)胆碱缺乏氨基酸(CDAA)饮食诱导建立NASH模型的同时,每周2次(周二和周六)ip给予1,25(OH)2D31,5和10μg·kg-1。第12周末,测量大鼠体质量、肝质量,计算肝指数;检测血清谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(CHO)和肝组织TG水平;苏木素和伊红染色、天狼星红染色观察肝组织形态学变化;免疫组织化学法检测CD68、转化生长因子β1(TGF-β1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达。结果与正常组相比,模型组大鼠肝指数明显增加(P<0.01);血清GPT和GOT和肝组织TG水平明显升高(P<0.01),血清CHO水平升高(P<0.05),肝组织NAS积分和CD68,TGF-β1和α-SMA的表达明显升高(P<0.01)。与模型组相比,给予1,25(OH)2D3治疗后,5μg·kg-1剂量组肝指数下降(P<0.05);血清GPT和GOT活性均明显下降(P<0.05);5μg·kg-1剂量组血清TG水平显著升高(P<0.01);5μg·kg-1剂量组肝组织TG水平、NAS积分和CD68,TGF-β1,α-SMA表达明显降低(P<0.05)。结论 1,25(OH)2D3可通过抑制肝组织的CD68、TGF-β1和α-SMA蛋白表达改善NASH大鼠炎症。