枯草杆菌蛋白酶与3,4-二羟基-2-蒽醌磺酸钠的作用机理

用UV光谱法研究了枯草杆菌蛋白酶 (BSP)在pH =4 2 0的酸性溶液中与 3,4 二羟基 2 蒽醌磺酸钠(ARS)的相互作用。测得生成的缔合物的最大吸收峰为 5 15nm ,与试剂相比红移 95nm。应用平衡透析法、摩尔比法和双波长法进行测定 ,结果表明 ,表观摩尔吸光系数εB1=5 89× 10 3 L/ (mol·cm) ,εB2 =4 6 8×10 3 L/ (mol·cm) ,结合数n1=13和n2 =4 5 ,积累平衡常数 β1=5 2 7× 10 4L/mol和 β2 =3 5 4× 10 5L/mol。第 1类结合数完全符合BSP空间构象中活性中心的作用原子数。研究发现 ,该反应基本符合Scatchard模型 ,BSP与ARS之间的作用以电荷力为主、疏水力为辅。

1,2-二羟基蒽醌-3-磺酸钠固相萃取光度法测定微量钒(Ⅴ)

研究了1，2-二羟基蒽醌-3-磺酸钠与钒（Ⅴ）的显色反应，建立了测定钒的光度分析新方法。在pH4．0的醋酸一醋酸钠缓冲溶液中，在溴化十六烷基三甲基铵（CTMAB）存在下，1，2-二羟基蒽醌-3-磺酸钠与钒（Ⅴ）反应生成摩尔比为2：1稳定络合物，该络合物可用阳离子交换树脂固相萃取柱富集，吸附柱上富集的络合物用乙醇洗脱后用分光光度法测定。分离后的测定液中，络合物最大吸收波长为420nm，表现摩尔吸光系数ε=1．16×10^5L·mol^-1·cm^-1，钒量在0～0．4μg／mL内符合比尔定律，相关系数r=0．9989，对30余种共存离子进行试验，大多数常见离子不干扰测定。方法用于合金、矿石、粉煤灰中钒的分析，相对标准偏差小于3％，加标回收率为96％～105％。