大豆二羟异黄酮及三羟异黄酮的高效液相色谱分析

1mol/L盐酸水解大豆及豆制品 ,乙腈提取 ,高效液相色谱分析二羟、三羟异黄酮的含量。以甲醇 -2mmol/L乙酸铵(体积比55∶45,乙酸铵溶液用乙酸调 pH至4.380)为流动相 ,HypersilBDSC18 色谱分析柱 ,柱温25℃ ,260nm紫外检测波长进行分析。二羟、三羟异黄酮在1～500μmol/L的范围内 ,与峰面积有很好的线性关系 (r=0.9999)。它们的检出限为5ng(S/N=3) ,平均回收率94.46 %以上 ,6次进样的相对标准差 (RSD)小于4 %。该法灵敏、重复性好、结果准确、分析迅速。检测大豆及豆制品中异黄酮的含量 ,得到满意的结果。

雌二醇、二羟异黄酮对乳腺癌MDA-MB-231细胞周期和增殖活性的影响

检测雌二醇、二羟异黄酮对乳腺癌MDA-MB-231(MM231)细胞周期和增殖活性的影响,从而为研究其功能提供线索。采用MTT法检测细胞增殖活性;流式细胞仪(FCM)检测细胞周期的变化。得到雌二醇作为雌激素类药物,一定浓度能够促使乳腺癌MM231细胞G2/M期阻滞,引发凋亡;而二羟异黄酮作为植物雌激素,一定浓度也能使MM231细胞G2/M期阻滞,并能抑制MM231细胞生长,促使其凋亡。说明二羟异黄酮和雌二醇作为竞争性抑制剂,都可以抑制乳腺癌MM231细胞的生长,为临床治疗乳腺癌奠定了一定理论基础。

二羟异黄酮和三羟异黄酮对CHO细胞抗氧化活性的比较研究

目的:研究二羟异黄酮(Daidzein)和三羟异黄酮(Genistein)对H2O2诱导的中国仓鼠卵巢细胞(CHO)氧化损伤的保护作用及探讨其抗氧化活性的作用机制。方法:H2O2体外培养CHO细胞建立细胞氧化损伤模型,预先加入三羟异黄酮和二羟异黄酮(0.25～20μmol/L)作用24h作为保护后再加入100μmol/LH2O2作用3h,显微镜下观察CHO细胞形态改变,MTT法检测活细胞数,LDH法检测细胞的损伤情况,MDA生成量和SOD活性的测定检测细胞膜脂质过氧化反应程度。结果:H2O2处理细胞3h后,细胞形态发生明显改变,胞体变小、突起缩回;MTT吸光值减小,活细胞数减少;MDA生成量和LDH释放量明显增多,SOD活性下降,与正常对照组比较有显著性差异(P<0.01)。Daidzein处理组和Genistein处理组细胞形态明显改善,MTT吸光值显著增加,MDA生成量和LDH释放量明显减少,与H2O2处理组相比有显著性差异(P<0.01)。结论:与三羟异黄酮相比,二羟异黄酮一样能显著抑制H2O2对CHO细胞的氧化损伤,且具有较强的保护作用。

三羟异黄酮对乳腺癌异种移植瘤血管生成影响

目的 探讨三羟异黄酮 (genistein)对原癌基因 (HER -2 /neu)高表达乳腺癌血管形成的影响及其与血管内皮生长因子 (VEGF)的关系。方法 应用基因转染技术建立HER -2 /neu高表达的乳腺癌细胞 (MCF -7/HER -2 )。免疫缺陷裸鼠 (BALB/c)皮下接种乳腺癌 (MCF -7和MCF -7/HER -2 )细胞 ,其中接种MCF -7/HER -2细胞的裸鼠随机分为 3组 :对照组 ;genistein处理组 :HER -2 /neu抗体处理组。应用免疫组化法观察移植瘤内微血管密度(microvesseldensity ,MVD)和VEGF的表达变化。结果 MCF -7/HER -2移植瘤与MCF -7移植瘤相比血管密度较大 ,VEGF表达增强 ;MCF -7/HER -2移植瘤经genistein和HER -2 /neu抗体处理后 ,移植瘤的血管密度减少 ,VEGF表达降低。结论 HER -2 /neu高表达能促进乳腺癌的血管生成 ,genistein可能通过下调VEGF的表达从而抑制HER -2

HPLC法同时测定两粤黄檀中6种成分

目的建立HPLC法同时测定两粤黄檀中甘草酸、土甘草A、4′-羟基-6-羟甲基-5,7-二甲氧基异黄酮、大鱼藤树素甲醚、大鱼藤树酸甲酯、甘草次酸的含有量。方法两粤黄檀氯仿提取物的分析采用Waters-symmetry C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相甲醇-乙腈-0.2%磷酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长256 nm。结果甘草酸、土甘草A、4′-羟基-6-羟甲基-5,7-二甲氧基异黄酮、大鱼藤树素甲醚、大鱼藤树酸甲酯、甘草次酸分别在0.07~2.50(r=0.999 2)、0.03~1.15(r=0.999 2)、0.02~0.55(r=0.999 3)、0.01~0.26(r=0.999 8)、0.01~0.25(r=0.999 6)、0.01~0.36(r=0.999 0)mg/mL范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为100.7%、101.5%、101.0%、97.4%、96.4%、100.5%,RSD分别为2.1%、2.1%、1.8%、2.0%、1.5%、2.1%。结论该方法准确稳定,重复性好,可用于两粤黄檀的质量控制。

大豆苷原对体外培养人胃癌细胞增殖和细胞周期的影响

目的:了解二羟异黄酮对胃癌细胞有无促增殖与诱导凋亡作用。方法:以不同浓度的二羟异黄酮处理人胃癌细胞系MGC-803细胞。然后分别用MTT法测定细胞增殖情况、流式细胞仪和琼脂糖凝胶电泳测定细胞周期和细胞凋亡等。结果:MTT 结果显示:二羟异黄酮对胃癌细胞具有促进和抑制增殖的双相作用-在低浓度(0.1-1 μmol/L)时促进细胞生长,在较高浓度(10-100 μmol/L)时对细胞生长则有抑制作用。流式细胞术结果显示:癌细胞群阻滞在G1期,没有明显凋亡峰的出现;凝胶电泳也末检测到明显的DNA阶梯状条带。结论:二羟异黄酮对体外培养的胃癌细胞的生长有双相作用,较高浓度可抑制胃癌细胞的生长并使细胞阻滞在G1期,而无诱导细胞凋亡的作用。