丹芪降压冲剂对二肾一夹型高血压大鼠血压的影响及其机理研究

目的:研究丹芪降压冲剂对二肾一夹型高血压大鼠血压的影响和可能机制。方法:建立二肾一夹型高血压大鼠模型,随机分为假手术组、高血压对照组、中药低剂量组、中药高剂量组、开搏通组,用放免法测定血浆肾素活性(PRA)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、β-内啡肽(β-EP)和精氨酸加压素(AVP)浓度。结果:造模后大鼠血压升高;与假手术组比较,血浆 PRA、AngⅡ略升高,差异无显著性(P>0.05),血浆β-EP 降低,AVP 升高(P<0.05)。各给药组治疗后血压明显下降(P<0.05);各组治疗后高血压大鼠血浆 Ang Ⅱ、AVP降低,β-EP 升高(P<0.05)。结论:丹芪降压冲剂有降压作用,其机理可能与升高血浆β-EP,降低血浆 AVP、AngⅡ有关。

两种艾灸法对二肾一夹型高血压大鼠血压和血管内皮细胞内分泌功能的影响

目的:应用两种艾灸疗法治疗两肾一夹肾血管性高血压大鼠(2K1C-RHR),评价这两种艾灸疗法的降压作用,并对其降压机理作初步的探讨。方法:建立2K1C-RHR模型,并将其随机分为六组:灸法Ⅰ组(百会、神阙、足三里)、灸法Ⅱ组(关元、涌泉、足三里)、卡托普利组、灸法Ⅰ+卡托普利组、灸法Ⅱ+卡托普利组、高血压对照组,另设正常对照组。经过10天治疗后,测量血压,并测定血浆中内皮素(ET)、一氧化氮(NO)。结果:高血压对照组的收缩压(SBP)、舒张压(DBP)明显高于正常对照组,各治疗组的SBP、DBP明显低于高血压对照组(P<0.01),各治疗组间则没有明显差异(P>0.05)。血浆NO含量各组间没有明显差异(P>0.05)。各治疗组与正常对照组的血浆中ET含量明显低于高血压对照组(P<0.01)。各治疗组ET/NO比值接近正常对照组(P>0.05)且明显低于高血压对照组(P>0.05)。结论:两种艾灸疗法有良好的降压作用,其降压机理与及纠正ET与NO的失衡状态有关。

两种艾灸法对二肾一夹型高血压大鼠血压及血管紧张素Ⅱ、肾素活性的影响

目的:应用两种艾灸疗法治疗两肾一夹肾血管性高血压大鼠(2K1C-RHR),评价这两种艾灸疗法的降压作用,并对其降压机理作初步的探讨。方法:建立2K1C-RHR模型,并将其随机分为六组:灸法Ⅰ组(百会、神阙、足三里)、灸法Ⅱ组(关元、涌泉、足三里)、卡托普利组、灸法Ⅰ+卡托普利组、灸法Ⅱ+卡托普利组、高血压对照组,另设正常对照组。经过10天治疗后,测量血压,并测定血浆中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的含量及肾素活性(PRA)。结果:高血压对照组的收缩压(SBP)、舒张压(DBP)明显高于正常对照组,各治疗组的SBP、DBP明显低于高血压对照组(P<0.01=,各治疗组间则没有明显差异(P>0.05)。血浆AngⅡ含量、PRA高血压对照组明显高于正常对照组(P<0.01),并与卡托普利组差别不大(P>0.05),但灸法Ⅰ、Ⅱ组明显低于高血压对照组(P<0.01=。血浆NO含量各组间没有明显差异(P>0.05)。结论:两种艾灸疗法有良好的降压作用,其降压机理与抑制肾素-血管紧张素(RAS)系统活性有关。

二肾一夹高血压大鼠模型中医证候属性的探讨及药物作用观察

目的 :探讨二肾一夹高血压大鼠 (2K1C RHR)模型的中医证候属性。方法 :从中医病因学、大鼠的症状、体征特点、微观指标的检测及药物的反证等角度分析 2K1C RHR模型的证侯特点。结果 :大鼠造模后 1周即表现出体重减轻 ,尿量减少 ,饮水量增加 ,毛发干枯 ,体温上升 ,易激惹程度增高 ,该模型血浆cAMP/cGMP、血清TNF、IL 1含量均明显高于正常大鼠 ,与人类阴虚阳亢证候特点相似。滋水降火饮与六味地黄丸 ,对以上改变均有一定的调节作用 ,但在降压、降低易激惹程度等方面滋水降火饮较六味地黄丸有明显的优势。结论 :该模型不仅有阴虚的一面 ,尚有阳亢的特征 ,应属阴虚阳亢证型。

二肾一夹肾性高血压大鼠的主动脉内皮功能

目的探讨二肾一夹肾性高血压大鼠主动脉内皮功能的变化及其机制。方法利用术后四周的肾性高血压大鼠的主动脉进行离体血管环实验，并测定主动脉ｃＧＭＰ的含量。结果术后四周的二肾一夹肾性高血压大鼠的主动脉ｃＧＭＰ含量明显减少，其离体主动脉对乙酰胆碱的舒张反应减小，而对苯肾上腺素的收缩反应显著增强。巯甲丙脯酸可增加主动脉ｃＧＭＰ的含量，防止这种高血压大鼠主动脉内皮功能受损。各组大鼠的离体主动脉对硝普钠的最大舒张反应无明显差别。结论提示二肾一夹肾性高血压大鼠主动脉内皮功能失调的产生主要与血管紧张素Ⅱ形成增多和一氧化氮合成。

复方七芍降压片对二肾一夹高血压大鼠IL-6、TNF-α的影响

目的:探讨复方七芍降压片降压及防治炎症反应在高血压过程中的作用机制。方法:以90只WKY大鼠随机分为6组:正常组、假手术组、模型组、低剂量组、高剂量组、心安宁组,分别采用尾动脉法测血压,采用酶联免疫吸附双抗体夹心法测量白细胞介素-6和肿瘤坏死因子-α的含量。结果:复方七芍降压片能够降低二肾一夹高血压大鼠血压及IL-6和TNF-α。结论:复方七芍降压片能有效地降低二肾一夹高血压大鼠血压及减轻高血压过程中的炎症反应,其作用机制与复方七芍降压片降低IL-6和TNF-α有关。

2肾1夹型高血压大鼠造模方法与技巧

在医药学科研实践中,常会用到高血压动物模型。若直接购买,其价格十分昂贵（如一只高血压大鼠模型约需200元）。在经费有限的情况下,往往需要自己动手。学生们一般是在《药理实验方法学》中可找到造模方法,但书中的方法不够具体,许多细节需要在实践中摸索出来,致使成功率较低。本文就是在无数次的实验、失败中,总结出一些经验,与大家（尤其是研究生们）分享,以提高造模成功率,节省科研经费,提高科研效率。

两肾一夹型高血压合并2型糖尿病大鼠模型的实验研究

目的:建立肾血管性高血压合并2型糖尿病大鼠复合模型,通过检测不同时段的血压、血糖来观察此模型的稳定性。方法:雄性SD大鼠先采用两肾一夹法(2K1C)并饮用1.5%盐水建立高血压大鼠模型,在此模型成模的基础上喂养高糖、高脂饮食4周后经腹腔注射链尿佐菌素(35 mg/kg),然后继续予高糖、高脂饮食饲养至实验结束,检测不同时间点血压、空腹血糖、空腹胰岛素、血脂、血清C-反应蛋白,计算胰岛素敏感指数,并观察一般情况对所建模型进行评价。结果:高血压合并糖尿病组大鼠成模率70%,其血压、血糖值达到成模标准,至实验结束时较稳定,分别与假手术组、空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:成功复制高血压合并2型糖尿病大鼠模型,该模型经济、操作简单、成模率高、稳定性好。

替米沙坦逆转双肾一夹型高血压大鼠血管重塑的组织形态学改变

目的:探讨双肾一夹(2K1C)型高血压大鼠血管重塑的组织形态学改变及血管紧张素Ⅱ受体1(AT1R)阻断剂替米沙坦(telmisartan)对2K1C型高血压大鼠血管重塑的逆转作用。方法:将成年雄性wistar大鼠随机分成模型组、对照组、替米沙坦组,均在术后每周测血压,8周后处死大鼠,取胸主动脉与颈总动脉行组织形态学观察。结果:模型组血压较对照组血压明显升高(P<0.01);模型组颈总动脉与胸主动脉管壁增厚,中膜厚度/内径比值较对照组明显增加,同时中膜细胞层数较对照组增多(P<0.05);治疗8周后,替米沙坦组血压明显降低(P<0.01),动脉管壁变薄,颈总动脉与胸主动脉中膜厚度/内径分别较模型组明显减少(P<0.01),二者中膜细胞层数较模型组减少(P<0.01)。结论:在2K1C高血压大鼠模型中,wistar大鼠血压的升高导致了血管重塑;替米沙坦能够逆转血管重塑。

复方七芍降压片对二肾一夹高血压大鼠VWF的影响

目的:探讨复方七芍降压片降压及防治血栓性并发症的作用机制。方法:以90只WKY大鼠随机分为6组:正常组、假手术组、模型组、低剂量组、高剂量组、心安宁组,分别采用尾动脉法测血压,采用酶联免疫吸附双抗体夹心法测量血管性假血友病因子(VWF)的含量。结果:复方七芍降压片能够降低二肾一夹高血压大鼠(2k1 c)血压及VWF。结论:复方七芍降压片能有效地降低二肾一夹高血压大鼠血压及VWF和改善血液高凝状态,其作用机制与复方七芍降压片降低VWF有关。

滋肾平肝方对二肾一夹高血压大鼠肾损害的保护作用及机制研究

目的:探讨滋肾平肝方对二肾一夹高血压大鼠(2K1C-RHR)肾损害的保护作用及对TGFβ1/Smads信号通路的影响。方法:复制2K1C-RHR模型,造模后4周评估造模情况,选取造模成功的32只大鼠随机分为模型组,滋肾平肝方高、低剂量组,厄贝沙坦组,另选8只同龄SD大鼠为假手术组,各组大鼠连续灌胃给药8周,分别于造模4周,灌胃第2、4、6、8周检测大鼠尾动脉收缩压;给药结束后检测大鼠尿微量白蛋白(mALb)、β2-微球蛋白(β2-MG)、N-乙酰-β氨基葡萄糖苷酶(NAG)、血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、胱抑素C(CysC)含量;观察肾组织病理形态学改变;蛋白质印迹法(Western blotting法)检测TGFβ1、p-Smad2/3蛋白表达。结果:滋肾平肝方高剂量组、厄贝沙坦组血压均明显低于模型组(P<0.05,P<0.01);滋肾平肝方高剂量组尿mALb、β2-MG、NAG,血清SCr、CysC均明显降低,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);滋肾平肝方高剂量组肾组织病理损伤程度明显减轻;滋肾平肝方高剂量组、厄贝沙坦组肾组织TGFβ1、p-smad2/3蛋白表达均明显降低,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:滋肾平肝方对高血压肾损害具有保护作用,其机制可能与抑制TGFβ1/Smads信号通路有关。

前胡丙素对两肾两夹肾性高血压大鼠心脏重构及心功能的影响

目的研究前胡丙素长期灌胃给药对两肾两夹肾性高血压大鼠心脏、心功能及左室顺应性的影响。方法制作两肾两夹肾性高血压大鼠模型,前胡丙素20 mg.kg-1.d-1,连续灌胃给药9 wk,用离体大鼠工作心脏灌流法检测心功能及左室顺应性,W oessner等报道的方法测定心肌组织羟脯氨酸含量。结果与假手术对照组相比,肾性高血压左室肥厚(LVH)组大鼠CF/HWW和CO/HWW降低29.2%和38.5%,LVSP、-dp/dtm ax分别降低22.8%和43.2%;LV-EDP和T值增高172.9%和187.1%,LVEDP-V曲线左移上抬,左室肌胶原含量增加38.9%。前胡丙素组CF/HWW和CO/HWW比LVH组分别增加23.5%和37.2%,LVSP值和-dp/dtm ax负值较LVH组增加16.0%和42.7%,LVEDP和T值降低38.9%和39.0%,左室LVEDP-V曲线接近正常组水平,左室肌胶原含量降低18.9%,其作用与硝苯地平相似。结论前胡丙素可明显改善两肾两夹肾性高血压大鼠心脏舒张功能,改善心肌顺应性,同时也可改善心脏收缩功能,其作用可能是通过扩张冠状动脉,改善心肌缺血,降低心肌胶原含量而实现。

电针对二肾一夹高血压大鼠血压、血管重构的影响研究

目的:本实验研究通过电针二肾一夹高血压大鼠(2K1C-RHR)的人迎、曲池穴及两穴组穴,观察各单穴及组穴方协同降压的效果,并探讨其针刺降压的机制。方法:按照二肾一夹法建立高血压大鼠模型,随机分为空白组8只、模型组8只、治疗组24只,治疗组进行为期4 w针刺双侧人迎、曲池及人迎、曲池组穴的治疗,监测不同组、不同时期的血压变化情况,测定其血管平滑肌细胞面积(VSMC)、血管壁厚(WT)、血管内径(LD),计算WT/LD比值及血浆中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、醛固酮(ALD)的含量,并进行相互比较。结果:模型组与空白组相比,大鼠颈总动脉管壁增厚,血管内径缩小明显,WT/LD的比值明显增大,存在明显的血管重构现象,大鼠血浆AngⅡ、ALD含量显著升高;通过针刺治疗,模型组与治疗组比较,血压均明显下降,WT、LD、WT/LD比值和VSMC面积均有不同程度的改善,血浆AngⅡ、ALD含量均明显降低。结论:针刺人迎穴、曲池穴有很好的降压效果,且人迎、曲池组穴降压效果优于各个单穴;其针刺降压机制之一可能是通过改善血管重构来缓解血压的持续升高,与调节血浆中AngⅡ和ALD的含量有关。

前胡香豆素对肾型高血压大鼠左室肥厚及心肌胞内钙、Na^+,K^+-ATP酶和Ca^(2+),Mg^(2+)-ATP酶活性的影响

目的 研究前胡香豆素组分对肾型高血压左室肥厚的预防和逆转作用及机制。方法 用两肾一夹肾型高血压左室肥厚大鼠 (RHR)模型 ,测定前胡香豆素组分对其血压、左室湿重、心肌细胞面积、胞内静息钙及胞膜和线粒体ATP酶活性的影响。结果 前胡香豆素组分 ( 3 0mg·kg- 1 ·d- 1 ,ig)预防组及逆转组大鼠血压、左室湿重 体重均较肥厚组明显降低 ;左室心肌细胞面积、胞内静息钙均较肥厚组降低 ;对KCl致钙浓度升高亦明显低于肥厚组 ;两组均可增加心肌细胞膜及线粒体Na+ ,K+ ATP酶和Ca2 + ,Mg2 + ATP酶活性。结论 前胡香豆素组分可预防及逆转RHR左室肥厚 ,减少心肌细胞内钙含量 。

“一肾一夹”高血压大鼠动脉平滑肌细胞钠泵α亚单位的基因表达

目的 探讨“一肾一夹 (1k1c)”高血压大鼠动脉平滑肌细胞钠泵α亚单位各异构体基因表达的改变 ,为高血压发病机制的深入研究提供理论及实验依据。方法 分别应用分子生物学RT PCR及免疫组化技术 ,探讨 1k1c高血压大鼠动脉平滑肌细胞钠泵α1、α2及α3亚单位mRNA及蛋白水平基因表达的改变。结果 1k1c高血压大鼠动脉平滑肌细胞钠泵α亚单位基因表达发生改变 :无论在mRNA或蛋白水平 ,α1亚单位表达增强 ,而α2与α3亚单位表达无改变。结论 1k1c高血压大鼠动脉平滑肌细胞钠泵α亚单位基因表达发生改变 ,这种改变可能参与了该模型的血压升高机制。

“一肾一夹”高血压鼠血清及组织内哇巴因含量及其与血压相关性的研究

目的 :探讨内源性哇巴因 (EO)在“一肾一夹 (1k1c)”高血压模型血压升高中的作用及其分泌特点。方法 :采用酶联免疫吸附试验 (ELISA)测定“1k1c”高血压大鼠血清及多种组织内EO含量的改变 ,并对体内EO含量与大鼠血压进行相关性分析。结果 :“1k1c”高血压鼠血清及心脏、肾脏、肾上腺、垂体及下丘脑内EO含量均高于正常大鼠 ;尤以肾上腺及下丘脑内EO含量最高 ;其中血清、肾脏及下丘脑内EO含量与大鼠血压呈显著正相关。结论 :EO含量增加可能在“1k1c”模型高血压的发生机制中发挥着较为重要的作用 ;

葛根素对两肾一夹高血压大鼠左室肥厚的影响

目的探讨葛根素对两肾一夹高血压大鼠左室肥厚的影响。方法清洁级雄性SD大鼠30只,随机均分为正常组、模型组和葛根素组,后两组大鼠采用两肾一夹方法(2K1C)制成肾性高血压动物模型。测定各组平均颈动脉压(mCAP)、左室舒张末期压(LVEDP)以及左心室压力变化最大速率(LV±dp/dtmax),测定左心重与体重比值(LVM/BW)。电子显微镜观测心肌形态学的变化。结果①与正常组相比,模型组大鼠mCAP、LVEDP以及LVM/BW分别升高36.58%(P<0.05)、333.8%(P<0.01)和20.24%(P<0.01),而LV+dp/dtmax则降低85.35%(P<0.05)。两组大鼠LV-dp/dtmax差异无统计学意义。②与模型组相比,葛根素组大鼠LVEDP、LVM/BW以及LV-dp/dtmax分别降低65.24%(P<0.05)、13.12%(P<0.05)和96.28%(P<0.01),LV+dp/dtmax则升高179.18%(P<0.01)。两组大鼠mCAP差异无统计学意义。③电镜观察:模型组大鼠心室肌丝松散,部分溶解断裂,闰盘增宽;基膜下轻度水肿;细胞核固缩现象易见。正常组和葛根素组未见。结论葛根素可以逆转两肾一夹高血压大鼠左室肥厚。

米诺环素通过影响下丘脑室旁核小胶质细胞活化水平降低两肾一夹所致高血压的作用机制

目的:观察米诺环素对两肾一夹(2k1c)型高血压大鼠血浆炎性因子、神经递质浓度及血压的影响,并探讨其是否通过影响下丘脑室旁核(PVN)发挥调控作用。方法:将雄性无特定病原体(SPF)级SD大鼠28只随机分为假手术(SHAM)+人工脑脊液(aCSF)组、SHAM+minocycline组、2k1c+aCSF组、2k1c+minocycline组。通过肾动脉缩窄术制作模型并进行室旁核置管,利用无创血压测量仪监测大鼠血压;10周后进行肾脏交感神经放电(RSNA)检测;通过小胶质细胞染色统计激活小胶质细胞的数量及细胞突起的长度;采用高效液相色谱法(HPLC)检测下丘脑室旁核(PVN)中白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、去甲肾上腺素(NE)、谷氨酸(GLU)、γ-氨基丁酸(GABA)含量。实时定量聚合酶链式反应(PCR)检测gp^(91phox)mRNA在PVN中的表达。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血浆IL-1β、IL-6和NE浓度。结果:中枢缓慢输注米诺环素可减少激活小胶质细胞数量,增加细胞突起长度(P<0.05)。2k1c+aCSF组和2k1c+minocycline组大鼠PVN和血浆IL-1β、IL-6、NE水平及PVN中GLU含量高于SHAM+aCSF组和SHAM+minocycline组(P<0.05),米诺环素可逆转上述表达(P<0.05)。2k1c+aCSF组和2k1c+minocycline组大鼠PVN中GABA含量低于SHAM+aCSF组和SHAM+minocycline组(P<0.05),经米诺环素治疗可有效提高2k1c+minocycline组大鼠GABA表达量(P<0.05)。与SHAM+aCSF组和SHAM+minocycline组大鼠比较,2k1c+aCSF组和2k1c+minocycline组大鼠PVN中gp^(91phox)mRNA表达升高(P<0.05),米诺环素可降低PVN中gp^(91phox)mRNA表达(P<0.05)。2k1c+aCSF组和2k1c+minocycline组大鼠肾交感放电高于SHAM+aCSF组和SHAM+minocycline组(P<0.05),经米诺环素治疗后肾交感放电有效减弱(P<0.05)。结论:缓慢输注米诺环素通过影响下丘脑室旁核小胶质细胞活化水平从而降低2k1c所致的高血压。

肾性高血压模型大鼠左心室壁Ⅰ、Ⅲ型胶原网络重建

目的探讨肾性高血压大鼠左心室壁重构过程中Ⅰ、Ⅲ型胶原分布的变化规律。方法采用双侧肾动脉狭窄法制作动物模型,32只SD大鼠随机分为假手术组、术后2周组、术后5周组和术后7周组,利用无创动物血压分析测试仪评价高血压动物模型质量,免疫组织化学、Western blotting和图像分析方法检测各组左心室肌组织Ⅰ、Ⅲ型胶原的改变。结果与假手术组相比,Ⅰ、Ⅲ型胶原网络在术后2周均无明显变化,术后5周心肌细胞及肌束周围Ⅰ型胶原粗细纤维束呈断裂、聚集或部分缺如。心室壁小动脉管壁Ⅰ型胶原鞘不规整,纤维束断裂,胶原聚集或堆积,血管外膜粗纤维束向间质延伸;术后5周组肌细胞周围Ⅲ型胶原粗、细纤维束均出现严重松散或紊乱;血管壁Ⅲ型胶原鞘呈现松散现象。图像分析结果显示:术后5周组与术后7周组相比,Ⅰ型胶原平均吸光度和平均面积比均存在显著差异(P<0.05);Ⅲ型胶原平均吸光度各组间无显著差异(P>0.05),平均面积比术后2周组与术后5周组之间差异显著(P<0.05)。Western blotting检测结果表明,手术5周后Ⅰ型胶原蛋白表达量呈增高趋势,Ⅲ型胶原蛋白表达量呈降低趋势。结论高血压可导致左室壁Ⅰ、Ⅲ型胶原网络发生重建或破坏,血管外膜胶原结构严重受损。

两肾一夹高血压大鼠左心室Apelin及其受体的基因表达

目的:探讨小分子活性肽apelin及其受体APJ在两肾一夹高血压病理进程中的变化及意义。方法:清洁级雄性SD大鼠20只,随机均分为对照组和模型组。测定平均颈动脉压(mCAP)、左室舒张末期压(LVEDP)以及左心室压力变化最大速率(LV±dp/dtmax),测定左心重与体重比值(LVM/BW)。以RT-PCR方法检测左心室组织apelin、APJ基因表达的变化。结果:①模型组大鼠mCAP较对照组高36.58%(P<0.05),LVEDP较对照组高333.8%(P<0.01),LVM/BW较对照组高20.24%(P<0.01),LV+dp/dtmax较对照组低85.35%(P<0.05)。两组大鼠LV-dp/dtmax差异无统计学意义。②模型组左心室组织apelinm RNA、APJ mRNA表达水平,比对照组分别高77.66%和119.00%(P均<0.05)。结论:高血压大鼠左心室apelin-APJ基因表达的上调在肾性高血压左心室肥厚的发生、发展过程中可能扮演重要角色。