二藤合剂氯仿提取物对类风湿性关节炎T细胞的免疫调节作用

[目的]观察二藤合剂氯仿提取物对活化的类风湿性关节炎(RA)患者T细胞表达CD69以及Jurkat细胞周期的影响, 推测其可能的细胞免疫调控机制。[方法]培养Jurkat细胞,加入二藤合剂各提取物培养72 h,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测增殖率,筛选有效部位;无菌抽取RA患者全血,与不同浓度二藤合剂氯仿提取物或染料木黄酮预孵30 min后,再加植物血凝素(PHA)培养24 h,采用流式细胞术检测T淋巴细胞CD69的表达率;培养Jurkat细胞,加不同浓度的二藤合剂氯仿提取物或氨甲喋呤(MTX)继续培养48 h,流式细胞术检测细胞周期。[结果]二藤合剂各提取物中以氯仿提取物抑制Jurkat细胞增殖作用最强;10mg/L和20mg/L的二藤合剂氯仿提取物可显著抑制PHA刺激下RA患者的T细胞,尤其是CD4 T细胞表达CD69;10mg/L浓度的氯仿提取物主要将细胞增殖周期抑制在G1期,与MTX作用于S期有明显区别。[结论] 二藤合剂氯仿提取物可抑制RA患者T细胞尤其是CD4 T细胞的早期活化,阻止T细胞能量和原料合成,从而阻断其DNA 合成过程,减少细胞向G2期的转化,为其用于RA的治疗提供了实验依据。