双歧杆菌脂磷壁酸体外诱导胃癌细胞凋亡的研究

目的探讨双歧杆菌表面分子脂磷壁酸(LTA)的抗肿瘤作用及其机制。方法应用M TT法、透射电镜及流式细胞术等方法观察双歧杆菌LTA对胃癌细胞BGC 823的增殖抑制作用及其对细胞形态和细胞周期的影响,并用免疫细胞化学染色法检测LTA处理前后细胞凋亡相关蛋白表达的变化。结果双歧杆菌LTA对体外培养的BGC 823细胞具有明显的生长抑制作用,且具有剂量和时间依赖性。经LTA处理的BGC 823细胞超微结构改变,出现凋亡小体,同时细胞周期发生变化,细胞被阻滞于G0/G1期。免疫细胞化学染色结果显示,LTA能下调B cl-2蛋白和c-m yc蛋白的表达,同时上调p53蛋白和c-fos蛋白的表达。结论双歧杆菌LTA能抑制胃癌细胞BGC 823的增长,其机制可能是通过调节凋亡相关蛋白的表达变化,将细胞阻滞在G0/G1期并诱导细胞凋亡。

双歧杆菌纯化黏附素对ETEC和EPEC黏附肠上皮细胞的竞争抑制作用

目的 观察双歧杆菌分泌型黏附素对产毒性大肠杆菌 (ETEC)和致病性大肠杆菌 (ETEC)黏附肠上皮Lovo细胞的竞争抑制作用。方法 采用黏附试验计数肠上皮Lovo细胞黏附的细菌数并比较其结果。结果 除黏附素浓度为 1μg/ml和 5 μg/ml时不能明显抑制ETEC和EPEC对Lovo细胞的黏附外 ,10 μg/ml、2 0 μg/ml、30 μg/ml浓度组均能明显抑制ETEC和EPEC对Lovo细胞的黏附 ,且随浓度的逐渐增加 ,这种抑制作用也逐渐增强。

调节肠道菌群和预防肠道菌群失调动物模型探讨

目的建立调节肠道菌群动物模型和预防肠道菌群失调动物模型。方法⑴调节肠道菌群动物模型小鼠灌服抗生素溶液,小鼠肠道菌群失调后,随机选取1组以生理盐水灌胃,作为自然恢复组,其余3组分别灌服微生态调节剂(主要成份为双歧杆菌,蜡样芽胞杆菌),20%低聚果糖及中药(含党参、白术、茯苓、甘草等),给受试物后无菌采取粪便,观察各组双歧杆菌,乳杆菌,肠杆菌及肠球菌数量。⑵预防肠道菌群失调动物模型小鼠灌服抗生素溶液同时分别加生理盐水,微生态调节剂,20%低聚果糖及中药(同前),给受试物后无菌采取粪便,观察各组双歧杆菌,乳杆菌,肠杆菌及肠球菌数量。结果⑴调节肠道菌群动物模型菌群失调后,给予微生态调节剂,果糖及中药后,小鼠肠道内的双歧杆菌,乳杆菌及肠杆菌在小鼠肠道内的数量与自然恢复组相比较明显增加;⑵预防肠道菌群失调动物模型给予微生态调节剂,果糖及中药后,与正常对照组相比较小鼠肠道内的双歧杆菌,乳杆菌及肠杆菌的数量明显增加。结论微生态调节剂,果糖及中药可产生调节小鼠肠道菌群,增殖双歧杆菌和乳杆菌的作用。

非器质性厌食症儿童肠道菌群的定量调查与分析

目的探讨儿童厌食症与肠道正常菌群的关系。方法采集非器质性厌食症儿童与正常儿童粪便,每例作需氧或厌氧培养、计数与鉴定。结果非器质性厌食症儿童肠道中的双歧杆菌、乳酸菌、肠杆菌数量与正常儿童有显著性差异(P<0.05)。结论儿童厌食症与肠道菌群失调有密切关系。

双歧杆菌脂磷壁酸对衰老小鼠肝脏与骨髓的影响

目的: 通过研究双歧杆菌表面分子脂磷壁酸(LTA)对衰老小鼠肝脏形态、p16蛋白、c Fos蛋白表达及骨髓细胞微核率的影响,探讨双歧杆菌抗衰老的分子机制.方法:雄性昆明系小鼠,随机分组,在建立D 半乳糖诱导衰老小鼠模型的同时,每日ip双歧杆菌LTA. 40d后,采用免疫组化SABC法、Gimesa染色和其他它方法检测小鼠体质量、肝脏指数、形态、p16蛋白、c Fos蛋白及骨髓红细胞微核率的变化.结果: 与青年对照组小鼠相比,衰老模型组小鼠体质量、肝脏c Fos蛋白表达明显降低(P<0 05),p16蛋白表达及骨髓红细胞微核率显著增高(P<0 05);给予双歧杆菌LTA,衰老模型小鼠体质量与肝脏c Fos蛋白水平明显增高(P<0 05),而p16蛋白水平及骨髓红细胞微核率显著降低(P<0 05),并且肝脏组织形态结构也得到了明显改善.结论: LTA可延缓肝脏与骨髓衰老,抑制染色体畸变,上调c fos,下调p16表达.

青春双歧杆菌双元蛋白酸奶对肠道的保护作用

目的：探讨青春双歧杆菌双元蛋白酸奶对小鼠和人群志愿者肠道正常菌群以及实验性便秘小鼠排便功能的影响。 方法：实验于2004-06／2005-01在齐齐哈尔医学院药物研究所完成。选择昆明小鼠80只，雌雄各半。另选择志愿者20名，男女各半，均自愿参加观察。①青春双歧杆菌双元蛋白酸奶对小鼠肠道菌群的影响：将20只小鼠随机分成两组，正常对照组和样品组各10只。采用自身对照，样品组小鼠采用青春双歧杆菌双元蛋白酸奶25mL／kg连续灌胃21d，正常对照组用等量市售酸奶灌胃连续21d。在给受试物之前及最后1次给受试物后24h，无菌采取粪便，培养后以菌落形态、革兰氏染色等鉴定计数每克湿便菌落数，以检查正常菌群肠杆菌、肠球菌、双歧杆菌和乳杆菌的数量。②青春双歧杆菌双元蛋白酸奶对人肠道菌群的影响：将健康志愿者20名随机分成2组，正常对照组和样品组各10名。标准数据对照，样品组服青春双歧杆菌双元蛋白酸奶300mL／d，正常对照组服市售酸奶300mL／d，均连续饮用15d。最后给受试物之后24h无菌采取粪便，培养后观察菌落形态、革兰氏染色等鉴定计数每克湿便菌落数。③青春双歧杆菌双元蛋白酸奶对小鼠肠推进运动的影响：取昆明小鼠30只，随机分成3组，样品组、模型组、正常组各10只。样品组灌胃青春双歧杆菌双元蛋白酸奶25mL／kg／d，模型组、正常对照组灌胃等容量市售酸奶，连续15d。第15天禁食12h，样品组、模型组灌胃地芬诺酯50mg／kg，正常组除外。10min后各组用墨汁溶液灌胃，麻醉脱颈致死后取小肠，测量墨汁推进长度及小肠全长，计算墨汁推进移动率(墨汁推进率=墨汁推进长度／小肠总长度×100％)。④青春双歧杆菌双元蛋白酸奶对抗药物性便秘实验：取昆明小鼠30只，随机分成3组，样品组、模型组、正常组各10只。样品组按25mL／kg／d灌胃青春双歧杆菌双元蛋白酸奶，连续15d；模型组、正常组灌等容量市售酸奶15d，实验前模型组和样品组分别灌胃地芬诺酯50mg／kg，正常组除外，30min后各组灌胃含受试物的墨汁，各小鼠均放入单笼，记录各小鼠排首粒黑便时间和8h内排便总量。 结果：参与者及实验动物全部进入结果分析，无脱落数据。①小鼠和受试人群粪便中肠杆菌、肠球菌、乳杆菌和双歧杆菌的数量：青春双歧杆菌双元蛋白酸奶导致小鼠及受试人群肠道内双歧杆菌、乳杆菌的数量显著高于对照组，而肠杆菌、肠球菌数量显著高于正常对照组(t=6．742～32．570，P<0．01)。②地芬诺酯致小鼠便秘后首次排黑便时间、排便总量和墨汁推进移动率：实验性便秘小鼠首次排便时间缩短，排便量增加，墨汁推进率加快(F=7．196～111．642，P<0．01)。 结论：青春双歧杆菌双元蛋白酸奶可以通过增加有益菌双歧杆菌、乳杆菌的数量，降低肠杆菌、肠球菌数量而提高肠道的抗病能力，同时可以促进肠蠕动，防止便秘，具有明显改善肠道功能和润肠通便作用。

乳酸杆菌和双歧杆菌粗制代谢产物对小鼠溃疡性结肠炎的影响

【目的】了解乳酸杆菌和双歧杆菌粗制代谢产物对小鼠溃疡性结肠炎(UC)的防治作用。【方法】采用右旋葡聚糖硫酸钠(DSS)建立小鼠UC模型,分别予乳酸杆菌粗制代谢产物和双歧杆菌粗制代谢产物灌肠,生理盐水(NS)和柳氮磺胺吡啶(SASP)灌肠对照,并设立空白对照组和DSS模型组对照,计算小鼠死亡率、疾病活动指数(DAI)、组织学损伤评分和组织学病理改变以及结肠黏膜IL-10免疫组化情况。【结果】①乳杆组和双歧组小鼠结肠黏膜组织病理学改变轻微,其死亡率、DAI评分、组织学损伤评分均低,与DSS模型组和NS组对照差异均有统计学意义(P<0.05)。②乳杆组和双歧组IL-10免疫组化表达均较高,与空白对照组、DSS模型组和NS组对照差异均有统计学意义(P<0.05)。【结论】①乳酸杆菌和双歧杆菌粗制代谢产物均对小鼠溃疡性结肠炎起主要的防治作用。②乳酸杆菌和双歧杆菌粗制代谢产物的某些成分通过促进IL-10表达而发挥防治作用的。

双歧杆菌在短肽肠内营养液中的存活力

目的:研究双岐杆菌在短肽肠内营养液中的存活力.方法:将50g/L两歧双歧杆菌菌悬液加入120g/L短肽营养液中,37℃厌氧培养箱中培养,分别在0,4,8,12,14,16,20,24h时间点取样进行活菌数、A550、酸度和pH测定.结果:在短肽肠内营养液中接种两歧双歧杆菌后,活菌数在培养0～16h生长速度较快,16h达最高峰,以后下降.A550随着时间的延长而增加.酸度也随着培养时间的延长而增加,在培养0～14h之间增加较快,14h以后增加缓慢.pH值随培养时间的延长而下降,在培养0～12h之间下降较快,12h以后下降缓慢.结论:双歧杆菌能在120g/L的短肽肠内营养液中较好地存活,且在12～14h期间应停止发酵.

双歧杆菌对大鼠腹腔巨噬细胞NF-κB和IκB的影响

目的:探讨双歧杆菌对大鼠腹腔巨噬细胞核转录因子NF-κB和IκB调控。方法:收集大鼠腹腔巨噬细胞,实验分为正常对照组、双歧杆菌刺激组,以不同浓度的双歧杆菌106、1071、08和109cells/L刺激细胞60 min,或以108cells/L的浓度刺激细胞不同时间(15、30、601、20和180 min),分别收集细胞以提取总蛋白及核蛋白。用凝胶电泳迁移分析法(EMSA)测定NF-κB的结合活性;用Western印迹分析巨噬细胞胞浆内相应的IκBα蛋白表达。结果:双歧杆菌处理后,巨噬细胞NF-κB向核内转移,结合活性明显增加,相应的IκBα表达降低。结论:双歧杆菌可以通过激活腹腔巨噬细胞核转录因子NF-κB来发挥调作控用。

双歧杆菌对放射损伤的防护作用

双歧杆菌是机体肠道中最具优势和开发价值的天然益生菌。现从双歧杆菌清除自由基、抗膜脂质氧化、免疫赋活、诱导细胞凋亡和肠道调理等方面来阐述它对辐射的防护作用,以利于双歧杆菌抗辐射机制探讨以及开发无毒、高效的基因工程防辐剂。

双歧杆菌对轮状病毒感染肠上皮细胞IL-8和TNF-α分泌的影响

目的:探讨双歧杆菌对轮状病毒(RV)体外感染肠上皮细胞株HT29过程中IL-8,TNF-α分泌水平的影响.方法:按照不同的干扰措施将细胞分为正常细胞对照、RV感染、低剂量双歧杆菌干预、高剂量双歧杆菌干预4组.光镜下观察细胞病变,ELISA检测感染后6,24h细胞培养上清中IL-8,TNF-α的表达水平.结果:HT29细胞感染RV后6h,细胞培养上清中IL-8分泌较正常细胞对照增加(P<0.01),而TNF-α分泌量无显著变化(P>0.05);感染后24h,两者分泌量皆显著增高(P<0.05),细胞发生显著病变,高、低剂量双歧杆菌干预细胞均较RV感染细胞病变程度轻.干预细胞与RV感染细胞比较,6h时IL-8,TNF-α分泌量都未出现明显变化(P>0.05),24h时,高、低剂量干预细胞的IL-8,TNF-α分泌水平皆较RV感染细胞明显降低(P<0.05),两种剂量组间无显著差别(P>0.05).结论:RV感染诱导肠上皮细胞株HT29大量分泌致炎性细胞因子IL-8,TNF-α,双歧杆菌能够显著抑制该刺激分泌作用,减轻细胞病变程度,提示这种抑制作用可能参与双歧杆菌抗RV感染的机制.

双歧杆菌及酪酸梭菌联合治疗婴儿继发性乳糖不耐受72例

继发性乳糖不耐受是婴幼儿迁延性腹泻常见原因之一。常规治疗须停母乳用牛乳喂养，改用低乳糖饮食。这对母乳喂养婴儿的家庭造成不便。我科于2002年6月～2005年10月应用由双歧杆菌及酪酸梭菌组成的活菌制剂常乐康（山东科兴生物制品有限公司生产）治疗婴儿继发性乳糖不耐受72例，取得满意疗效。报告如下。

双歧杆菌对实验性大鼠结肠炎中热休克蛋白70的影响

目的观察实验性结肠炎热休克蛋白(HSP70)、白介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达变化并研究双歧杆菌对其表达的影响。方法 40只SD大鼠随机均分为正常组、模型组、5-ASA组及双歧杆菌组。2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇制备大鼠结肠炎模型。5-ASA组给予奥沙拉秦钠胶囊100 mg/(kg·d),双歧杆菌组给予双歧杆菌0.1 ml/d(108cfu/ml),正常组与模型组给予生理盐水2ml/d;连续灌胃14 d。每天观察各组大鼠结肠炎疾病活动指数(DAI),评价结肠大体形态损伤指数(CMDI)和组织学损伤指数(TDI),免疫组化法检测结肠组织HSP70的表达,ELISA法检测血清HSP70、IL-10和TNF-α含量。结果与正常组相比,模型组DAI、CMDI、TDI、血清TNF-α显著升高(P<0.01),IL-10水平下降,血清及结肠组织HSP70表达减少(P<0.01)。5-ASA组和双歧杆菌组DAI、CMDI和TDI、血清TNF-α明显低于模型组(P<0.01);血清IL-10、HSP70及结肠组织HSP70明显高于模型组(P<0.01)。5-ASA组和双歧杆菌组之间差异无统计学意义。结论 HSP70表达减少参与了实验性结肠炎的发病;双歧杆菌可能通过提高保护性蛋白水平,调节促炎因子与抗炎因子之间平衡对实验性结肠炎发挥治疗作用。

双歧杆菌脂磷壁酸对B16荷瘤小鼠Fas/FasL表达的影响

目的探讨双歧杆菌脂磷壁酸(lipoteichoi cacid of bifidobacterium,BLTA)对黑色素瘤B16小鼠Fas/FasL表达的影响。方法将黑色素瘤B16细胞接种于C57BL/6小鼠(n=40)皮下,待触及肿块后于荷瘤小鼠瘤周注射不同剂量的BLTA。实验动物分为4组,每组10只:生理盐水(对照)组、低浓度BLTA(50mg/LBLTA)组、中浓度BLTA(100mg/LBLTA)组、高浓度BLTA(150mg/LBLTA)组。采用MTT法检测荷瘤小鼠CTL杀伤活性;免疫组织化学染色检测肿瘤组织浸润的CD4+、CD8+淋巴细胞的表达情况;用RT-PCR检测肿瘤组织和脾脏组织Fas、FasL mRNA的表达变化;免疫组织化学染色和Western blot检测肿瘤组织和脾脏淋巴细胞Fas、FasL蛋白的表达变化。结果与对照组比较,BLTA处理各组荷瘤小鼠的CTL杀伤率明显增加(P<0.05),肿瘤组织内Fas、FasL mRNA和蛋白表达明显增加(P<0.05),而荷瘤小鼠脾脏组织的Fas、FasLmRNA和蛋白表达明显下调(P<0.05),肿瘤组织内CD8+淋巴细胞的浸润增多(P<0.05),并具有剂量依赖性。CD4+淋巴细胞的浸润无明显增加(P>0.05)。结论 BLTA能够通过调节Fas/FasL系统,增强CTL细胞的杀伤活性,促进肿瘤细胞的凋亡,逆转荷瘤小鼠的肿瘤免疫逃逸现象,进而提高机体的抗肿瘤作用。

双歧三联活菌联合美沙拉嗪治疗老年溃疡性结肠炎的临床疗效及作用机制探讨

【目的】探讨双歧三联活菌联合美沙拉嗪治疗老年溃疡性结肠炎（UC ）的临床疗效及作用机制。【方法】收集2012年5月至2013年5月在本院接受治疗的老年U C患者85例，随机分为观察组43例及对照组42例。对照组患者均给予美沙拉嗪颗粒口服，每次1．0g，4次／天；观察组在对照组基础上加用双歧三联活菌胶囊口服，每次420 mg ，3次／天。两组疗程均为12周。比较两组患者治疗前后腹泻、腹痛、粘液血便以及结肠镜检查的改善情况；同时比较血清丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、C反应蛋白（CRP）及血沉（ES R ）水平的变化。治疗期间详细记录两组患者出现的不良反应。【结果】治疗12周后，观察组腹泻、腹痛、粘液血便以及结肠镜下溃疡、糜烂及出血的改善率均显著高于对照组（ P ＜0．05或＜0．01）；观察组血清MDA、SOD、CRP及ESR改善幅度均显著大于对照组（均 P＜0．01）。两组不良反应发生率无显著差异（ P＞0．05），且均未发现严重不良反应。【结论】与单用美沙拉嗪相比，联合应用双歧三联活菌可显著地抑制炎症反应，提高体内SOD活力，降低MDA水平，从而增强氧自由基的清除能力，减轻肠黏膜细胞的氧化损伤，更快、更有效地改善临床症状，提高预后，且不增加不良反应发生率，是老年UC患者理想的治疗方案。

双歧杆菌对儿童的免疫调节作用及其机制

双歧杆菌是人肠道正常菌群中占优势的益生菌,被宿主摄入后可激活宿主的免疫系统,对特异性和非特异性的免疫应答均有调节作用。通过免疫排斥,免疫清除和免疫调节发挥抗感染和抗肿瘤作用,维持机体在健康状态时免疫功能的正常水平,促进免疫在疾病状态时的增强。尤其在儿童其免疫调节作用更显示出它的重要性。该文就双歧杆菌对儿童机体免疫反应的作用及其机制的研究进展作一综述。

双歧杆菌四联活菌加美沙拉秦缓释颗粒治疗溃疡性结肠炎疗效分析

目的:观察双歧杆菌四联活菌联用美沙拉秦缓释颗粒治疗溃疡性结肠炎的疗效。方法:对确诊溃疡性结肠炎68例患者,采用美沙拉秦缓释颗粒1 g,4次/d口服,双歧杆菌四联活菌片,3次/d,每次3片,8周1个疗程。结果:治疗8周后,治愈46例(67.6%),有效14例(20.6%),无效8例(11.76%),总有效率达88.20%。结论:双歧杆菌四联活菌联用美沙拉秦缓释颗粒治疗溃疡性结肠炎疗效确切。

双歧杆菌的选择计数培养基

双歧杆菌因其重要的生理功能已广泛应用于食品与保健品生产,成为微生态及食品学界研究的热点。迄今为止,对双歧杆菌的研究尤其是分子生物学方面的进展异常缓慢,主要原因之一是其自身很难分离和培养,这就要求有一个能选择性促进双歧杆菌生长的培养基。现就近几年的研究进展作一综述。

双歧杆菌治疗抗生素相关性腹泻43例临床分析

目的观察双歧杆菌治疗抗生素相关性腹泻（AAD）的疗效。方法选择2005—2009年AAD患者43例,随机分为治疗组28例和对照组15例。治疗组在不停用抗生素的情况下,加用双歧杆菌活菌胶囊2粒（每粒含双歧杆菌0.5亿个）,每天3次口服,服用7~10 d。对照组停用抗生素,并加用口服甲硝唑500 mg,每天3次,连续7~10 d。记录相关不良反应。结果治疗组28例患者,其中痊愈15例,显效8例,痊愈率为53.6%,有效率为82.1%;对照组患者15例,痊愈6例,显效3例,痊愈率为40.0%,有效率为60.0%。两组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论双歧杆菌活菌胶囊是防治AAD安全有效的药物,其疗效和安全性较好。