灵芝多糖对小鼠T细胞三磷酸肌醇和二酰基甘油体外作用的研究

目的 研究灵芝多糖 (GLB7)对小鼠T细胞三磷酸肌醇 (IP3 )和二酰基甘油 (DAG)的作用 ,确定其对T细胞信号转导途径。方法 采用细胞培养、放射免疫分析、离子交换层析和薄层色谱法测定小鼠脾脏T细胞中IP3 和DAG的变化。结果 GLB7引起小鼠T细胞中IP3和DAG浓度升高。IP3 的达峰时间为 30s ,百日咳毒素 (PTX)对此现象有抑制作用 ;DAG的合成出现两个峰 ,第一个峰迅速短暂 ,峰值位于 30s,第二个峰是持续时间较长的迟发峰。GLB7对活化的T细胞中IP3 和DAG未产生明显影响。结论 IP3 /Ca2 +

电针“水沟”对脑梗死大鼠脑动脉血管细胞内三磷酸肌醇及二酰基甘油含量的影响

目的:探讨电针"水沟"穴对梗死脑动脉血管细胞内信息转导通路的影响。方法:Wistar大鼠56只,随机分为模型组24只、针刺组24只和空白对照组8只,前两组又分为大脑中动脉阻滞后1、3、6h3个时相组,每组8只。采用Longa腔内线栓法阻滞大鼠右侧大脑中动脉,复制脑梗死模型。电针"水沟"穴(15Hz,0.1mA),持续20min。镜下剥离脑表面动脉血管组织,应用蛋白质竞争结合分析法测定胞内三磷酸肌醇(IP3)含量;采用薄层定量分析法测定胞内二酰基甘油(DAG)含量。结果:①模型1、3、6h3个时相组胞内IP3及DAG含量均明显高于空白对照组(P<0.01),针刺1、3、6h3个时相组胞内IP3及DAG含量均明显低于相应模型组(P<0.01)。结论:电针"水沟"穴调节脑梗死大鼠脑血管舒缩运动从而促进侧支循环的效应可能与细胞内IP3及DAG等信使物质有关。

二酰基甘油酰基转移酶(DGAT)研究进展

二酰基甘油酰基转移酶(DGAT)是生物体内TAG合成过程中的关键酶,它的作用是催化二酰甘油加上脂肪酸酰基形成三酰甘油。本文介绍了DGAT的分类、亚细胞定位、功能、底物特异性和调控,并展望了DGAT研究在油料作物品种改良方面的应用前景。

灵芝多糖对小鼠巨噬细胞内三磷酸肌醇和二酰基甘油的作用研究

为研究灵芝多糖（ＧＬＢ７） 对小鼠腹腔巨噬细胞（ ＭΦ） 三磷酸肌醇（ＩＰ３） 和二酰基甘油（ＤＡＧ） 的作用，确定其对ＭΦ信号转导途径，采用细胞培养、放射免疫分析及离子交换层析和薄层层析法测定了小鼠腹腔ＭΦ中ＩＰ３ 和ＤＡＧ 的变化。结果显示ＧＬＢ７ 能引起小鼠ＭΦ中ＩＰ３ 和ＤＡＧ 浓度升高。ＩＰ３ 的达峰时间为３０ｓ，百日咳毒素（ＰＴＸ） 对此现象有抑制作用；ＤＡＧ 的合成出现两个峰，第一个峰迅速短暂，峰值位于３０ｓ，第二个峰是持续近２ｍｉｎ 的迟发峰。表明ＩＰ３／Ｃａ２ ＋ 和ＤＡＧ／ＰＫＣ

花生二酰基甘油酰基转移酶基因克隆与功能研究

利用RT-PCR方法,从花生品种‘鲁花14’未成熟种子中克隆了二酰基甘油酰基转移酶(Diacylglycerolacyltransferase,DGAT)基因AhDGAT3A和AhDGAT3B的cDNA,序列分析显示,两者在编码区核苷酸序列有96%相似性,氨基酸序列有94%相似,并对其中的AhDGAT3A进一步研究。(1)半定量RT-PCR分析显示,AhDGAT3A在花生根、茎、叶、花和种子中均有表达,且花中表达量最高,茎中表达量非常低;在花生果针入土60d时种子中的表达量较其它发育时期有所提高。(2)利用染色体步移技术克隆了AhDGAT3A5′上游1 588bp调控区,在线软件分析发现该调控区除包括启动子核心元件外,还包含多个调控花粉中表达的顺式元件、光信号调控元件和胁迫相关元件等。(3)在烟草中过量表达AhDGAT3A基因,转基因烟草种子粗脂肪和主要脂肪酸含量较对照均有所下降,推测这一结果可能由转基因共抑制作用导致。

荷斯坦牛二酰基甘油酰基转移酶1基因外显子8的单核苷酸多态性位点对蛋白质结构和功能的影响及其进化分析

为了检测荷斯坦牛二酰基甘油酰基转移酶1(diacylglycerol acyltransferase 1,DGAT1)基因外显子8的单核苷酸多态性(SNPs)位点,预测分析碱基突变对蛋白质结构和功能的影响,并讨论不同物种间DGAT1的进化关系。本研究利用PCR-SSCP综合测序方法检测DGAT1基因外显子8的SNPs位点,用生物信息学方法分析DGAT1蛋白的基本性质和结构功能,并分析不同物种间DGAT1氨基酸同源性及构建其进化树。PCR-SSCP分析结果显示,DGAT1基因外显子8存在1个双突变位点,即M694和M695;蛋白质结构和功能预测结果显示,该双突变不影响蛋白质的理化性质和结构,但能引起蛋白质功能域组成发生改变;进化分析结果显示,荷斯坦牛DGAT1氨基酸序列与绵羊同源性最高(99.1%),与黑猩猩同源性最低(65.3%)。

二酰基甘油调控细胞功能的机制

二酰基甘油（ＤＧ）是一些磷脂水解产生的一种有重要功能的第二信使，它主要通过激活细胞内的蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）进而磷酸化一系列底物蛋白，产生相应的细胞效应．在细胞整体水平，ＤＧ还是一种重要的脂类物质的代谢中介产物，通过若干代谢途径参与脂类和激素代谢循环，目前，有关ＤＧ调控细胞生理功能的研究，主要集中在细胞信号转导方面．

氧化LDL和抗氧化剂对大鼠主动脉平滑肌细胞产生二酰基甘油的影响

目的研究ＯＸ－ＬＤＬ及抗氧化剂对平滑肌细胞信号转导的影响。方法采用薄层层析、放射自显影及放射酶标法分离、检测细胞中ＤＡＧ含量。结果ＯＸ－ＬＤＬ刺激平滑肌细胞产生ＤＡＧ具有双时相性变化，并且随浓度增加而增加。抗氧化剂ＶｉｔＥ明显抑制平滑肌细胞产生ＤＡＧ。结论ＯＸ－ＬＤＬ能明显刺激ＤＡＧ的生成，抗氧化剂ＶｉｔＥ显著抑制平滑肌细胞ＤＡＧ的形成，并且具有浓度依赖效应。

昆明山海棠对中国仓鼠V_(79)细胞二酰基甘油含量的影响

本研究以昆明山海棠根部水抽提物(Tripterygium Hypoglaucum(Level)Hutch,THH)处理中国仓鼠V_(79)细胞,通过检测V_(79)细胞C-M细胞频率以及二酰基甘油(1,2-dia-cylgcerol,DAG)的含量测定,分析了THH诱发非整倍体与细胞醇磷酯信号通路的关系。结果 指出:THH能在1mg/ml、2mg/ml两个剂量上使V_(79)细胞的DAG含量显著升高(P<0.001),并明显的提高C-M细胞频率(P<0.05),提示肌醇酯信号通路是介导THH诱发非整倍体的途径之一。

光合膜膜脂双半乳糖二酰基甘油的研究进展

本文综述了光合膜膜脂双半乳糖二酰基甘油 (DGDG)的生物合成和生理功能的研究进展。DGDG是光合膜中惟一的双半乳糖脂类 ,在光合膜的不同膜区均有分布。在高等植物叶绿体中 ,存在着两条不同的DGDG生物合成途径 ,即原核合成途径和真核合成途径。原核途径只限于在质体内进行 ,而真核途径还包括一些在内质网内发生的反应。DGDG在维持光系统II捕光色素蛋白复合体的寡聚体结构。

紫苏二酰基甘油酰基转移酶2基因克隆与功能研究

二酰基甘油酰基转移酶(diacylglycerol acyltransferase,DGAT)是植物合成三酰甘油(TAG)最后一步的关键酶,其中DGAT2在某些植物的种子油中能选择性积累更多不饱和脂肪酸。本文成功克隆了紫苏二酰基甘油酰基转移酶2基因(PfDGAT2),并进行生物信息学分析。PfDGAT2实时荧光定量结果表明,不同器官中PfDGAT2基因均有表达,10 d种子的表达量最高,在根中的表达量次之,在种子发育中后期,PfDGAT2表达量逐渐降低。与野生型拟南芥相比,过表达PfDGAT2拟南芥种子含油率提高了21.68%~77.89%,其中种子含油率增加最多的4个株系,其亚麻酸(C18:3)增加4.57%,花生一烯酸(C20:1)增加7.44%,花生二烯酸(C20:2)增加5.4%,二十二一烯酸(C22:1)增加10.37%,而棕榈酸(C16:0)、硬脂酸(C18:0)和亚油酸(C18:2)含量分别降低了3.47%、6.64%和4.83%,油酸(C18:1)和花生酸(C20:0)分别只降低了0.18%和1.91%。本研究结果表明,紫苏PfDGAT2基因不仅能提高种子含油率,还能促进亚麻酸、花生一烯酸等不饱和脂肪酸的积累,这为研究植物不饱和脂肪酸的合成积累提供了参考及理论依据。

刺五加有效成分及体外抑制二酰基甘油酰基转移酶活性研究

本文为研究刺五加(Acanthopanax senticosus Harms)的化学成分及其抑制二酰基甘油酰基转移酶(DGAT)活性。刺五加用75%乙醇提取,经硅胶、ODS、半制备HPLC进行分离纯化,结合理化性质、波谱数据鉴定化合物的结构。得到12个化合物分别鉴定为赤式-愈创木基丙三醇-β-O-4′-二羟基松柏醇(1)、(E)-3-(2,2-dimethyl-2H-chromen-6-yl)prop-2-enal(2)、7′E-4,9-dihydroxy-3,3′,5′-trimethoxy-8,4′-oxyneolign-7′-en-9′-al(3)、5-甲氧基去氧双松柏醇(4)、去氧双松柏醇(5)、5,5′-二甲氧基落叶松脂素(6)、5,5′-二甲氧基开环异落叶松树脂酚(7)、(7′S,8′S)-4′-O-甲基黄花菜木脂素(8)、(+)-9′-O-(Z)-阿魏酰-5,5′-二甲氧基落叶松脂素(9)、(+)-9′-O-(E)阿魏酰-5,5′-二甲氧基落叶松脂素(10)、大豆苷(11)和3′-甲氧基大豆苷(12)。其中化合物1~3和8~10为首次从该植物中分离得到。化合物1、3~7、9和10对DGAT1活性具有抑制作用,其IC50值范围在81.5±1.2到123.2±1.1μM之间。

二酰基甘油酰基转移酶和胰岛素抵抗

二酰基甘油酰基转移酶(DGAT)是甘油三酯合成的关键酶。DGAT过度表达导致甘油三酯堆积,从而损害胰岛素的分泌和作用,而DGAT1缺乏小鼠的胰岛素敏感性增高,这可能与DGAT1缺乏可降低甘油三酯水平、脂肪细胞体积及数量,并可提高瘦素活性相关。

微藻中二酰基甘油酰基转移酶基因(DGAT)结构及进化分析

从数据库中获取微藻及高等植物中的二酰基甘油酰基转移酶基因(DGAT),对4种酶通过基因和蛋白质结构的比较及系统发育树的构建进行多样性和进化程度分析。为了进一步分析微藻中DGAT的进化过程,对其进行正选择位点的检验,推测其在进化过程中受到的选择压力。结果显示:微藻中不同类型DGAT的基因结构及蛋白质结构差异较大,微藻与其他高等植物相比,同一种类型的DGAT的蛋白质结构和基因结构也有较大差别。同时发现微藻中DGAT同其他高等植物中的DGAT有不同的进化过程。选择压力分析结果显示,微藻及高等植物的DGAT2和WS/DGAT存在可信度较高的正选择位点,DGAT1和DGAT3未发现正选择位点。对微藻中DGAT的进化研究有助于破译其在油脂积累中的作用,推动可再生能源的研究。

二酰基甘油酯降胆固醇效果获确认，花王开发“保健生态烹调油”

在第l2届日本临床营养学会上公布了两个有关二酰基甘油酯的临床试验结果：(1)植物性固醇中的二酰基甘油酯有改善血液中的脂质含量的效果。(2)经六个月随意使用此类食油后，降胆固醇效果得到确认。为此，花王公司开发生产了添加了二酰基甘油酯植物固醇的食用油脂新产品。

在季铵盐存在下1,3-二酰基甘油酯和1-烷基-3-酰基甘油酯的制备

二酰基甘油酯(甘油二酯)是一种重要的食品乳化剂,常用于食品加工,如冰淇淋和花生酱的制作以及其它许多方面。根据新报道,这类物质还是些酶的有效活化剂,并正引起生物学家的关注。甘油二酯可分为两类:即1,2和1,3异构体。虽然选择性制备1,2或1,3-甘油二酯的方法已有几种。

不同含油量花生品种中二酰甘油酰基转移酶基因的表达分析

二酰甘油酰基转移酶(DGAT)在植物油脂合成过程中发挥重要作用。本研究利用实时荧光定量PCR检测方法,以低油低油酸品种花育17号、高油高油酸品种花育910和高油低油酸品种花育918为试材,分析了不同含油量花生品种不同发育时期种子中AhDGAT1-1、AhDGAT1-2和AhDGAT3-3基因的表达情况。结果表明:AhDGAT1-1基因表达峰值出现在低油低油酸品种和高油高油酸品种的荚果发育初期(下针后30天),而在高油低油酸品种中则出现在荚果发育中期(下针后40天);AhDGAT1-2基因的表达峰值出现在低油低油酸品种的荚果发育初期、高油高油酸品种和高油低油酸品种的籽仁油脂积累快速期;AhDGAT3-3基因在3个花生品种中的表达峰值均出现在荚果发育的中后期。推测AhDGAT1-1、AhDGAT1-2和AhDGAT3-3基因表达量的增加有利于花生油脂的合成与积累,但其起作用的时期存在种质差异。本研究结果可为花生高油、高油酸品种的选育提供理论依据。

化浊行血汤对高脂血症大鼠脂代谢及肝组织二脂酰甘油酰基转移酶2 mRNA表达的影响

目的:分析化浊行血汤对高脂血症模型大鼠脂代谢及肝组织二脂酰甘油酰基转移酶2(Diacylglycerol Acyltransferase 2,DGAT2)mRNA表达的影响。方法:选取SD大鼠70只,分为空白组、模型组、脂必妥组、辛伐他汀组、中药组,其中,中药组又具体划分为高、中、低3个剂量组,除空白组外均给予高脂饮食制备高脂血症大鼠模型。造模成功后给予药物治疗8周,检测血清总胆固醇(Total Cholesterol,TC)、载脂蛋白A1(Apolipoprotein A1,Apo-A1)等;实时荧光定量聚合酶链式反应法检测大鼠肝组织DGAT2 mRNA的表达水平。结果:模型组大鼠血清TC、三酰甘油(Triglycerides,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(Low-density Lipoprotein Cholesterol,LDL-C)水平均高于空白组,高密度脂蛋白胆固醇(High-density Lipoprotein Cholesterol,HDL-C)、Apo-A1水平低于空白组,且两组数据差异较大(P<0.01);此外,经过检测发现,相较于模型组,各治疗组血清TC、TG、LDL-C含量均减少,与此同时,其他组的HDL-C、Apo-A1水平均提升,且对比可知以上指标差异较大(P<0.05,P<0.01);在中药组中,采用药物干预一段时间后,中剂量组较另外两组TC、TG下降,而HDL-C相应增加,组间对比结果显示差异显著(P<0.05)。在DGAT2 mRNA表达方面,模型组较空白组含量显著增加,而与其他组相比又呈现出下降趋势(P<0.05);在中药组中,中剂量组较另外两组均明显减少,且差异显著(P<0.05)。结论:化浊行血汤可起到调节脂质代谢的效用,本次研究得出,其功效或与下调肝脏DGAT2 mRNA的表达有关。