基于NF-κB/NLRP3信号通路探究二黄祛脂颗粒治疗非酒精性脂肪肝病的作用机制

目的探讨二黄祛脂颗粒(Erhuang Quzhi Granules,EQG)对西方饮食(Western diet,WD)联合低剂量CCl_(4)诱导的非酒精性脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)小鼠模型的治疗效果及其作用机制。方法喂养C57BL/6小鼠WD饲料、高糖水溶液(23.1 g·L^(-1)D-果糖和18.9 g·L^(-1)D-葡萄糖)12周构建NAFLD模型,除空白组外,其它组小鼠每周腹腔注射2%CCl_(4)玉米油溶液(0.01 mL·g^(-1))1次。造模6周后,给药组分别灌胃阿托伐他汀(atorvastatin,ATO,7.2 mg·kg^(-1))和EQG(16.25 g·kg^(-1))。给药6周后收集小鼠血清及组织,检测血清生化指标,通过油红O染色、HE染色和Masson染色观察肝脏病理变化,采用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测血清中白介素(interleukin,IL)-1β、IL-6、IL-18及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平,采用Western blot法检测肝组织NF-κB/NLRP3通路相关蛋白表达水平。结果EQG能够明显改善小鼠血清生化指标、肝脏组织病变和脂质沉积,明显降低血清中IL-1β、IL-6、IL-18及TNF-α的含量,明显下调IKKβ、NF-κB p65、NLRP3、ASC、cleaved-caspase-1蛋白的表达,上调IκBα的蛋白表达。结论EQG能够通过作用于NF-κB/NLRP3通路,减轻肝脏炎症,对NAFLD具有良好的治疗效果,应予以临床推广。

二黄祛脂颗粒联合水飞蓟宾胶囊对非酒精性脂肪肝患者脂肪肝指数、炎症因子及自噬相关基因水平的影响

【目的】探讨二黄祛脂颗粒联合水飞蓟宾胶囊对非酒精性脂肪肝(NAFLD)患者脂肪肝指数、炎症因子及自噬相关基因水平的影响。【方法】将126例痰瘀互结型NAFLD患者随机分为对照组和观察组,每组各63例。对照组给予水飞蓟宾胶囊口服治疗,观察组在对照组的基础上给予二黄祛脂颗粒口服治疗,疗程为3个月。观察2组患者治疗前后脂肪肝指数、炎症因子[白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)]、肝功能及血脂指标[丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、γ谷氨酰转肽酶(GGT)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)]、自噬相关基因[自噬相关基因7(ATG7)、肌球蛋白样BCL2结合蛋白(Beclin 1)]水平的变化情况,并评价2组患者的临床疗效和安全性。【结果】(1)疗效方面,治疗3个月后,观察组的总有效率为90.48%(57/63),对照组为71.43%(45/63),组间比较(χ^(2)检验),观察组的疗效明显优于对照组(P<0.01)。(2)脂肪肝指数方面,治疗后,2组患者的脂肪肝指数均较治疗前明显降低(P<0.05),且观察组对脂肪肝指数的降低幅度明显优于对照组(P<0.01)。(3)炎症因子方面,治疗后,2组患者血清IL-6、TNF-α水平均较治疗前明显降低(P<0.05),且观察组对血清IL-6、TNF-α水平的降低幅度均明显优于对照组(P<0.05)。(4)肝功能方面,治疗后,2组患者血清ALT、AST、GGT水平均较治疗前明显降低(P<0.05),且观察组对血清ALT、AST、GGT水平的降低幅度均明显优于对照组(P<0.05)。(5)血脂方面,治疗后,2组患者血清TG、TC、LDL-C水平均较治疗前明显降低(P<0.05),血清HDL-C水平均较治疗前明显升高(P<0.05),且观察组对血清TG、TC、LDL-C水平的降低幅度及对血清HDL-C水平的升高幅度均明显优于对照组(P<0.05)。(6)自噬相关基因方面,治疗后,2组患者的血清ATG7、Beclin 1水平均较治疗前明显升高(P<0.05),且观察组对血清ATG7、Beclin 1水平的升高幅度均明显优于对照组(P<0.05)。(7)安全性方面,用药过程中2组患者均未见肝、肾功能损害或严重不良反应。【结论】二黄祛脂颗粒联合水飞蓟宾胶囊治疗痰瘀互结型NAFLD患者疗效确切,有助于缓解脂肪肝症状,降低炎症因子水平,改善肝功能及血脂水平,调节自噬相关基因表达。

二黄祛脂颗粒对非酒精性脂肪性肝病患者肝功能及血脂的影响

目的观察二黄祛脂颗粒剂对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者肝功能及血脂的影响及安全性。方法将110例NAFLD患者随机分为治疗组和对照组各55例。两组患者均给予综合治疗,即控制饮食、适当运动、减轻体重,口服维生素E丸,每次0.5g,每日3次。治疗组加用二黄祛脂颗粒口服,每日1剂。对照组加用多烯磷脂酰胆碱胶囊口服,每粒228mg,每次2粒,每日3次。两组均以1个月为1个疗程,连续治疗3个疗程。观察治疗前后两组患者肝功能指标[包括丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、γ谷氨酰转肽酶(GGT)]、血脂[包括甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)]水平,并判定临床疗效,观察治疗期间不良反应情况。结果治疗组治愈27例,显效14例,有效9例,无效5例,总有效率为90.90%;对照组分别为15例、12例、9例、19例及65.45%。两组患者临床疗效比较差异有统计学意义,治疗组优于对照组(P<0.05)。两组治疗后较本组治疗前ALT、AST、GGT、TG、TC、LDL-C水平均降低,HDL-C水平升高(P<0.05);治疗组治疗后各项指标较对照组改善更明显(P<0.05)。两组均未出现不良反应。结论二黄祛脂颗粒剂可改善NAFLD患者肝功能,调节血脂水平,安全性好。

二黄祛脂颗粒对小鼠非酒精性脂肪肝病的治疗作用及机制研究

二黄祛脂方是袁今奇等老中医在长期临床实践中总结出的“护肝抑毒系列方”之一,治疗非酒精性脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)颇有成效,但其作用机制尚不明确。本研究探讨了二黄祛脂颗粒(Erhuang quzhi granules,EQG)治疗NAFLD的作用机制。动物福利和实验过程均遵循石河子大学第一附属医院动物伦理委员会的规定。通过蛋氨酸胆碱缺乏饲料(methionine and choline deficient diet,MCDD)饮食诱导5周建立NAFLD小鼠模型,治疗组喂养MCDD的同时分别灌胃给予EQG(16.25 g·kg^(-1)·d^(-1))、阿托伐他汀(atorvastatin,ATO,7.20 mg·kg^(-1)·d^(-1))。考察EQG对NAFLD小鼠相关血清生化指标、肝脏病理变化和炎症因子的影响,并应用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)法、免疫组织化学(immunocytochemistry,ICH)法和Western blot法检测肝组织核因子-κB/Nod样受体蛋白3(nuclear factor kappa B/Nod-like receptor protein 3,NF-κB/NLRP3)信号通路相关mRNA和蛋白的水平。结果显示,EQG显著降低小鼠血清中天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)含量,提高低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)水平。苏木素-伊红染色结果表明EQG减轻小鼠肝脏的脂质沉积。此外,EQG显著降低小鼠肝组织中白介素(interleukin,IL)-1β、IL-6、IL-18、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的含量和NF-κB、NLRP3、IL-1β、TNF-α的mRNA水平,下调F4/80、IκB激酶β(IκB kinaseβ,IKKβ)、NLRP3、含有CARD且与凋亡相关的斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD,ASC)的表达,抑制NF-κB和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(cysteinyl aspartate specific proteinase-1,caspase-1)蛋白的活化。以上研究揭示了EQG治疗NAFLD的作用机制可能与其抑制NF-κB/NLRP3信号通路有关,这为EQG在临床上的进一步开发与利用提供了理论依据。