黑腹果蝇黑条体突变型的基因定位研究

黑腹果蝇的体色突变类型常见的有黄体（ｙｅｌｌｏｗ；ｙ）、黑体（ｂｌａｃｋ，ｂ）和黑檀体（ｅｂｏｎｙ，ｅ），分别位于Ｘ染色体，第二染色体和第三染色体上。黑条体突变型是本实验室１９９１年９月从野外采集的黑腹果蝇野生型单雌系后代中发现的自发突变品系，为了探明黑条体突变型是原有黑体突变类型的再现还是新的突变，采用常规杂交方法和互补实验技术对黑腹果蝇黑条体突变型的基因定位进行了探讨。互补测验的结果表明，黑条体与黑檀体杂交的子一代为反式排列的杂合体无互补，表现为突变型，子二代中，由于交换而产生重组类型的顺式排列的杂合体表现为野生型。因此确定黑条体突变基因（ｂｓｒ）与黑檀体突变基因（ｅ）是等位的，位于第三染色体的９３Ｄ２区，但分别位于不同的位点上，属于同一顺反子的新的点突变。同时对于各体色基因间的相互作用及遗传传递方式的进行了讨论。

家蚕基因库保存遗传系统白卵突变的杂交鉴定

用杂交分析的方法 ,采用各已知白卵基因的标志系统对家蚕基因资源库 2 1个未知基因的白色卵系统进行鉴定 ,结果 :①有 3个系统为母性遗传白卵 ,基因座位均与w - 1相同 ,其中 2个与w - 1遗传模式完全一致 ,但另 1个表现为混合型母性遗传 (F1似母 ,F2 普通遗传 ) ,可能为一新的卵色基因 ;②有 4个系统与w - 2杂交后代不分离 ,很可能直接由w - 2基因支配 ;③地方品种 19- 340为黑眼浅褐色白卵 ,普通遗传 ,与w - 3杂交后代无正常型黑色卵分离 ,初步推定为w - 3复等位基因群又一新成员 ;④有 13个系统与桃红眼白卵 (pe)系杂交后代不分离 ,且卵色纯一 ,初步推定它们均由pe基因支配。此外 ,部分白卵系统具有红色卵 (re)的re/re或re/

pBIFC-VN173-CXCR4和pBIFC-VC155-NT21MP真核表达质粒的构建及其在活细胞内的作用

目的:构建pBIFC-VN173-CXCR4和pBIFC-VC155-NT21MP真核表达质粒,利用双分子荧光互补(BiFC)技术,在活细胞内直接观察趋化因子受体4(chemokine receptor 4、CXCR4和CD184)与CXCR4抑制性多肽的相互作用。方法:应用化学合成法获得巨噬细胞炎症蛋白Ⅱ(viralmacrophage inflammatory protein-Ⅱ,vMIP-Ⅱ)N端21肽(N-terminal 21-mer peptide,NT21MP)编码的基因序列,克隆至经Kpn I和EcoRⅠ酶切的pBiFC-VC155中,筛选含有目标基因的正确克隆。利用RT-PCR扩增人乳腺癌细胞株SKBR3的CXCR4全长基因后,T-A亚克隆至经Kpn I和EcoRⅠ酶切的pBiFC-VN173载体中。然后,经酶切鉴定及DNA测序分析2个基因是否正确连接至真核表达载体中。应用脂质体转染的方法共转染pBiFC-VC155-NT21MP和pBiFC-VC155-CXCR4至细胞株COS-7中,在荧光显微镜下观察NT21MP与CXCR4在胞内的相互作用。结果:经DNA测序及同源性对比,证实pBiFC-VC155-NT21MP和pBiFC-VN173-CXCR4重组载体构建成功;基因片段与NCBI基因库vMIP-Ⅱ和CXCR4基因CDS序列同源性达99.9%。BiFC法观察NT21MP与CXCR4在细胞内结合出现的荧光信号,该信号分布细胞内。结论:本实验成功构建了应用BiFC技术的真核表达载体,并且在活细胞内检测到NT21MP与CXCR4的互相结合。