五倍子水提物对UVB诱导光老化成纤维细胞的保护作用

目的探究五倍子水提物(galla chinensis extract,GCE)对中波紫外线(UVB)诱导的人皮肤成纤维细胞(HSF)光老化的保护作用及机制。方法通过自由基清除实验、弹性蛋白酶抑制实验评价五倍子水提物的抗衰老能力;建立UVB诱导的细胞光老化模型,给予五倍子水提物干预,将细胞分为对照组、模型组(UVB)和实验组(GCE)。通过CCK-8法检测细胞存活率,β-半乳糖苷酶染色法检测细胞衰老水平,流式细胞仪检测活性氧(ROS),试剂盒检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)的活性;通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、白细胞介素-6(IL-6)、Ⅰ型胶原蛋白(COL-1)含量。蛋白免疫印迹法(Western blot)检测相关蛋白表达水平。结果五倍子水提物具有清除自由基、抑制弹性蛋白酶活性、显著提高UVB诱导的HSF存活率、COL-1含量、抗氧化物酶(CAT、SOD)活性等作用,与对照组及UVB组相比差异有统计学意义(P<0.05)。同时,五倍子水提物还可以显著抑制UVB诱导的HSF衰老,ROS、IL-6、MMP-1和MDA生成以及抑制丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路中p-ERK1/2、p-JNK及p-p38蛋白的表达水平,与对照组及UVB组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论五倍子水提物可通过提高抗氧化酶活力以及抑制MAPK信号通路的激活,发挥抗光老化作用。

利用Caco-2细胞模型研究五倍子水提物的降糖机制

目的建立Caco-2细胞单层模型并探索其在筛选抗糖尿病药物方面的作用,研究五倍子水提物的降糖作用及机制。方法采用酶抑制剂模型研究五倍子水提物的α-糖苷酶抑制作用;用Caco-2细胞模型进一步研究五倍子水提物对肠上皮细胞麦芽糖酶和蔗糖酶活力的影响以及对葡萄糖转运吸收的影响。结果五倍子水提物能抑制酶抑制剂模型和小肠上皮细胞上的α-糖苷酶;对葡萄糖在Caco-2细胞上的吸收也有一定的抑制作用。结论五倍子抗糖尿病的作用可能主要通过抑制蔗糖酶、麦芽糖酶的活力,作为一种α-葡糖苷酶抑制剂发挥抗糖尿病作用,可能通过抑制葡萄糖吸收而起部分作用。稳定的Caco-2细胞单层模型在筛选抗糖尿病药物方面有重要的意义。