8种五加属植物根皮中五加酸和贝壳烯酸的RP-HPLC法定量分析

建立反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定五加酸和贝壳烯酸的定量分析方法,利用最优色谱条件对8种中韩五加属植物根皮中的五加酸和贝壳烯酸进行定量分析。研究结果表明,最佳色谱条件为:ODS-C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈-水(0～60min时乙腈含量为10%→100%,60～70min时乙腈含量为100%);检测波长为207nm;柱温为30℃;流速为1.0mL/min。五加酸和贝壳烯酸线性范围分别为:0.1070～0.5351g/L(相关系数r=0.9999)和0.0930～0.4649g/L(r=0.9998),加样回收率分别为97.93%(标准偏差为1.33%)和98.12%(标准偏差为1.16%)。

RP-HPLC法测定糙叶五加不同部位中五加酸和贝壳烯酸含量

为了建立反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定糙叶五加不同部位中五加酸和贝壳烯酸的定量分析方法,本研究采用RP-HPLC外标法测定了五加酸和贝壳烯酸含量。所用色谱柱:ODS-C18(250mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈-水(0～60min时乙腈含量为10%～100%,60～70min时乙腈含量为100%);检测波长207nm;柱温30℃;流速1.0mL/min。结果表明:在上述色谱条件下,五加酸和贝壳烯酸获得良好分离,线性范围分别为:0.1070～0.5351g/L(相关系数r=0.9999)和0.0930～0.4649g/L(r=0.9998),加样回收率分别为97.93%(标准偏差为1.33%)和98.12%(标准偏差为1.16%)。糙叶五加根、茎、叶中五加酸的平均含量(n=3)分别为:39.90、19.72、49.19μg/g;贝壳烯酸的平均含量(n=3)分别为:21.01、21.70、25.88μg/g。由此可知,该方法准确性高,重现性好,为糙叶五加的质量控制提供了可借鉴的定量分析方法。

刺五加酸对急性肝损伤小鼠的保护作用

目的探讨刺五加酸对急性肝损伤模型小鼠的保护作用。方法小鼠60只,随机分成6组,即正常对照组,模型对照组,阳性对照组(N-乙酰-L-半胱氨酸,NAC 300 mg·kg-1),刺五加酸小、中、大剂量(50,100,200 mg·kg-1)组,每组10只。连续给药3 d,末次给药前禁食16 h,给药1 h后除正常对照组外均灌胃给予他克林35 mg·kg-1。观察小鼠血清的生化指标和病理组织变化。结果刺五加酸大剂量组天冬氨酸氨基转移酶(143±46)U·L-1,丙氨酸氨基转移酶(32±9)U·L-1,乳酸脱氢酶(1 218±312)U·L-1,丙二醛(3.24±0.48)μmol·g-1,谷胱甘肽(417±15)mg·g-1,均明显下降,与模型对照组比较均差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),肝损伤程度减轻。结论刺五加酸对急性肝损伤模型小鼠具有良好的保护作用。

刺五加酸对酒精性肝损伤的影响

目的:探讨刺五加酸(AA)对小鼠急性肝损伤的保护作用。方法:将60只小鼠随机分成6组,即正常组,乙醇模型组,水飞蓟素组(100 mg.kg-1),刺五加酸高、中、低剂量组(30,10,5 mg.kg-1)。小鼠每隔12 h给药1次,连续给药3次。每次给药后1 h,除正常组外均灌胃60%乙醇(5 g.kg-1)。观察大鼠血清的生化指标和病理组织变化。结果:在AA的高、中剂量组ALT(25±6),(31±8)U.L-1,AST(157±23),(187±18)U.L-1,TNF-α(32±4.62),(41±5.3)μg.L-1以及TG(190±23),(257±23)mmol.L-1明显下降,与模型组比较有显著性差异(P<0.001),减少了肝损伤程度。结论:刺五加酸对乙醇引起的小鼠急性肝损伤具有良好的保护作用。

南五加萜酸对大鼠实验性溃疡的作用

南五加萜酸具有生胃酮样抗溃疡活性,剂量为50～100mg/kg时对大鼠消炎痛型、幽门结扎型和无水乙醇型溃疡模型均具有良好的保护作用。南五加萜酸可显著升高幽门结扎大鼠胃液中氨基己糖含量,对胃液分泌和胃蛋白酶活性无明显影响,提示其可增加胃粘膜的保护因素。生胃酮对大鼠尿Na^+及K^+的排泄均有明显的抑制作用,对钠负荷大鼠有增加尿K^+排泄的作用;但南五加萜酸对正常及钠负荷大鼠尿Na^+及K^+的排泄均无明显影响,提示其不会引起动物和人水钠潴留。

细柱五加枝叶提取物的抗肿瘤和抗血管生成活性

目的:研究细柱五加叶化学成分的生物活性。方法:采用硅胶柱层析、凝胶、反向、重结晶等方法,分离纯化单体化合物,运用MTT法检测化合物对乳腺癌细胞MDA-MB-231、肺癌细胞A549、人脐静脉内皮细胞HUVEC等生长的影响。结果:从细柱五加叶中分离得到17个化合物,活性筛选结果表明,细柱五加酸、Acankoreagenin质量浓度为60μmol/L时,MDA-MB-231存活率分别为36%、52%;HUVEC存活率分别为36%、62%。当细柱五加酸浓度为50μmol/L时,MDA-MB-231、A549细胞存活率分别为58%、75%。细柱五加酸60μmol/L与Tax 10 nmol/L联合使用时,可使MDA-MB-231存活率从71.4%下降到47.4%。结论:细柱五加枝叶中含有的细柱五加酸与Acankoreagenin具有抗肿瘤和抗血管生成活性,与化疗药物联合使用具有协同作用。

五加皮中二萜类化学成分及其抗炎活性研究

目的 对五加皮Acanthopanacis Cortex的二萜类化学成分及抗炎活性进行研究。方法 通过MCI树脂柱、硅胶柱、薄层色谱、半制备HPLC等方法对五加皮药材中化学成分进行提取分离,采用核磁共振波谱、质谱、红外光谱等方法,对单体化合物的结构进行鉴定。采用Griess法测试脂多糖诱导小鼠单核巨噬细胞RAW264.7细胞释放炎症因子模型,对化合物进行抗炎活性评价。结果 从五加皮70%乙醇提取物中分离得到13个二萜类化合物,包括7个对映海松烷型二萜7β-羟基-8(14),15-二烯-19-异海松烷酸(1)、7-酮基-8(14),15-二烯-19-异海松烷酸(2)、7β-甲氧基-8(14),15-二烯-19-异海松烷酸(3)、6,8(14),15-三烯-19-异海松羧酸(4)、14-酮基-8,15-二烯-19-异海松羧酸(7)、14-羟基-16-乙烯基-8,11,13-三烯-17-异海松羧酸(8)、7α-羟基-8(14),15-二烯-19-异海松烷酸(11);以及6个对映贝壳杉烷型二萜16α,17-二羟基-19-异贝壳杉烷羧酸(5)、17-羟基-19-异贝壳杉烷羧酸(6)、异贝壳杉烯酸(9)、17-醛基-19-异贝壳杉烯酸(10)、17-醛基-15-烯-19-异贝壳杉烷酸(12)和17-羟基-15-烯-19-异贝壳杉烷酸(13)。其中化合物8为新化合物,命名为细柱五加酸G1;3和4为首次从细柱五加植物中分离得到。体外抗炎活性研究表明,13个化合物均具有一定的抗炎活性,其中化合物1~3、7的活性较好。海松烷型二萜类化合物抗炎活性较贝壳杉烷型二萜强,海松烷型二萜类化合物7位取代活性强弱顺序为β-OH>β-OCH_(3)>Δ^(6)双键>C=O>α-OH。结论 五加皮分离鉴定的化合物及其活性研究为五加皮专属性质控方法建立、药用资源合理开发和利用提供了依据。

细柱五加叶的化学成分

目的研究细柱五加Acantho panax gracilistylus叶的化学成分。方法采用硅胶柱色谱、重结晶等方法，根据理化性质和光谱数据鉴定化合物的结构。结果从细柱五加叶中得到17个化合物，分别鉴定为异贝壳杉烷酸[（-）-kaur-16-en-19-oic acid，Ⅰ]、槲皮素（quercetin，Ⅱ）、山奈酚（kaempferol，Ⅲ）、原儿茶酸（protocatechuic acid，Ⅳ）、acankoreoside A（Ⅴ）、acantrifoside A（Ⅵ）、3a，11α-dihydroxyl-20（29）-lupene-23，28-dioicacid（Ⅶ）、β-谷甾醇（β-sitosterol，Ⅷ）、胡萝卜苷（daucosterol，Ⅸ）、棕榈酸（palmitic acid，Ⅹ）、芦丁（rutin，Ⅺ）、stigmast-5，22-dien-3-O-α-Dglucopyranoside（Ⅻ、acankoreagenin（ⅩⅢ）、3，11-dihydroxy-23-OXO-20（29）-lupen-28-oic acid（ⅩⅣ）、3-hydroxy-23-OXO-20（29）-lupen-28-oicacid（ⅩⅤ）、三肉豆蔻酸甘油酯（myristin，ⅩⅥ）、细柱五加酸（acanthopanaxgric acid，Ⅶ）。结论化合物Ⅱ～Ⅳ、Ⅶ、Ⅺ、ⅩⅡ、Ⅳ、ⅩⅤ首次从该植物中分离得到，化合物ⅩⅦ为新化合物，命名为细柱五加酸（acanthopanaxgric acid）。