北五味子的采收加工与炮制研究进展

总结近年采收期对北五味子中木脂素、有机酸、多糖等多种成分的影响,考察晒干、阴干、烘干等产地初加工方法,以及醋制工艺、酒制工艺、盐制工艺等,炮制后北五味子中化学成分的变化,炮制后北五味子镇静催眠、降血糖、保肝和保肾等药理作用变化情况,指出北五味子具有多种药理活性,在多种常用复方中均有使用,应用前景广泛,但仍需要运用现代科学技术全面开展北五味子采收、加工、炮制等方面的研究,为北五味子的临床合理应用提供参考。

基于化学计量学和指纹图谱的辽宁道地药材北五味子质量评价研究

目的 采用指纹图谱与化学计量学相结合的方法,评价辽宁岫岩产北五味子的质量。方法 采用HPLC法,柱温30℃,流速1 mL/min,流动相采用水-乙腈梯度洗脱,检测波长220 nm,对10批辽宁岫岩五味子基地生产的北五味子建立指纹图谱,运用聚类分析(hierarchical cluster analysis, HCA)、主成分分析(principal component analysis, PCA)及正交偏最小二乘法-判别分析(orthogonal partial least squares-discriminant analysis, OPLS-DA)进行化学模式识别分析。结果 建立了岫岩产北五味子的指纹图谱,相似度为0.970^0.999,共标定了29个共有峰,指认了14个成分;HCA分析10批北五味子可分为2类;PCA共得到6个主要成分,其累计方差贡献率为95.5%;OPLS-DA表明五味子甲素、戈米辛G、五味子丙素、五味子醇乙等11个成分可能是影响北五味子质量的差异性标志物。结论 研究所建立的指纹图谱结合化学模式识别分析,方法准确、稳定、可靠,可用于北五味子药材的质量控制研究。

基于UPLC-Q-TRAP-MS分析养心安神药对酸枣仁-五味子配伍煎煮前后10个指标成分含量变化

目的分析养心安神药对酸枣仁-五味子配伍煎煮前后主要指标成分差异变化,并建立含量测定方法。方法采用Welch Ultimate XB-C_(18)色谱柱(2.1 mm×50 mm,5μm),以0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相,流速0.4 mL/min柱温40℃,梯度洗脱;质谱采用电喷雾离子源(ESI),多反应监测离子扫描模式(MRM)。分别对该药对单煎液、单煎合并液与合煎液中主要指标成分酸枣仁皂苷A、斯皮诺素、五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素、芦丁、槲皮素、山柰酚、山柰酚-3-O-云香糖苷进行含量测定,并分析药对配伍前后主要指标成分的含量变化差异。结果以上10种成分在一定浓度范围内均呈现良好的线性关系;精密度、重复性和稳定性RSD均良好;平均加样回收率在95.0%~102.1%,RSD为0.03%~3.7%。本次实验结果与前期试验认为酸枣仁与五味子在合煎后,主要指标成分降低保持一致性。结论多指标成分同时测定为该药对配伍质量全面控制提供新的方法并为其药效物质基础的深入研究提供依据。

基于生态位模型的南、北五味子潜在适生区预测及其影响因子研究

基于184条南五味子(Schisandra sphenanthera)地理分布记录、129条北五味子(Schisandra chinensis)地理分布记录以及23个环境因子数据,采用MaxEnt生态位模型预测南、北五味子潜在适宜分布区,评估了制约其地理分布的主要环境因子。结果表明,北五味子和南五味子MaxEnt模型训练集和验证集曲线下面积(AUC)均大于0.90,建立的模型预测结果准确。北五味子最佳生境主要分布在辽宁省和吉林省的长白山区域以及北京市;南五味子的最佳生境主要分布在秦巴山区内,以及湖南省武陵山脉,郴州市、株洲市和衡阳市,浙江省金华市等地区。限制北五味子生长的重要环境因子变量分别是最湿月份降水量、最热月份最高温度、土壤酸碱度、最暖季平均降水量、最冷季平均降水量和昼夜温差月均值;限制南五味子分布的环境因子变量分别是最冷月份最低温温度、年平均降水量、温度变化方差和降水量变化方差。南、北五味子的潜在适生区呈区域化分布。

基于网络药理学探析五味子防治稽留流产的机制及验证

目的:基于网络药理学方法分析五味子防治稽留流产的潜在作用机制,并通过实验进行验证。方法:运用系统药理学方法查找并从中药系统药理学数据库和分析平台(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform,TCMSP,https://old.tcmsp-e.com/tcmsp.php)筛选五味子的活性成分及靶点,查找稽留流产相关基因,确定五味子防治稽留流产的靶点。利用Cytoscape构建“药物成分-靶点”网络,筛选关键化合物。利用String建立蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络,并通过Cytoscape-CytoNCA拓扑分析筛选核心靶点。通过对靶基因进行基因本体(gene ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)分析,以预测其可能的信号通路及机制。最后借助人绒毛膜外滋养层细胞系(HTR-8/SVneo)利用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测和蛋白质印迹(Western blotting)检测进行机制验证。结果:从TCMSP数据库中鉴定了7种五味子活性成分。PPI网络表明雄激素受体(androgen receptor,AR)、雌激素受体(estrogen receptor,ER)、环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)、核受体辅激活因子2(nuclear receptor coactivator 2,NCOA2)和乙酰胆碱酯酶(acetylcholine esterase,ACHE)可能是五味子防治稽留流产的核心作用靶点。GO富集分析获得44个细胞生物学过程,KEGG途径富集分析获得2个相关信号通路,主要包括甲状腺激素信号通路和雌激素信号通路;在利用细胞模型验证机制过程中发现,二羟环氧苯并芘[benzo(a)pyren-7,8-dihydrodiol-9,10-epoxide,BPDE]染毒后的细胞中AR、ER和COX-2的蛋白质和(或)mRNA水平高于正常细胞,而先使用五味子乙素(Schisandrin B,Sch B)预处理后再染毒BPDE的细胞中AR、ER和COX-2的蛋白质和(或)mRNA水平均较未用Sch B预处理的细胞降低,而NCOA2和ACHE的蛋白质和(或)mRNA水平变化不明显。结论:五味子可通过抗炎和调节AR、ER发挥防治稽留流产的作用,这一保护作用可能是通过雌激素信号通路来实现的。

微生物菌剂对五味子生长及土壤环境的影响

以大红袍五味子实生苗为试验材料,采用盆栽试验,以清水为对照(CK),分别浇灌兴农精赞农用微生物菌剂(S1)、绿色木霉菌(S2)、枯草芽孢杆菌(S3)、茬倍健农用微生物菌剂(S4),探索微生物菌剂对五味子灌根后的形态、生理特性、土壤理化性质及微生物环境的影响。结果表明,与CK相比,4种微生物菌剂均能促进五味子茎粗的增长,其中以S4处理的植株生长效果最佳;S3和S4处理植株叶片SPAD值显著高于其他处理;各处理均能不同程度地提高植株叶片的SOD和POD活性;S3处理CAT活性较对照显著提高11.32%;S4的APX活性显著高于对照88.73%,但同时该处理的MDA含量增加20.51%,对植株的细胞膜损伤程度增大;添加微生物菌剂可提高铵态氮、有效磷、速效钾以及有机质含量;整体菌群数量表现为S2>S1>S3>S4>CK。综上所述,外源微生物菌剂通过改变土壤中的菌群数量,改善土壤养分含量,促进植物吸收利用,从而增强代谢水平与抗逆能力,促使植株生长发育。本试验4种菌剂中以茬倍健农用微生物菌剂的综合调控最优。

五味子提取物对仔猪生长性能、肠道形态和免疫功能的影响

文章旨在探究五味子提取物对仔猪生长性能、肠道形态和免疫功能的影响。试验将400头28日龄健康、体况良好的三元杂交猪随机分为4组,每处理10个重复,每重复10头。试验日粮分别向基础日粮中添加0、200、400和800 mg/kg的五味子提取物,预饲期3 d,正试期28 d。结果表明:补充400和800 mg/kg五味子提取物可显著提高仔猪6.25%和4.61%的终末体重(P<0.05);显著提高仔猪15.67%和10.95%的平均日增重(P>0.05);显著降低仔猪10.41%和9.09%的料重比(P<0.05);此外,0~800 mg/kg的五味子提取物对仔猪采食量无显著影响(P>0.05)。800 mg/kg的五味子提取物可显著提高仔猪血清IgM含量(P<0.05);200~800 mg/kg的五味子提取物可显著提高仔猪血清IgG含量(P<0.05);400 mg/kg的五味子提取物可显著降低仔猪血清IL-1β含量(P<0.05);此外,五味子提取物对仔猪血清IgA和TNF-α含量无显著影响(P>0.05)。400和800 mg/kg五味子提取物组仔猪空肠绒毛高度显著提高(P<0.05);400 mg/kg五味子提取物组仔猪空肠隐窝深度及V/C值显著提高(P<0.05);400 mg/kg五味子提取物组仔猪回肠绒毛长度及V/C值显著提高(P<0.05);此外,0~800 mg/kg五味子提取物对仔猪十二指肠肠道形态、回肠隐窝深度均无显著影响(P>0.05)。在本试验条件下,五味子提取物最适添加量为400 mg/kg。

光强对不同品种五味子叶片荧光特性的影响

以五味子品种(品系)‘白果’‘金五味1号’和‘妍脂红’为试材,采用快速叶绿素荧光诱导动力学曲线JIP-Test分析方法,研究了500μmol·m^(-2)·s^(-1)和300μmol·m^(-2)·s^(-1)光强条件对五味子一年生苗的叶绿素荧光诱导动力学的影响,以期筛选出适宜在弱光条件下栽培的五味子品种,为五味子引种试栽提供参考依据。结果表明:‘白果’是较耐弱光品种,500μmol·m-2·s-1会使其发生光抑制,300μmol·m^(-2)·s^(-1)光照下能够增强其光能吸收、提高光化学效率、传递效率和量子产量,提高了光能的吸收、转换和传递。

甜橙精油-北五味子提取物复合膜的制备及其在冷鲜猪肉保鲜中的应用

为提高冷鲜猪肉的保鲜能力并延长其货架期,以甜橙精油(orange essential oil,OEO)、北五味子提取物(Schisandra chinensis extract,SCE)为活性成分,羧甲基纤维素钠(sodium carboxymethyl cellulose,CMC-Na)为成膜基质,采用流延法制备复合膜。利用单因素试验和正交试验优选复合膜的配制方法,以色泽、汁液流失率、pH值、感官评价、总挥发性盐基氮含量和菌落总数探究OEO-SCE复合膜对冷鲜猪肉保鲜能力的影响。结果表明,当CMC-Na添加量为1.0 g/100 mL、SCE添加量为0.9 g/100 mL、OEO添加量为0.2%(V/V)时,制备的复合膜综合性能最佳:断裂伸长率为(63.860±0.120)%,抗拉强度为(8.800±0.049)MPa,水蒸气透过率为(2.360±0.070)g·mm/(m^(2)·h·kPa)。用该膜包裹冷鲜猪肉进行保鲜,与未包膜组相比,色泽及感官评分有明显提升,可以有效降低贮藏期内的总挥发性盐基氮含量、pH值、汁液流失率及菌落总数,贮藏期从6 d延长至8 d。由此可见,OEO-SCE复合膜可以抑制冷鲜猪肉在贮藏期内的腐败变质并延长其贮藏期。

五味子乙素通过TLR4/NF-κB信号通路对急性胰腺炎大鼠肺部损伤的影响

目的:探讨五味子乙素通过Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路对急性胰腺炎(AP)大鼠肺部损伤的影响。方法:取SD大鼠,通过胆胰管内逆行注射5%牛磺胆酸钠方法诱导建立AP肺损伤模型,经随机数表法分为模型组、五味子乙素组、TLR4过表达载体组、TLR4空载组、五味子乙素+TLR4过表达载体组,每组12只大鼠,再取12只SD大鼠仅翻动肠管不注射5%牛磺胆酸钠,作为假手术组。以药物分别干预大鼠后,检测各组大鼠肺功能及各组大鼠腹水量与肺组织湿重/干重(W/D);HE染色检测各组大鼠肺组织病理形态并评分;检测各组大鼠动脉血气;全自动生化分析仪检测大鼠血清淀粉酶,ELISA检测炎症细胞因子IL-6、IL-18水平;蛋白免疫印迹法检测肺组织TLR4/NF-κB通路蛋白表达;免疫组织化学染色检测肺组织TLR4蛋白表达。结果:与假手术组相比,模型组大鼠肺组织出现病理损伤改变,模型组大鼠MV、PEF、PaO_(2)、OI显著降低(P<0.05),Ri、腹水量与W/D、PaCO_(2)、Holfbauer评分、血清淀粉酶、IL-6与IL-18水平、肺组织TLR4阳性细胞比例、TLR4与MYD88蛋白表达、p-NF-κB p65/NF-κB p65水平显著升高(P<0.05)。与模型组、五味子乙素+TLR4过表达载体组分别相比,五味子乙素组大鼠肺组织病理损伤改变程度均减轻,MV、PEF、PaO_(2)、OI均升高(P<0.05),Ri、腹水量与W/D、PaCO_(2)、Holfbauer评分、血清淀粉酶、IL-6与IL-18水平、肺组织TLR4阳性细胞比例、TLR4与MYD88蛋白表达、p-NF-κB p65/NF-κB p65水平均降低(P<0.05);TLR4过表达载体组大鼠肺组织病理损伤改变程度均加重,MV、PEF、PaO_(2)、OI均降低(P<0.05),Ri、腹水量与W/D、PaCO_(2)、Holfbauer评分、血清淀粉酶、IL-6与IL-18水平、肺组织TLR4阳性细胞比例、TLR4与MYD88蛋白表达、p-NF-κB p65/NF-κB p65水平均升高(P<0.05)。与模型组相比,TLR4空载组大鼠各指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论:五味子乙素可通过下调TLR4/NF-κB信号通路,抑制炎症,减轻AP大鼠肺部损伤,修复肺功能。

指纹图谱技术结合化学计量学评价五味子醇提物质量探索研究

目的:优化五味子乙醇提取工艺,建立其醇提物HPLC指纹图谱并结合化学计量学综合分析其质量。方法:基于单因素试验,采用L9(34)正交试验设计,系统研究了乙醇浓度、提取时间、提取次数及料液比等因素对五味子中五味子醇甲和五味子乙素的提取率产生的影响。按最优提取工艺制备9批五味子乙醇提取物,建立其高效液相色谱(HPLC)指纹图谱。以共有峰峰面积为变量,结合化学计量学方法包括系统聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)法对9批五味子醇提物质量进行分析。结果:确定最佳提取工艺为:采用80%乙醇作为溶剂,料液比为1:10,进行2次回流提取,每次持续1 h。在9批五味子提取物指纹图谱中共有32个共有峰,并成功鉴定出X18(五味子醇甲)、X29(五味子甲素)和X32(五味子乙素),相似度高于0.94。HCA和PCA结果均显示9批样品有聚为四类的趋势,共有峰X1、X2、X3、X13、X17、X19、X21和X30是引起样品间差异的主要化学成分。结论:所优选的提取工艺稳定可行,不同批次五味子提取物的质量一致性较高,但不同样品间仍存在一定差异。

基于网络药理学探究北五味子治疗缺血性脑卒中机制

目的:探究北五味子治疗缺血性脑卒中的有效活性物质和具体机制。方法:通过中药系统药理学技术平台筛选出北五味子的有效活性成分,应用Swiss target prediction数据库获得有效活性物质的作用靶点;通过人类基因数据库和在线人类孟德尔遗传数据库获得缺血性脑卒中的作用靶点;通过韦恩图获得共同靶点,借助String数据库进行蛋白质互作网络的建立;通过DAVID数据库进行基因本体(GO)分析获得生物学过程条目、分子功能条目和细胞组成条目;通过基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,获得北五味子发挥作用的潜在作用机制;通过Cytoscape 3.8.2软件建立北五味子有效成分-靶点-通路网络。结果:北五味子具有7种治疗缺血性脑卒中的有效成分,18个核心靶点;通过GO分析发现北五味子治疗缺血性脑卒中涉及220个生物学过程条目,27个细胞组成条件,34个分子功能条目;通过KEGG通路富集分析发现北五味子发挥治疗缺血性脑卒中涉及到VEGF信号通路、PI3K-Akt信号通路、脂质与动脉粥样硬化通路和TNF信号通路等;北五味子治疗缺血性脑卒中网络涉及到35个节点、184条边,平均相邻节点数目为10.514,网络中心度为0.309。结论:北五味子有效成分、多靶点、多通路起到防治缺血性脑卒中的作用。本次研究预测的北五味子防治缺血性脑卒中潜在机制可为开展实验研究及临床应用提供依据。

五味子乙素预处理对过氧化氢诱导的H9c2细胞焦亡及TXNIP/NLRP3/Caspase-1通路的影响

目的基于硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)/半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)通路观察五味子乙素对过氧化氢(H 2O 2)诱导的大鼠H9c2心肌细胞氧化损伤及焦亡的影响,探讨五味子乙素的心肌保护作用机制。方法体外培养H9c2心肌细胞,实验设4组:正常组细胞常规孵育,五味子乙素组细胞加入40μmol/L五味子乙素孵育24 h,H 2O 2组细胞加入1000μmol/L的H 2O 2孵育30 min,H 2O 2+五味子乙素组细胞加入40μmol/L五味子乙素孵育24 h后再加入H 2O 2孵育30 min。CCK-8法检测细胞活力,DCFH-DA探针检测细胞中活性氧(ROS)含量,试剂盒检测细胞培养上清中乳酸脱氢酶(LDH)含量和细胞中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量,Western blot法检测细胞中TXNIP、硫氧还蛋白(Trx)、NLRP3、裂解的半胱氨酸蛋白酶-1(Cleaved Caspase-1)、消皮素D(GSDMD)-N蛋白表达情况,ELISA法检测细胞培养上清中白细胞介素-18(IL-18)、白细胞介素-1β(IL-1β)含量。结果与正常组比较,H 2O 2组细胞活力明显下降(P<0.05),细胞中ROS、MDA含量和TXNIP、NLRP3、Cleaved Caspase-1、GSDMD-N蛋白相对表达量及细胞培养上清中LDH、IL-1β、IL-18含量均明显升高(P均<0.05),细胞中SOD、GSH-Px含量和Trx蛋白相对表达量均明显降低(P均<0.05);与H 2O 2组比较,H 2O 2+五味子乙素组的细胞活力明显升高(P<0.05),细胞中ROS、MDA含量和TXNIP、NLRP3、Cleaved Caspase-1、GSDMD-N蛋白相对表达量及细胞培养上清中LDH、IL-1β、IL-18含量均明显降低(P均<0.05),细胞中SOD、GSH-Px含量和Trx蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05)。结论五味子乙素可能通过影响TXNIP/NLRP3/Caspase-1通路,从而减轻H 2O 2诱导的H9c2细胞氧化损伤,抑制心肌细胞焦亡。

基于NF-κB/MAPK通路探讨五味子甲素对心肌缺血再灌注损伤大鼠的保护作用

目的:探讨五味子甲素(DSD)对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠的保护作用及其对核因子κB(NF-κB)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路的作用机制。方法:将无特定病原体(SPF)组雄性SD大鼠分为假手术组(仅穿线不结扎,生理盐水灌胃)和造模大鼠(MIRI模型)。将造模成功大鼠随机分为模型组(生理盐水灌胃)、阳性药物组(复方丹参滴丸8.5 mg/kg灌胃)、DSD低剂量组(DSD 20 mg/kg灌胃)、DSD中剂量组(DSD 40 mg/kg灌胃)、DSD高剂量组(DSD 80 mg/kg灌胃),每组20只。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌红蛋白(Mb)和心肌肌钙蛋白I(cTnI);氯化三苯基四氮唑(TTC)测量心肌梗死面积;苏木精-伊红(HE)染色观察心肌组织病理变化;检测心肌组织丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平;酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6);蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测大鼠心肌组织NF-κB/MAPK通路相关蛋白的表达。结果:与假手术组比较,模型组MIRI大鼠心肌组织肌纤维弯曲,肌细胞减少,肿胀明显,细胞核严重固缩,血清CK-MB、Mb、cTnI水平、心肌梗死面积、心肌细胞凋亡率、MDA、TNF-α、IL-6含量及p-NF-κB p65、磷酸化NF-κB抑制蛋白(p-IκBα)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2(p-ERK1/2)、p-p38蛋白水平均升高,SOD活性降低(P<0.05)。与模型组比较,阳性药物组和DSD各剂量组大鼠心肌组织损伤减轻,肌纤维形态完整,肌细胞增加,无明显肿胀,细胞核固缩减轻,血清CK-MB、Mb、cTnI水平、心肌梗死面积、心肌细胞凋亡率、MDA、TNF-α、IL-6含量及p-NF-κB p65、p-IκBα、p-ERK1/2、p-p38蛋白水平均降低,SOD活性升高(P<0.05)。结论:DSD通过抑制NF-κB/MAPK通路,对MIRI大鼠发挥保护作用。

五味子:以一物而兼养五脏

五味子是传统中药材,《新修本草》载“五味皮肉甘酸,核中辛苦,都有咸味”,故有五味子之名。一种药物兼酸、辛、苦、甘、咸5种味道,而酸入肝、辛入肺、苦入心、甘入脾、咸入肾,五味子因此成为能同时补益肝、心、脾、肺、肾五脏的“明星中药”。今天就让我们共同了解一下五味子的神奇功效。

基于《德国药品法典》要求的南五味子质量控制方法研究

目的:依据《德国药品法典》(Deutscher Arzneimittel-Codex,DAC)的相关规定,建立符合DAC要求的南五味子薄层色谱鉴别方法和含量测定方法,并比较DAC与《中华人民共和国药典》(以下简称《中国药典》)2020年版对以上2项内容规定的异同点。方法:采用硅胶GF254薄层色谱板,以乙酸-乙酸乙酯-甲苯(1∶18∶46)为展开剂,以五味子乙素和五味子醇乙为系统适应性测试(SST)指标,以五味子酯甲和五味子甲素为检测指标建立了南五味子的薄层色谱鉴别方法。以HALO Biphenyl色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)为固定相,乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,检测波长为254 nm,流速为0.8 mL·min^(-1),柱温为35℃,以五味子酯甲和五味子酯乙的分离度为SST评价指标考察方法的可行性,建立了南五味子药材中五味子酯甲和五味子甲素的高效液相色谱法(HPLC)含量测定方法。结果:按照DAC相关要求进行了SST考察,结果显示,建立的薄层色谱鉴别方法具有良好的分离能力,可满足南五味子药材薄层色谱鉴别的要求;HPLC测定结果中五味子酯甲和五味子酯乙的分离度均大于3.5,符合SST要求,可用于南五味子含量测定;方法学考察结果均符合含量测定要求;31批五味子药材中五味子酯甲和五味子甲素的质量分数分别为0~0.7611%和0.0109%~0.7909%,且2个成分含量呈正相关。结论:建立的南五味子薄层色谱鉴别方法和HPLC含量测定方法均符合DAC要求,且操作简便、结果准确、重复性好,可用于南五味子的质量控制;在药材的薄层色谱鉴别及含量测定方法方面,DAC与《中国药典》2020年版大致相同,但在SST方面存在差异,应加以重视。

天然产物五味子乙素对口腔癌细胞增殖、凋亡及侵袭的影响

目的 研究天然产物五味子乙素(Schisandrin B,Sch B)对口腔癌细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法 用不同浓度的五味子乙素分别处理口腔癌细胞株SCC15和CAL27细胞24 h和48 h,采用CCK-8法和AnnexinV-FITC/PI双标记流式细胞术,检测五味子乙素对口腔癌细胞增殖及凋亡的影响;采用Transwell实验分别检测五味子乙素对细胞侵袭的影响,采用qRT-PCR和Western Blot检测五味子乙素对Prx1 mRNA与蛋白表达的影响。结果 CCK-8和流式细胞术检测发现五味子乙素明显抑制SCC15和CAL27细胞增殖并促进细胞凋亡,呈时间和剂量依赖性(P<0.05)。Transwell实验结果显示,五味子乙素对侵袭的抑制作用呈时间和剂量依赖性。五味子乙素对Prx1 mRNA的表达无显著影响,但对其蛋白表达有显著的抑制作用(P<0.05)。结论 五味子乙素可能通过调控Prx1蛋白的表达抑制口腔癌细胞的增殖、侵袭,促进细胞凋亡。

五味子木脂素对跑步机睡眠剥夺大鼠警觉性的影响

目的探讨五味子木脂素对跑步机睡眠剥夺大鼠警觉性水平的影响及其可能的神经生物学机制。方法SD雄性大鼠,随机数字表法分为空白组,睡眠剥夺组,五味子木脂素低、中、高剂量组,盐酸托莫西汀组,每组8只。除空白组外,其他各组大鼠均进行跑步机睡眠剥夺,连续3 d。剥夺期间,各个给药组分别灌胃给予相应药物,采用5~9孔测试仪测试各组大鼠的警觉性表现;另取SD雄性大鼠,睡眠剥夺方法造模和给药方法同上,随机数字表法分为空白组、睡眠剥夺组、五味子木脂素组(67.2 mg/kg)和盐酸托莫西汀组,每组10只,采用ELISA技术测定各组大鼠血清中食欲素A的含量;采用免疫荧光、Western blot法观察各组大鼠前额叶皮层(PFC)c-Fos蛋白表达和食欲素受体1、2水平的变化。结果与空白组相比,睡眠剥夺组大鼠警觉性表现的选择准确性显著降低(P<0.001),遗漏反应、遗漏率和平均反应潜伏期均显著升高(P=0.002,P=0.003,P=0.020);与睡眠剥夺组相比,五味子木脂素中、高剂量组和盐酸托莫西汀组均可改善跑步机睡眠剥夺大鼠的警觉性指标,表现为选择准确性提高(P=0.001,P=0.006,P<0.001),遗漏反应(P=0.001,P=0.001,P<0.001)、遗漏率(P=0.001,P=0.002,P<0.001)和平均反应潜伏期(P=0.018,P=0.003,P=0.014)减少。与空白组相比,睡眠剥夺组大鼠血清中的食欲素A含量、PFC脑区c-Fos均显著增加(P均<0.001),食欲素受体1蛋白表达水平显著减少(P=0.037);与睡眠剥夺组相比,五味子木脂素组(67.2 mg/kg)和盐酸托莫西汀组大鼠血清中的食欲素A水平(P=0.005,P=0.029)、PFC脑区c-Fos(P=0.028,P=0.036)均显著降低,食欲素受体1蛋白表达水平显著升高(P=0.043,P=0.013)。结论五味子木脂素可能通过调节食欲素分泌和PFC的食欲素受体1表达发挥拮抗睡眠剥夺所致警觉性水平下降的作用。

辽宁道地药材北五味子的蜜制工艺优化及质量标准评价

目的正交试验优选辽宁道地药材北五味子的蜜制工艺,并对蜜五味子炮制品进行质量标准评价。方法研究收集10个不同厂家生产的共10批生北五味子,采用蜜蒸法炮制蜜五味子,以五味子醇甲的含量作为考察指标,采用正交试验优选蜜五味子的最佳炮制工艺;研究对蜜五味子进行性状、水分、总灰分检查;采用薄层色谱法对蜜五味子进行定性鉴别;采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)对蜜五味子中的五味子醇甲进行含量测定。结果正交试验得出蜜五味子的最佳炮制工艺条件:闷润时间1 h,炼蜜量为每100 kg五味子,用10 kg炼蜜,蜜水比例为1∶2,蒸煮时间为40 min。所得10批蜜五味子均性状较佳;该品含水量为12.95%,总灰分为3.36%,均未超过《中华人民共和国药典》标准的16.0%和7.0%;薄层色谱显示10批蜜五味子样品中五味子醇甲均斑点清晰,分离效果好;HPLC色谱检测得出10批蜜五味子样品中五味子醇甲的含量为0.48%~0.70%,平均值为0.59%,高于《中华人民共和国药典》中的含量限度0.40%。结论研究所得北五味子的蜜制工艺稳定可行,建立的质控标准准确度高、专属性强、重复性好,可作为蜜五味子炮制品的质量评价标准。

五味子酯乙对高脂血症小鼠血脂水平的影响

目的探讨五味子木脂素中的活性成分—五味子酯乙对高脂血症模型小鼠血脂代谢的影响。方法将90只雄性C57BL/6小鼠随机分为6组,每组15只,分别为对照组,模型组,五味子总木脂素组(50 mg/kg),五味子酯乙低(2 mg/kg)、中(4 mg/kg)、高(8 mg/kg)剂量组。除对照组外,其他各组均采用高脂饲料(HFD)饲养12周。第8周灌胃给药,对照组和模型组给予同等体积溶媒,连续4周。给药结束后,取小鼠血液和肝脏,检测体质量、肝脏指数及血清中TG、TC、LDL-C和HDL-C含量,应用HE染色法观察肝脏病理形态变化。结果与对照组比较,模型组小鼠体质量上升趋势显著,肝脏指数增大(P<0.01),血清中TG、TC、LDL-C水平上升(P<0.01),HLD-C水平下降(P<0.01),肝细胞胞质中可见大量大小不一的脂肪空泡,肝索排列紊乱;与模型组比较,给药后各给药组小鼠体质量上升平缓,肝脏指数及TG、TC、LDL-C水平下降(P<0.05或P<0.01),HDL-C水平上升(P<0.05或P<0.01),肝组织HE染色显示脂肪变性好转。结论五味子酯乙可改善高脂血症小鼠血脂紊乱及肝脏脂肪变性。