光谱法研究甲氨喋呤与牛血清白蛋白的相互作用

用荧光和紫外吸收光谱法,研究了抗癌药物甲氨喋呤(MTX)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用。结果表明:在生理条件下,甲氨喋呤对牛血清白蛋白荧光有较强的猝灭作用,其猝灭方式为静态猝灭。根据猝灭结果,求出了不同温度下反应的结合常数及反应热力学参数,并据此确定了它们相互作用的主要形式。

2-{[4-氨基-5-(3,4,5-三甲氧基-苄基)-嘧啶-2-亚胺基]-甲基}-6-甲氧基-苯酚与酵母细胞和牛血清白蛋白的相互作用

用等摩尔的邻香草醛(C8H8O3)与甲氧苄胺嘧啶(C14H18N4O3)反应,合成了一种新的化合物2-{[4-氨基-5-(3,4,5-三甲氧基-苄基)-嘧啶-2-亚胺基]-甲基}-6-甲氧基-苯酚(APYP).通过元素分析、核磁共振、摩尔电导、红外光谱和紫外光谱等手段对其进行了表征,其化学式为C22H24N4O5.采用微量热法测定了APYP在301.15 K时对粟酒裂殖酵母细胞的生长代谢的产热曲线,计算得到了粟酒裂殖酵母细胞生长速率常数k,抑制率I以及半抑制浓度IC50等热动力学参数.实验结果表明,随着APYP浓度的增加,粟酒裂殖酵母细胞的生长代谢速率常数k减小,抑制率I增加,半抑制浓度IC50为123.2 mg/L(或2.96×10-4mol/L),即APYP对粟酒裂殖酵母细胞有抑制作用.同时利用荧光光谱和紫外光谱等方法研究了APYP与牛血清白蛋白(BSA)在接近生理条件下的相互作用,探讨了荧光猝灭机理,计算了反应的结合常数、结合位点、结合距离及热力学参数,研究了APYP与BSA之间的能量转移情况;并通过同步荧光光谱考察了APYP对BSA二级结构的影响.

磺胺二甲氧嘧啶与牛血清白蛋白相互作用的研究

应用荧光光谱法和紫外吸收光谱法研究了在生理条件下(pH=7.4)磺胺二甲氧嘧啶(SDM)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用模式.研究表明,磺胺二甲氧嘧啶对BSA内源性荧光的猝灭属于形成了复合物的单一静态猝灭过程,其猝灭速率常数为7.35×1012L.mol-1.S-1,结合常数为1.04×105L.mol-1,结合位点数为1.03.并考察了金属离子Fe3+、Mn2+、Ca2+、Zn2+、Cu2+存在下,对磺胺二甲氧嘧啶与BSA结合常数的影响.

甲钴胺与牛血清白蛋白相互作用的光谱特性

应用荧光光谱法、紫外吸收光谱法及共振光散射法,研究了甲钴胺(Mecobalamin)与牛血清白蛋白(BSA)之间的相互作用。在pH=7.40的三羟甲基胺基甲烷-盐酸(Tris-HCl)缓冲溶液中,随着甲钴胺浓度的增加,BSA的荧光强度、共振散射光强度逐渐减弱。通过计算不同温度(293,303,310 K)下的猝灭常数(Ksv=5.40×104,6.90×104,8.00×104L/mol)及扫描紫外吸收光谱,确定了甲钴胺对牛血清白蛋白的猝灭机理为动态猝灭。测定了该反应的表观结合常数(KA=1.68×104,4.34×104,7.90×104L/mol)和结合位点数(n≈1)。利用热力学参数(ΔH>0、ΔG<0和ΔS>0)确定了分子间的作用力性质,作用力主要是疏水作用力,作用过程是自发的。同时应用同步荧光技术研究了甲钴胺对BSA构象的影响。结果表明,甲钴胺没有引起BSA构象的变化。

脱镁叶绿酸-a甲酯的合成及对牛血清白蛋白的结合作用

用荧光光谱和UV Vis光谱研究了脱镁叶绿酸a甲酯(Methylpheo phorbide a)与牛血清白蛋白(BovineSeriumAlbumin,BSA)的相互结合反应。实验表明叶绿酸a甲酯与牛血清白蛋白的相互结合作用为单一的静态猝灭过程。在水溶液中脱镁叶绿酸a甲酯发生自聚,它与蛋白质以表观摩尔比2∶1牢固结合,其结合常数KB=6.7×104L·mol-1。而在四氢呋喃与水的混合溶液中脱镁叶绿酸a甲酯以单分子状存在,其与BSA的结合摩尔比为1∶1。BSA分子与叶绿酸a甲酯的结合点位为1。根据F rster非辐射能量转移机理,求算了给体(BSA)与受体(脱镁叶绿酸a甲酯)间距离r=3.50nm和能量转移效率E=0.39。

用荧光和共振光散射光谱研究甲硝唑与牛血清白蛋白的相互作用

用荧光光谱和共振光散射光谱对甲硝唑与牛血清白蛋白的作用进行了对比研究,测定了该反应的结合常数、结合位点数.探讨了甲硝唑对牛血清白蛋白荧光和共振光散射猝灭的机理.利用热力学参数确定了分子间的作用力性质;根据非辐射能量转换机制,确定了甲硝唑-牛血清白蛋白间的结合距离.采用同步荧光技术考察了甲硝唑对牛血清白蛋白构象的影响.

Z／E-焦脱镁叶绿酸-a甲酯13^1-酮肟与牛血清白蛋白的相互结合作用研究

以荧光光谱法和分光光度法研究了水溶液中具有Z 型和E 型结构的焦脱镁叶绿酸a甲酯131 酮肟异构体(Z/E KMPA)与牛血清白蛋白(BovineSerumAlbumin,BSA)的相互结合反应。研究表明,在水溶液中,Z/E KMPA与BSA以摩尔比1∶1牢固结合,其结合常数K0Z=1. 1×105L/mol,K0E=5. 0×105L/mol。根据F rster非辐射能量转移机理,求算了给体(BSA)与受体(Z/E KMPA)间距离rZ=4. 05nm,rE=4. 40nm和能量转移效率EZ=0.175,EE=0. 140。实验表明:Z/E KMPA与BSA的相互结合作用为单一的静态荧光猝灭过程。

用荧光法研究对-二甲氨甲基-杯[8]芳烃与牛血清白蛋白的相互作用

本文研究了对-二甲氨甲基-杯[8]芳烃(CX8)与牛血清白蛋白(BSA)结合反应的荧光光谱和紫外-可见吸收光谱。实验发现CX8对BSA有较强的荧光猝灭作用,且CX8的紫外吸收光谱和BSA的荧光发射光谱有一定程度的重叠;CX8对BSA的猝灭属静态猝灭,疏水作用是两者之间的主要作用。确定了供体-受体间的结合距离r=1.76 nm,能量转移效率E=0.58;得出了结合反应的结合常数、结合位置和结合过程基本热力学性质的变化等。此外,还考察了酸度对BSA和CX8结合反应的影响。

竹红菌甲素与牛血清白蛋白相互作用光谱研究

利用紫外-可见(UV-Vis)吸收光谱和荧光光谱研究在生理pH值条件下,竹红菌甲素(Hypocrellin A,HA)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用。UV-Vis吸收光谱中HA的吸收峰蓝移,表明HA的存在使BSA分子中的氨基酸残基形成氢键。荧光光谱结果表明,BSA的存在对于HA的荧光发射峰具有一定的影响。双分子猝灭速率常数为1.65×1012L·(mol·s)-1,表明HA与BSA相互作用发生在HA与BSA分子外部的氨基酸残基之间,与BSA分子内部结构没有直接的相互作用。

6-甲基-4-(4-甲氧酰基苯基)-5-甲氧羰基-3,4-二氢嘧啶-2-酮的合成及与牛血清白蛋白的相互作用

合成并表征了6-甲基-4-(4-甲氧酰基苯基)-5-甲氧羰基-3,4-二氢嘧啶-2-酮,利用荧光光谱法和紫外光谱法研究了该化合物与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用。结果表明,化合物对BSA内源荧光的猝灭为静态猝灭;化合物与BSA的结合常数(Ka)和结合位点数(n)在298 K时分别是7.043 7×102L/mol和0.970 3,化合物与BSA以接近1∶1(物质的量比)的比例生成基态复合物;热力学数据表明化合物与BSA主要以疏水作用力相结合(ΔH>0,ΔS>0,ΔG<0);结合距离(r)为3.49 nm,表明化合物与BSA分子之间发生了非辐射能量转移。

去甲去氢斑蝥素缩氨基硫脲的合成及与牛血清白蛋白的作用

基于去甲斑蝥素和氨基硫脲的抗肿瘤及抗癌活性,设计合成了新型化合物——去甲去氢斑蝥素缩氨基硫脲（DNCT）,并采用荧光光谱法和紫外可见吸收光谱法研究了去甲去氢斑蝥素缩氨基硫脲与牛血清白蛋白（BSA）的相互作用。研究结果表明,DNCT对BSA的荧光猝灭机理为静态猝灭;在25、30、37℃下,DNCT与BSA的结合常数分别为1.43×10^5、6.56×10^4、3.68×10^4L/mol,结合位点数分别为1.09、1.02、0.97,结合距离为2.97 nm（25℃）。热力学研究发现,DNCT与BSA主要是通过疏水作用结合。同步荧光显示,DNCT对BSA构象有一定的影响。

N-十六烷基-羟乙基-二甲基溴化铵与牛血清白蛋白的结合作用

用荧光光谱法研究了298K时Tris-HC l缓冲溶液(pH=7.1)中季铵盐类表面活性剂N-十六烷基-羟乙基-二甲溴化铵(CHDAB)与牛血清白蛋白(BSA)的结合作用.考察了BSA浓度对结合作用的影响,用Stern-Volmer方程探讨了CHDAB在浓度较低区域与BSA的作用机制,用位点结合模型计算了CHDAB与BSA结合反应的结合常数KA和结合位点数n,用同步荧光技术考察了CHDAB对BSA构象的影响.结果表明:CHDAB对BSA的内源荧光有猝灭作用,并导致其最大发射波长蓝移;相同温度下,BSA浓度越小,其Stern-Volmer猝灭常数Ksv越大,CHDAB对BSA的猝灭作用越强,同时其结合常数也越大,结合越强;同步荧光光谱表明CHDAB对BSA构象产生了一定影响.

以1-酮-2-(对二甲氨基苯亚甲基)-四氢萘与β-环糊精的包合物为荧光探针测定牛血清白蛋白

基于一种分子内电荷转移(ICT)化合物,1-酮-2-(对二甲氨基苯亚甲基)-四氢萘(KDTN)与β环糊精(β-CD)所生成的包合物和牛血清白蛋白(BSA)形成三元超分子体系产生的荧光,且其荧光强度与BSA的质量浓度在3.31~662mg·L-1范围内呈线性关系,检出限(3S/N)为1.6mg·L-1,提出了以KDTN与β-CD包合物为新的荧光探针的荧光光谱法测定BSA含量。该反应体系的荧光发射峰位于540nm,测定在pH 9.18的B-R缓冲介质中进行。用标准加入法进行回收试验,测得平均回收率为99.4%,测定值的相对标准偏差(n=11)为2.2%。

甲硝唑与牛血清白蛋白相互作用的热力学特征研究

在模拟人体生理条件下,用荧光猝灭光谱、同步荧光光谱和紫外可见吸收光谱等,研究了25℃、31℃和38℃下甲硝唑(MET)与牛血清白蛋白(BSA)相互作用的热力学特征。采用Stern-Vol mer方程、Lineweaver-Burk双倒数方程和热力学方程等分析实验数据,得到了相互作用常数KLB的平均值为3.116×104L.mol-1,热力学参数ΔHθ、ΔGθ和ΔSθ的平均值分别为-1.259 kJ.mol-1、-25.73 kJ.mol-1和80.47 J.K-1,结合位点数的平均值为1.086;实验表明,MET与BSA可结合形成具有一定结构的复合物,其荧光猝灭作用更符合静态猝灭作用特征,主要作用力可能是静电力。为研究MET的治病机制、生物学效应和生态环境效应等提供了重要信息。

甲啶铂与牛血清白蛋白相互作用的荧光光谱研究

用稳态荧光光谱及时间分辨荧光技术研究水溶液中甲啶铂与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用。加入甲啶铂后,BSA荧光发射峰从335 nm红移到337.5 nm,并伴随着荧光强度的猝灭,表明甲啶铂与BSA发生了相互作用;单指数拟合得到的荧光寿命结果证实,甲啶铂对BSA的猝灭为静态猝灭;荧光寿命的双指数拟合结果表明,BSA的内在荧光主要是由第212位和第134位的色氨酸残基贡献的,BSA中第212位色氨酸残基和苯丙氨酸残基可能是甲啶铂的靶向目标。

同步荧光光谱法结合分子对接研究甲氧苄啶与牛血清白蛋白的相互作用

利用荧光光谱法和紫外分光光度法在模拟生理条件下研究牛血清白蛋白(BSA)和甲氧苄啶(TMP)的相互作用,应用Stern-Volmer方程、Lineweaver-Burk双倒数方程及Förster非辐射能量转移理论,计算获得3个不同温度下的猝灭常数(K_(SV))、结合常数(K_(q))、结合距离(r)及热力学常数(ΔH,ΔG,ΔS)等参数。结果表明:3个不同温度下,BSA和TMP均能发生反应生成络合物,属于静态猝灭;结合距离小于7 nm;同步荧光光谱显示TMP对BSA的构象产生影响,主要是对其中酪氨酸残基的影响更为显著,紫外吸收光谱中BSA的最大吸收峰向较短波长偏移,表明BSA与TMP分子之间形成了基态配合物;圆二色谱显示TMP主要结合在BSA的主要多肽链的氨基酸残基上;分子对接结果表明TMP和BSA之间结合的主要作用力是疏水作用力和π-π作用。

1-吲哚基苯基甲酮的合成及其与牛血清白蛋白相互作用的荧光分析

合成1-吲哚基苯基甲酮,并对其进行了红外光谱、质谱和核磁共振表征,通过荧光光谱法、紫外光谱法研究该药物分子与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用。实验结果显示,在309K时,1-吲哚基苯基甲酮与牛血清蛋白(BSA)的猝灭速率常数Kq=1.771×10^(12) L·mol^(-1)·s^(-1),结合常数Ka=3.726 5×10~3 L/mol,结合位点数n=0.884 0,ΔH=2.01kJ/mol,ΔS=36.19J·mol^(-1)·K^(-1)。结果表明:1-吲哚基苯基甲酮对BSA具有荧光猝灭作用,该药物分子与BSA的主要作用力是疏水作用力(ΔH>0,ΔS>0)。

含有甲氨喋呤的牛血清白蛋白微球——Ⅱ.肺部荷S180小鼠的治疗

报道了经小鼠静脉注射甲氨喋呤微球剂和溶液剂后，肺组织中甲氨喋呤浓度随时间的变化。同时对照了两种制剂对小鼠肺部S180的治疗作用。结果发现微球组肺中药－时曲线下面积为溶液组的7倍，并且微球组对小鼠肺部S180细胞的抑制作用明显比溶液组为好。

五味子甲素与BSA的相互作用

目的在模拟人体生理条件下,研究金属离子对五味子甲素与牛血清白蛋白(BSA)之间结合作用的影响。方法采用紫外吸收光谱法,通过紫外扫描得到五味子甲素与BSA的紫外吸收图谱,利用Lineweaver-Burk双倒数曲线图得出五味子甲素与BSA的结合常数;由摩尔比法确定Mg2+等7种金属离子与五味子甲素结合的摩尔比;分别测定五味子甲素-金属离子-BSA的结合常数。结果五味子甲素与BSA的结合常数为1.141×104L/mol,金属离子与五味子甲素结合的摩尔比为1∶1,在Fe3+、Zn2+、Al3+、Cu2+、Mg2+、Co2+、Ni2+存在下,五味子甲素与BSA的结合常数分别为3.041×104,1.617×104,1.819×104,1.781×104,1.277×103,7.107×103,6.238×103L/mol。结论 Fe3+、Zn2+、Al3+、Cu2+参与加强了五味子甲素与BSA的结合作用,Mg2+、Co2+、Ni2+的存在使二者结合作用减弱。

甲砜霉素与牛血清白蛋白相互作用的热力学研究

采用荧光光谱法研究温度对甲砜霉素(Tap)与牛血清白蛋白(BSA)相互作用的机制的影响,结果表明Tap与BSA相互作用的猝灭机制均为静态猝灭;分别计算得出对应温度下Tap与BSA的结合位点和结合常数,通过对热力学参数求解,得出Tap与BSA之间的作用力为氢键与范德华力;利用同步荧光光谱法证明了Tap对BSA的构像有影响.