高效液相色谱法测定五灵颗粒中芍药苷的含量

对五灵颗粒中芍药苷的含量进行测定 .采用KromacilODSC1 8(2 5 0mm× 4 6mm)为固定相 ,甲醇 水 (2 5∶75 )为流动相 ,检测波长为 2 30nm ,柱温为 2 5℃ .该法的RSD为 1 71 % (n =5 ) ,平均回收率为 1 0 0 0 % .

高效液相色谱法测定五灵颗粒中芍药苷的含量

采用反相高效液相色谱法,研究并建立一种可测定五灵颗粒中芍药苷含量的方法;色谱柱:phenomenex(4.6mm×250mm,5μm);流动相:甲醇-水(25:75);流速:1.0mL·min-1;检测波长:230nm;外标法定量;结果芍药苷在0.0225-0.3375μg范围内线性关系良好(γ=0.9999);平均回收率为102.50%,峰面积(RSD)为1.42%(n=9);此方法准确、快速、简便、可行、阴性无干扰、重复性好、专一性强,可用于五灵颗粒中芍药苷的含量测定。

灵五颗粒对D-半乳糖胺盐酸盐致小鼠肝损伤的保护作用

目的观察灵五颗粒对D-半乳糖胺盐酸盐致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法将180只小鼠随机分为正常组、D-半乳糖胺盐酸盐模型组、灵五颗粒低、中、高(2.5、5.0、10g/kg)剂量组和阳性药联苯双酯(150mg/kg)组。除正常组、D-半乳糖胺盐酸盐模型组给予与灵五颗粒高剂量同等剂量的生理氯化钠溶液外,给药各组均分别给药7d,于末次给药1h后,以D-半乳糖胺盐酸盐(800mg/kg)给予各组小鼠(正常组除外)腹腔注射中毒,造成急性肝损伤,在中毒后12h各给药组再给药1次,于中毒24h杀鼠取血和肝脏,分别检测各组动物肝功能等指标,并取肝脏作病理组织学检查。结果 D-半乳糖胺盐酸盐模型组小鼠肝功能明显异常,谷丙转氨酶、谷草转氨酶显著升高,肝组织变性、坏死严重;灵五颗粒中、高剂量组小鼠血清中谷丙转氨酶的水平均非常显著低于模型组,并呈良好的剂量依赖性。灵五颗粒高剂量组小鼠血清中谷草转氨酶的水平显著低于模型组,此外,还可显著降低损伤小鼠丙二醛的含量,显著升高其超氧化物歧化酶活力。结论灵五颗粒对D-半乳糖胺盐酸盐致小鼠急性肝损伤有明显的保护作用。

灵五颗粒对刀豆蛋白A所致小鼠免疫肝损伤的保护作用

目的观察灵五颗粒对刀豆蛋白A所致小鼠免疫性肝损伤的保护作用。方法采用尾静脉注射刀豆蛋白A致小鼠肝损伤模型。60只小鼠随机分为正常组、刀豆蛋白A模型组、灵五颗粒低、中、高(2.5、5、10 g/kg)剂量组和阳性药联苯双酯(0.15 g/kg)组。各组动物连续灌胃给药5、7 d后,尾静脉注射刀豆蛋白A(20 mg/kg)。实验结束测定各组动物血清中ALT、AST等指标;称取肝、脾、胸腺重量,计算脏器指数;检测肝组织中MDA、SOD、NO、GSH的活性变化,并观察肝脏病理学改变。结果灵五颗粒各剂量组能明显减轻肝、脾肿大,增大胸腺重量,尤以高剂量组最为明显;显著降低小鼠血清中ALT、AST活性,降低肝内MDA、NO含量和升高SOD、GSH活性;病理结果表明,与模型组比较,灵五颗粒中、高剂量治疗组能明显减轻免疫性小鼠肝损伤的损伤程度。结论灵五颗粒对刀豆蛋白A诱导小鼠免疫性肝损伤具有较好的保护作用,有明显降酶效果,其作用机制可能与其抗氧化损伤有关。

灵五颗粒对四氯化碳诱导大鼠慢性肝损伤的影响

目的研究灵五颗粒对四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)致大鼠慢性肝损伤的防治作用,并探讨其可能的作用机制。方法将Wistar大鼠随机分为6组,正常组自由饮水,其余5组给予350 mg.L-1苯巴比妥水溶液2周诱导肝药酶。实验第3周,用CCl4复制慢性肝损伤动物模型[50%CCl4橄榄油溶液,灌胃,首次剂量0.08 mL,以后按0.08 mL.(100 g)-1,每周1次,连续5周]。自造模之日开始,灌胃给药,qd,连续5周。末次给药后禁食16 h,取大鼠血、肝脏、脾、胸腺,检测血清肝功能[丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT),天冬氨酸氨基转移酶(aspartateaminotransferase,AST),碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、清蛋白(albumin,ALB)、总蛋白(total protein,TP)]指标、肝组织中羟脯氨酸(hydroxyproline,Hyp)、丙二醛(malonaldehyde,MDA)含量和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性,另取肝脏做病理组织学检查,计算脏器指数。结果模型组大鼠有明显肝损伤表现,各给药组肝损伤均有不同程度的改善(P<0.01或P<0.05)。病理组织学检查结果表明,肝脏病变程度均较模型组明显减轻。结论灵五颗粒对CCl4所致慢性肝损伤具有较好的防治作用,保肝降酶效果明显,其机制可能与抑制Hyp增多,降低MDA和升高SOD的抗氧化作用有关。

灵五颗粒利胆作用的实验研究

目的实验观察灵五颗粒对健康Wistar大鼠的利胆效果。方法 40只Wistar大鼠随机分为生理氯化钠溶液组、阳性药熊去氧胆酸对照（0.63 g/kg）组、灵五颗粒低、中、高（1.75、3.5、7.0 g/kg）剂量组,每组8只。麻醉状态下手术暴露胆总管,插入导管,引流胆汁,给药前30 min收集记录各组胆汁流量。采用十二指肠方法给药,分别在给药后0~30、30~60、60~90 min收集记录各组胆汁量,并分析胆汁中胆红素、胆固醇、总胆汁酸的含量。结果灵五颗粒各剂量组给药后,各时间段上的胆汁流量均比生理氯化钠溶液组明显增加,尤其在60 min时胆汁量最多,持续至90 min仍有明显的增加,优于阳性对照药组。熊去氧胆酸组和灵五颗粒高、中、低剂量组,在给药后各时间均能增加胆汁中的总胆红素、胆固醇的含量,降低总胆汁酸的含量,与生理氯化钠溶液组相比,具有非常显著性差异。结论灵五颗粒对大鼠确有较强的利胆作用,并能明显增加排出的胆汁中胆红素、胆固醇含量,降低总胆汁酸的含量。

灵五颗粒保肝退黄降酶作用研究

目的观察灵五颗粒对α-萘异硫氰酸酯(α-naphthylisothiocyanate,ANIT)致黄疸型肝损伤模型小鼠的保护作用及作用机制。方法小鼠随机分为正常组,模型组,灵五颗粒低、中、高剂量组(2.5,5.0,10 g.kg-1)和阳性对照组(茵栀黄颗粒2.34 g.kg-1)。正常组和模型组给予0.9%氯化钠溶液,其余各组连续灌胃给药7 d。除正常组外,其他各组末次给药1 h后灌服ANIT,105 mg.kg-1,制备小鼠肝损伤黄疸模型。48 h后取血、肝脏,分别测定血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、总胆红素(total bilirubin,T-BiL),肝脏组织中丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)等,并检查肝脏病理学。结果与正常组比较,模型组小鼠血清T-BiL、ALT、AST含量明显升高。灵五颗粒中、高剂量组小鼠血清T-BiL、ALT、AST含量均降低,并呈剂量依赖关系;与模型组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。LW中、高剂量组也能显著降低受损肝组织中MDA含量,同时升高SOD、GSH活性。结论灵五颗粒对ANIT所致小鼠黄疸型肝损伤具有保护作用,退黄降酶效果明显,其作用机制可能与抗氧化作用有关。

灵五颗粒对四氯化碳致小鼠肝损伤的保护作用

目的观察灵五颗粒对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法 108只小鼠随机分为正常组、四氯化碳模型组、灵五颗粒低、中、高(2.5、5.0、10 g/kg)剂量组和阳性药联苯双酯(0.15 g/kg)组。除正常组、四氯化碳模型组给予生理氯化钠溶液外,给药各组均分别给药7 d,于末次给药1 h后,各组小鼠(正常组除外)分别腹腔注射0.12%四氯化碳橄榄油溶液,造成急性肝损伤,在中毒后16 h取血和肝脏,分别检测各组动物肝功能等指标,并做肝脏病理组织学检查。结果四氯化碳模型组小鼠肝功能明显异常,谷丙转氨酶、谷草转氨酶显著升高,病理性观察肝组织变性、坏死严重;肝、脾肿大明显。灵五颗粒中、高剂量组小鼠血清中谷丙转氨酶的水平均非常显著低于模型组,并呈良好的剂量依赖性。高剂量组小鼠血清中谷草转氨酶的水平显著低于模型组,并显著降低肝损伤小鼠血清丙二醛的含量,显著升高超氧化物歧化酶活力和谷胱甘肽含量。结论灵五颗粒对四氯化碳致小鼠急性肝损伤有明显的保护作用,其作用机制可能与清除过氧化产物丙二醛,升高超氧化物歧化酶活力有关。

灵五颗粒质量标准的研究

目的建立灵五颗粒的质量标准。方法采用TLC法对灵五颗粒中的灵芝、五味子、柴胡进行定性鉴别;采用HPLC法测定该制剂中五味子醇甲的含量,色谱柱为Agilent HC-C18(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-水(52∶48);检测波长:250 nm;柱温:40℃;结果 TLC法可鉴别出该制剂中的灵芝、五味子、柴胡,薄层色谱斑点清晰,无干扰。五味子醇甲在0.049 36～1.234 mg范围内与峰面积线性关系良好(r=1);样品的平均加样回收率为99.41%,RSD为1.40%(n=6)。结论此方法简便、准确、重复性好,能有效的控制灵五颗粒的质量。