井冈霉素A对水稻纹枯病菌的毒力和作用机理研究

根据水稻纹枯病菌 Rhizoctonia solani AG- 1IA在含系列浓度井冈霉素 A马铃薯葡萄糖琼脂培养基 (PDA)上的菌丝生长速率 ,计算出药剂的毒力回归方程为 :Y=3.2 30 9+0 .872 0 X,r=0 .9910 ,药剂的 EC50 =10 6 .9μg/ m L,EC75=6 34.5 μg/ m L。在含 5 0 0 μg/ m L井冈霉素 A的 PDA上水稻纹枯病菌的菌丝生长抑制率为 74 .1% ,而田间水稻植株上人工接菌的药效试验结果表明 ,5 0 μg/ m L药液喷洒后 7d和 14 d的防效即可分别达到 77.4 %和 76 .7% ,即药剂在 PDA平板上的理论抑制作用仅是田间活体植株上对病菌实际作用效果的 1/ 10。比较室内毒力和田间药效试验的结果可以看出 ,井冈霉素 A具有对病原菌和寄主植物双重作用的特性。研究首次发现 ,在室内培养基上不能有效抑制病菌生长的 1μg/ m L的井冈霉素 A可以在水稻植株未喷药部位产生防御水稻纹枯病的作用 ,且能够持续诱导植物防御反应相关酶——过氧化物酶 (PO)和苯丙氨酸解氨酶 (PAL)的活性增高 ,表明该药剂可以激发水稻抗性防卫反应的表达。

井冈霉素A处理珊西烟后对TMV枯斑数目和抗性相关酶的影响

1μg/ m L 井冈霉素 A处理珊西烟 1d、6 d、9d后接种烟草花叶病毒 TMV,在同株上的药剂处理叶片 (叶位 6 )和药剂未处理叶片(叶位 7、8、9)上的枯斑数目均比清水对照处理相同叶位叶片上的枯斑数目显著减少 ,之间的差异分别达到 0 .0 1和 0 .0 5的显著水平 (t测验 )。对 1μg/ m L井冈霉素 A处理后的珊西烟不同叶位叶片进行几丁质酶和β- 1,3-葡聚糖酶的活性测定 ,结果表明这两种酶的活性在药剂涂抹后 1d、6 d和 9d的处理叶片与未处理叶片均比清水对照植株相同叶位叶片有明显的增加 ,并与井冈霉素 A处理后相同叶位的 TMV枯斑数目减少的结果似呈负相关关系。本研究结果初步表明井冈霉素 A具有一定诱导植株产生系统抗病毒的作用 ,为今后扩大该抗生素的应用范围和深入探索其作用机理提供了依据和新的线索。

高效液相色谱-串联质谱法测定稻米和稻壳中井冈霉素A的残留

本文建立了稻米和稻壳中井冈霉素A的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)分析方法。样品用甲醇-水(9+1)涡旋提取,过滤膜后进行HPLC-MS/MS分析。用多反应监测技术确定井冈霉素A的两对离子对m/z498.2/178.1、m/z498.2/336.1为定性离子对,m/z498.2/178.1为定量离子对。方法的线性范围为0.005～0.2mg/L,其中稻壳的线性相关系数为0.9993,稻米的线性相关系数为0.9988。稻米、稻壳的0.05、0.1、0.5 mg/kg三个浓度的添加回收率为71.6%～88.8%,相对标准偏差(RSD)为1.89%～8.16%。方法的定量限(LOQ)为5μg/kg。

井冈霉素A的反相高效液相色谱分析

建立了一种用反相高效液相色谱测定井冈霉素A的定量分析方法。使用新型Venusil HILIC液相色谱柱,以乙腈与水不同比例进行梯度洗脱,流速1.0mL/min,紫外检测波长为210nm。该方法的标准偏差为0.24,变异系数为0.42%,回收率在96.5%～101.8%之间,线性相关系数为0.9987。该方法简便、快速、准确、精密,适用于井冈霉素A的定量分析。

3%井冈霉素A·(2亿芽胞/毫升)多粘类芽胞杆菌水剂防治水稻纹枯病试验（英文）

以3%井冈霉素A·(2亿芽胞/毫升)多粘类芽胞杆菌水剂为供试药剂,通过田间试验研究不同剂量、不同施药时期对水稻纹枯病的防治效果。2年试验结果表明,当用药量在45~90 g.a.i/hm^2时,药后20 d,发病初期(即病株率在5%以下)预先防治的田间防效达80.38%~89.06%,而发病期(即病株率在10%以上)施药的田间防效仅达41.12%~53.26%;在发病初期预先防治效果要明显优于发病期再施药,从而确定该药剂防治水稻纹枯病时期应适当前移。

使用大米粉液化糖化液发酵井冈霉素A

研究了利用大米粉液化糖化液代替大米粉和葡萄糖培养基进行井冈霉素A的发酵 ,结果表明 :当培养基中大米粉液化液浓度为 2 5 % ,或者大米粉糖化液浓度为 30 %时 ,井冈霉素A的发酵效价在摇瓶上达到 15 70 0 μg/ml,在 5L发酵罐上达到 170 0 0 μg/ml。

N^+注入诱变选育井冈霉素A高产菌的研究

以一株井冈霉素生产菌株吸水链霉菌井冈变种(Streptomyces hyroscopicus var.Jingganggensis yen)SHJ001为出发菌株,经能量10 keV,剂量80×2.6×10^(13)ion/cm^2氮离子注入诱变,摇瓶筛选得到一株高产菌株SHJ381,其有效成分井冈霉素A(VAL-A)含量比出发菌株提高了13%。高产菌株具有良好的遗传稳定性。通过正交设计优化发酵培养基后,井冈霉素A含量由24 823 mg/L提高到34 488 mg/L,增加了38%。通过菌种选育和发酵优化,发酵液中VAL-A含量较最初提升了约56%,具有显著的增产效果。

柱前衍生化毛细管气相色谱法测定土壤中井冈霉素A残留

建立了土壤中井冈霉素A残留的柱前衍生化气相色谱分析方法。每10g土壤样品使用40mL10％氨水振荡提取60min，不需要其它净化处理。浓缩吹干后采用N，O-双（三甲基硅烷基）乙酰胺（BSA）对井冈霉素A衍生化反应并进行毛细管气相色谱（FID）分析。井冈霉素A衍生物在4．4～71mg／L范围内呈良好的线性关系（r=0．9983）；方法的添加回收率在94．8％～101．6％之间；相对标准偏差为1．1％～2．9％；方法的最小检出浓度为0．20mg／kg。

2％苯醚甲环唑·井冈霉素A可湿性粉剂防治水稻稻瘟病田间药效试验

为了有效防治水稻稻瘟病进行了田间试验。研究表日月．12％苯醚甲环唑·井冈霉素A可湿性粉剂对水稻稻瘟病有较好的防治效果。施药后病情发展缓慢，发病初期及时施药病情能够基本得到控制。推荐剂量为30-40g/亩，连续使用2-3次，每次间隔7天。

杭白菊中井冈霉素A的固相萃取

建立杭白菊中井冈霉素A的固相萃取的方法。比较不同溶剂对目标农药的提取效率,其中采用甲醇-水(8∶2)提取时,井冈霉素A的平均回收率最好,平均回收率在89.53%-93.73%。比较不同萃取方式的净化效率,其中用C18-HLB串联小柱固相萃取井冈霉素A的回收率效果最好,为89.43%-92.60%。选择0.5 m L乙腈进行洗脱,发现第3次洗脱后回收率稳定,在90.05%-98.04%。用建立的方法对胎菊和朵菊样品进行添加回收率试验,杭白菊鲜样及干样中井冈霉素A的添加回收率在83.02%-89.93%之间,相对标准偏差(RSD)为0.57%-2.95%。

24%井冈霉素A水剂防治水稻纹枯病试验简报

为了解24%井冈霉素A水剂对水稻纹枯病的防治效果及其适宜剂量,特开展了相关试验。结果表明,每667m^2用24%井冈霉素A水剂30、40mL对水稻纹枯病有较明显的防治效果,第2次用药后7d的防效分别为75.01%、79.18%,该药剂在生产上防治水稻纹枯病应在发病初期用药,宜连续防治2~3次,间隔期7~10d。

柱前衍生化-毛细管气相色谱法分析井冈霉素A含量

建立了以N，O-双（三甲基硅烷基）乙酰胺（BSA）作衍生化试剂，对井冈霉素A进行气相色谱-FID分析的方法，采用HP-5 MS毛细管色谱柱，进样口温度240℃，检测器温度280℃，采用外标法对井冈霉素原药定量分析，衍生物在4．4-71mg／L范围内呈良好的线性关系（r^2为0．9983）。仪器最低检出质量浓度为4．4mg／L，该方法变异系数为0．29％，回收率为98．46％-101．32％。

24%井冈霉素A AS(菌刀)防治水稻纹枯病田间药效试验

鉴于近年来宿松县水稻纹枯病严重发生的情况,为筛选防治纹枯病的新型环保高效药剂,对武汉科诺生物科技股份有限公司生产的24%井冈霉素A AS(菌刀)防治效果进行了大田试验。结果表明,24%井冈霉素A AS(菌刀)是防治水稻纹枯病的理想药剂,用量450g/hm2处理药后15d防效达71.94%,防效较高,且对稻曲病有一定的兼治作用,对稻田天敌无不良影响,可以在水稻生产上大面积推广应用。

Streptomyces hygroscopicus K2509利用离子交换废水制备培养基发酵生产井冈霉素A

本文筛选出一株对离子交换废水耐受性能较好的井冈霉素A发酵菌株Streptomyces hygroscopicus K2509。通过测定总糖、还原糖、发酵液电容、井冈霉素A产量等发酵参数,用摇瓶试验对比了S.hygroscopicus K2509和出发菌株S.hygroscopicus K18的差异,用15L罐试验验证了两菌株在离子交换废水配制培养基中的代谢特性。在摇瓶实验中,S.hygroscopicus K2509井冈霉素A产量低于出发菌株,但其表现出较好的离子交换废水耐受能力;在15L发酵罐实验中,S.hygroscopicus K18和K2509井冈霉素A产量分别为18.9和20.2g/L,产率分别为0.45和0.31g/L·h。新筛选菌株可在离子交换废水配制培养基中实现井冈霉素A正常发酵,可有效利用井冈霉素A提取工序所产生的废水,降低产品成本。

井冈霉素A对枯草芽胞杆菌R31生长和生物被膜形成的影响

测定了井冈霉素A对枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)R31游离生长和生物膜形成的影响,并初步探索了井冈霉素A对枯草芽胞杆菌R31游离生长的影响可能机制,为进一步促进井冈霉素A和枯草芽胞杆菌复配提高防效和扩大防治对象提供依据。分别将不同浓度的井冈霉素A标准品、60%井冈霉素A加入枯草芽胞杆菌R31的培养液中,通过结晶紫染色的方法观察和测定其对R31生物被膜形成的影响;通过测定培养液OD值分别检验了井冈霉素A对R31游离生长的影响及海藻糖对井冈霉素A抑制的缓解作用。结果表明,不同浓度的井冈霉素A标准品和60%井冈霉素A能够促进R31生物被膜的形成,但对摇瓶中游离生长的R31表现出先抑制后促进现象,此现象与R31胞外多糖的产生无关;加入海藻糖后可以减轻抑制。可以利用井冈霉素A促进R31生物被膜形成的特点制备复配型生物农药,扩大防治对象和增加田间防效。

6%井冈霉素A·蛇床子素可湿性粉剂防治水稻纹枯病试验

试验了6%井冈霉素A.蛇床子素可湿性粉剂等4种不同药剂或不同浓度的处理对水稻纹枯病的防治效果。结果表明,6%井冈霉素A.蛇床子素可湿性粉剂对水稻纹枯病防效十分显著,浓度60 g/667 m2的防效达86.11%,适合在水稻生产上推广应用。

井冈霉素A在玉米幼苗中的吸收机理初探

为探明井冈霉素A在玉米幼苗中的吸收机理,通过把药液喷施在玉米叶片上,采用HPLC-MS/MS检测玉米基部茎中井冈霉素A含量,研究了pH、温度、底物浓度及抑制剂对玉米幼苗吸收井冈霉素A的影响。结果表明:井冈霉素A能被玉米幼苗吸收,并能向下转运至基部茎;玉米幼苗对井冈霉素A的吸收符合酶促反应动力学模型,其动力学参数为:Km=0.001mmol/L,Vmax=0.04 mmol/(L/h)。温度对吸收的影响显著,24℃井冈霉素A吸收量是453.47μg/L,4℃仅为155.31μg/L;在pH=5时的吸收量是pH=9时的3倍;能量抑制剂二硝基苯酚(DNP)、羰基氰化物间氯苯腙(CCCP)对玉米叶片吸收井冈霉素A的抑制率分别为35.13%、60.25%;单糖转运蛋白竞争性底物根皮苷、D-葡萄糖对玉米叶片吸收井冈霉素A的抑制作用显著,抑制率分别达66.87%、42.26%,推测单糖转运蛋白介导了玉米幼苗对井冈霉素A的主动吸收过程。该结果为井冈霉素A防治作物病害提供科学依据,及后续靶向性农药分子的设计提供信息支撑。

24%井冈霉素A水剂(菌刀)防治水稻稻曲病药效试验报告

24%井冈霉素A水剂(菌刀)用于防治水稻稻曲病,当用量为30ml/667m2时,病穗率防效和病指防效均达85%以上,且增产效果明显,最高增量73kg/667m2,增幅为10.7%,可大面积推广应用。

井冈霉素A与棘孢木霉联合使用可以显著提高对玉米纹枯病的防治效果

玉米纹枯病逐渐发展为制约我国玉米持续增产的主要病害,井冈霉素A与生防菌木霉均对纹枯病菌具有抗性,但二者各有优缺点.

24%井冈霉素A水剂(菌刀)

菌刀去除了井冈霉素中无效和低效的组分、大量葡萄糖和杂质,大大提高了病原菌对井冈霉素A 的吸收,超越并颠覆了传统井冈霉素的功效界限。本品高效、低毒、环保、无抗性,对纹枯病、稻曲病的防治速效性更好、持效期更长,并且对稻瘟病也有很好的抑制作用;对蔬菜、瓜果等经济作物上的真菌性病害也有较好的防治效果。