响应曲面法验证淀粉酶检测程序最适pH值、Cl^-和EPS浓度

目的证明响应曲面法(RSM)是确认淀粉酶(AMY)参考测量程序最佳测量条件的方法。方法采用单因素方差分析研究pH值、氯离子(Cl-)、亚乙基-P-硝基苯-D-麦芽七糖苷(EPS)浓度对AMY活性的影响是否具有统计学意义。采用Box-Behnken试验设计,在实验室条件下研究pH值(6.9~7.1)、Cl-(50~90 mmol/L)和EPS浓度(4.5~5.5 mmol/L)对AMY活性的联合效应,建立pH值、Cl-和EPS对AMY活性影响的定量关系模型,优化得出pH值、Cl-和EPS的最佳组合。结果 pH值、Cl-和EPS对AMY活性影响有统计学意义(P<0.05);pH值、Cl-和EPS对AMY活性影响的一次、二次效应均有统计学意义(P<0.01),Cl-和EPS交互作用有统计学意义(P<0.05)。AMY最优条件:pH值7.02、Cl-72.79 mmol/L、EPS 5.07 mmol/L。结论所得pH值、Cl-和EPS的最佳测量条件与国际临床化学和检验医学联合会(IFCC)推荐条件无差异,RSM可以作为确认参考测量程序最佳测量条件的方法。