荧光能量转移法测定病毒灭活血袋中的亚甲蓝释放量

目的建立一种简单、经济、快捷的方法,用于测定病毒灭活血袋中的亚甲蓝(MB)释放量。方法利用MB与牛血清白蛋白稳定的金纳米团簇(BSA-AuNCs)建立荧光能量转移体系,通过不同浓度MB对BSA-AuNCs荧光的猝灭程度建立MB测定的标准曲线,以此实现病毒灭活血袋中MB释放量的测定。结果当荧光发射波长为620nm左右,MB浓度(c_(MB))在(0.9-36)μmoL/L时,c_(MB)与BSA-AuNCs荧光的猝灭程度呈良好的线性关系,线性关系为(I_(0)-I)/I_(0)=0.018c_(MB)+0.021(r=0.996);利用本法测定MB浓度,回收率为(98.00-101.95)%;利用本法测定高、中、低3个浓度的MB,日内变异系数分别为0.73%、0.81%与0.77%,日间变异系数分别为3.92%、3.81%与4.73%;利用本法测定病毒灭活血袋中的亚甲蓝释放量,测得的结果与使用固相萃取-分光光度法测得的结果无差异(P>0.05)。结论利用荧光能量转移法可以实现病毒灭活血袋中MB释放量的简单、快速测定,得到的结果准确、可靠。