Bacillus sp.C62的砷氧化功能及亚砷酸盐氧化酶活力测定

微生物对于降低环境中的砷毒性具有重要作用。从高砷土壤中筛选出耐砷菌株C62,通过生理生化特征和16SrRNA基因序列同源性分析对其进行分类鉴定;采用原子荧光光谱法和亚砷酸盐氧化酶大亚基(aoxB)基因序列分析法验证菌株C62的砷氧化功能;优化菌株C62亚砷酸盐氧化酶(Aro)活力的测定条件,并对提取的粗酶进行酶活力测定,以为后续的分离纯化以及微生物处理砷污染的实际应用奠定理论基础。结果表明:菌株C62是一株砷氧化细菌,属于芽孢杆菌属,命名为Bacillus sp.C62,可在28h内将培养基中5mmol/L的As(III)氧化为As(V);菌株C62亚砷酸盐氧化酶(Aro)基因的表达需要As(III)的诱导;利用连续监测法采用优化后的测定条件,测得Bacillus sp.C62的粗酶活力为0.015μmol DCIP/(min·mg),与文献中已报道的几种Aro的活力接近。

耐高浓度As(Ⅲ)菌株的16S rDNA鉴定及对其As(Ⅲ)氧化酶性质的研究

对从某研究所含砷废水中分离筛选得到的一株耐高浓度As(Ⅲ)且能氧化As(Ⅲ)的菌株(AS-01)进行16 S-rDNA基因序列相似性分析,将该菌株鉴定为恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)。该菌28 h内对As(Ⅲ)的氧化率达29.8%。对该菌亚砷酸盐氧化酶的酶学性质初步研究表明,该氧化酶的最适宜作用温度为30℃,最适宜pH为6.0,且为亚砷酸盐诱导型酶。