N-甲基-N-亚硝脲诱导的视网膜变性大鼠模型的形态学和功能改变

目的:观察N-甲基-N-亚硝脲(N-m ethyl-N-n itrosourea,MNU)对SD大鼠视网膜光感受器细胞的毒性作用。方法:出生后50 d的SD大鼠84只,随机抽取4只作为正常对照组,余下80只分为4组,每组20只,分别按体质量一次性腹腔注射MNU 80、60、40和30 mg/kg。各组每次4只分别于12 h、24 h、48 h、72 h、120 h行右眼闪光视网膜电图检查(ERG),并于造模后1 d、2 d、3 d、5 d、7 d处死动物,取眼球做组织学检查。结果:1)显示正常对照组的大鼠ERG波形清晰,a、b波振幅正常。MNU 80、60、40和30 mg/kg剂量组a波消失时间分别为3 h、12 h、24 h、120 h;b波消失时间分别为12 h、24 h、72 h、168 h。2)形态学检查测到正常组大鼠中心视网膜的外视网膜厚度为(98.4±1.8)μm。MNU处理后5 d和7 d,80、60、40和30 mg/kg剂量组外视网膜厚度分别为0μm、(9.5±2.3)μm、(42.8±2.7)μm、(71.3±2.4)μm和0μm、0μm、(20.8±2.5)μm、(62.9±2.0)μm,其损伤程度和剂量及时间成正比。结论:MNU可选择性地诱导视网膜光感受器细胞发生凋亡,该作用呈剂量和时间依赖性。

O^6-甲基鸟嘌呤DNA转移酶在神经胶质瘤中的表达及其与亚硝脲耐药的关系

目的 :探讨O6 甲基鸟嘌呤DNA转移酶 (MGMT)在人脑神经胶质瘤中的表达情况及其与亚硝脲耐药之间的关系。方法 :采用免疫组化法对人脑神经胶质瘤石蜡标本中MGMT进行了检测 ,并与临床应用亚硝脲的疗效评价结果进行了比较。结果 :116例神经胶质瘤中MGMT阳性表达率为 6 7.2 %。MGMT阳性表达率最高者为髓母细胞瘤 (10 0 % ) ,表达率最低者为少枝胶质细胞瘤 (35 .7% )。在使用亚硝脲治疗的患者中 ,MGMT阳性表达与亚硝脲化疗效果呈显著负相关 (P <0 .0 5 )。肿瘤细胞的耐药程度与MGMT表达强度无关 ,只与其是否阳性有关。结论 :不同病理类型的神经胶质瘤对亚硝脲的耐药和敏感性明显不同。化疗前检测神经胶质瘤MGMT的表达情况 ,对预测化疗敏感性、指导临床使用亚硝脲化疗具有重要意义。

金钠多、灯盏花素对N-甲基-N-亚硝脲诱导SD大鼠视网膜变性的保护作用

目的 观察金钠多 (Gin)、灯盏花素 (Bre)对N 甲基 N 亚硝脲 (MNU)诱导SD大鼠视网膜变性的保护作用及机制。方法 雌性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、Gin组和Bre组。其中Gin又分大剂量和中剂量组 ,Bre分大剂量、中剂量和小剂量组。于生后 47d开始腹腔注射给药 ,每日 1次 ,连续给药 4d和 10d ,并于生后 50d腹腔注射MNU 60mg/kg。在MNU处理 2 4h和 7d后处死动物 ,取眼球。通过视网膜形态学分析测量周边视网膜的总厚度 ,TUNEL试剂盒检测光感受器细胞凋亡。结果 MNU处理 7d后 ,模型组周边视网膜的总厚度为 3 6μm ,Gin组和Bre组分别为 44、3 7、58、43和 3 9μm。MNU处理 2 4h后 ,模型组周边视网膜的光感受器细胞凋亡指数为 (3 8 0± 3 6) % ,Gin组和Bre组分别为 (2 6 3± 2 7) %、(3 7 4± 2 9) %、(19 4± 1 9) %、(2 8 0± 3 0 ) %和 (3 6 9± 2 1) %。结论 Gin和Bre对MNU引起的周边视网膜损伤有一定的保护作用 ,呈剂量依赖性 ,其作用机制是通过抑制光感受器细胞发生凋亡。

甲基亚硝脲快速诱导大鼠乳腺原位癌模型的实验研究

目的:通过腹部皮下注射甲基亚硝脲(MNU)快速诱导SD大鼠乳腺原位癌模型。方法:选取SD大鼠135只,腹部皮下注射MNU,加量组隔周注射MNU共2次,单量组注射MNU1次,剂量50mg/kg,每隔1～2周处死动物,研究周期12周,取大鼠乳腺组织进行常规病理学检查和免疫组化测定VEGF的表达。结果:加量组乳腺原位癌发生率达60.0%,形成高峰在实验第5～6周,原位癌的VEGF表达率为60.0%。结论:隔周腹部皮下2次注射MNU可快速构建SD大鼠乳腺原位癌动物模型,其富含血管生成表达,可作研究血管生成抑制剂预防乳腺癌的动物模型。

针刺对N-甲基-N-亚硝脲诱导的视网膜变性大鼠感光细胞凋亡的抑制作用

目的观察针刺对N-甲基-N-亚硝脲(MNU)诱导的视网膜变性大鼠感光细胞凋亡发生的影响。方法选取50天龄的SD雌性大鼠,将N-甲基-N-亚硝脲以50mg/kg剂量一次性腹腔注射诱导其视网膜变性,随机分为针刺组、模型组。观察大鼠视网膜的凋亡变化。结果凋亡高峰第2、3天针刺组与模型组凋亡比较,差异无统计学意义(P>0.05)。第5天、第7天时各组凋亡指数比较,差异有统计学意义(P<0.01)。针刺可抑制因诱导引起的caspases-3升高。结论针刺能够抑制MNU诱导的大鼠视网膜光感受器细胞的凋亡,其抑制作用与凋亡发生的状态有一定关系。

替尼泊苷-甲环亚硝脲联合治疗脑转移性肿瘤

目的 :研究、摸索治疗脑转移性肿瘤的有效方法。方法 :采用替尼泊苷 甲环亚硝脲 (VM2 6 MeCCNU)的组合化疗 ,结合传统的中医辩证论治 ,部分病例同时进行g刀或直线加速器照射等治疗。结果 :症状改善及消失率为84 .2 1 % ;影像学 (CT或MRI)复查 :CR 4例 ( 1 2 .5% ) ,PR 9例 ( 2 8.1 3 % ) ,NR 1 4例 ( 43 .75% ) ,PD 5例 ( 1 5.63 % ) ,有效率 4 0 .63 % ;存活时间少于 6个月者 7例 ( 2 3 .3 % ) ,超过 6个月者 2 3例 ( 76.67% ) ,其中超过 1年者 1 5例 ,超过 1 .5年者 1 1例 ,超过二年者 8例 ,平均存活时限 1 8.6月。结论 :以替尼泊苷 甲环亚硝脲联合化疗为主 ,辅以中药及放疗是治疗脑转移性瘤的有效治疗组合 ,其治疗效果优于文献报告。

银杏苦内酯B对N-甲基-N-亚硝脲诱导的大鼠视网膜细胞凋亡的抑制作用

目的:探讨银杏苦内酯B(GB)对N-甲基-N-亚硝脲(MNU)诱导的大鼠视网膜变性的影响及其机制。方法:建立大鼠视网膜变性模型,应用TUNEL法检测光感受器细胞凋亡,RT-PCR法和免疫组织化学法分别检测MNU作用后不同时间大鼠视网膜中bcl-2和bax mRNA和蛋白的表达。结果:GB治疗组外核层细胞凋亡指数显著低于模型组(P<0.01)。MNU作用后12 h、1 d、2 d、3 d和5 d,bcl-2/bax mRNA模型组为0.36、0.15、0.29、0.42和0.64,GB治疗组为0.98、0.92、0.53、0.45和0.68,显著高于模型组(P<0.01)。GB治疗组Bcl-2蛋白在MNU给药后1 d表达最强,2 d阳性表达下降,3 d后阳性表达消失,模型组未见视网膜Bcl-2阳性表达;GB治疗组Bax蛋白表达显著低于模型组(P<0.01)。结论:银杏苦内酯B能抑制MNU诱导的视网膜光感受器细胞凋亡,可能与上调Bcl-2的表达量,提高Bcl-2/Bax比值有关。

N-甲基-N-亚硝脲诱导的大鼠视网膜感光细胞损伤模型中Müller细胞增殖和细胞因子分泌的变化

目的:建立N-甲基-N-亚硝脲(N-methyl-N nitrosourea,MNU)损伤视网膜的模型,研究视网膜神经元凋亡对Müller细胞生物学特性的影响及神经营养因子的表达变化。方法:腹腔注射MNU建立视网膜损伤模型,免疫荧光染色方法研究感光细胞缺失对Müller细胞的生物学特性的影响,并检测主要神经营养因子表达的变化。结果:TUNEL法显示,腹腔注射MNU后2 d,视网膜外核层细胞凋亡现象明显。核增殖抗原(PCNA)及细胞周期素CyclinD_1的表达明显增高。与此同时,Müller细胞也开始表达神经干细胞抗原巢蛋白(nestin);RT-PCR显示胰岛素样生长因子(IGF),碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和肝细胞生长因子(HGF)mRNA的表达均升高。结论:在视网膜受到损伤时,Müller细胞增殖、去分化呈现出干细胞的特性。而视网膜中IGF、bFGF和HGF等细胞因子的表达明显增高,提示视网膜损伤后可能通过大量分泌细胞生长因子,促进Müller细胞的增殖。

黄芪对N-甲基-N-亚硝脲诱导大鼠光感受器细胞凋亡的预防途径(英文)

背景:视网膜色素变性是非炎症性、双侧进行性的视网膜变性,其特征是光感受器细胞因发生凋亡而丢失,最终导致失明。中药黄芪在阻止该病的进程上显示出了良好的前景。目的:观察黄芪对N-甲基-N-亚硝脲致SD大鼠视网膜损伤的保护作用。设计:随机对照动物实验。单位:新乡医学院药学院。材料:实验于2004-03/12在中山大学中山眼科中心药理实验室完成。雌性SD大鼠114只,由中山大学中山医学院动物中心提供,N-甲基-N-亚硝脲为美国Sigma公司产品,黄芪注射液为成都地奥九泓制药厂生产(生产批号:国药准字Z99060535,2mL/支,主要成分为黄芪)。方法:选用雌性SD大鼠114只,30只用于视网膜层形态学分析;30只用于细胞凋亡检测;54只用于胞核内核因子κBp65活性的检测。采用抽签法随机分组,每组6只。于大鼠生后47d,分别经腹腔注射不同剂量的黄芪(2.5,5和10g/kg),1次/d,除对照组外,其余组的大鼠同时于生后50d腹腔注射N-甲基-N-亚硝脲60mg/kg。在N-甲基-N-亚硝脲处理不同时间后处死动物,取眼球,视网膜形态学分析测量周边视网膜的总厚度,TUNEL试剂盒检测光感受器细胞凋亡,转录因子试剂盒分析核因子κBp65的活性。主要观察指标:各组视网膜厚度、凋亡指数和胞核内核因子κBp65的活性比较。结果:黄芪可剂量依赖性地显著增加周边视网膜总厚度和降低N-甲基-N-亚硝脲引起的光感受器细胞凋亡指数。黄芪注射液10g/kg还可时间依赖性地上调视网膜细胞胞核内核因子κBp65的活性。但其对N-甲基-N-亚硝脲引起的中心视网膜损伤无明显的保护作用。结论:黄芪通过上调视网膜细胞胞核内核因子κBp65的活性,抑制光感受器细胞凋亡,从而部分地保护N-甲基-N-亚硝脲引起的视网膜损伤。

儿童髓母细胞瘤术后行嘧啶亚硝脲化学治疗临床观察

目的 :通过化学药物方法抑制髓母细胞瘤的生长繁殖。方法 :对手术后的髓母细胞瘤患儿行静脉输液法。每日一次 ,1～ 2mg/kg。结果 :术后一年观察 ,2 0例患儿中 ,化疗加放疗未见肿瘤复发共 6例 ,占 30 % ;单纯化疗未见复发 3例 ,占 15 % ;不同程度复发 6例 ,占 30 % ;死亡 5例 ,占 2 5 %。结论 :儿童髓母细胞瘤术后辅以化学药物治疗 ,将抑制肿瘤生长。

即早基因在N-甲基-N-亚硝脲诱导SD大鼠视网膜变性中的表达

目的研究N-甲基-N-亚硝脲(N-m ethyl-N-n itrosourea,MNU)对SD大鼠视网膜毒性的分子机制。方法于♀SD大鼠出生后50 d,一次腹腔注射(ip)MNU 60 mg.kg-1。在MNU处理不同时间后,处死大鼠,取眼球。进行组织学检查;TUNEL试剂盒检测光感受器细胞凋亡;RT-PCR法检测基因c-jun和c-fos的表达。结果MNU作用24 h后,视网膜光感受器外节部定向紊乱;7 d后,外颗粒层和光感受层几乎完全消失。MNU作用12 h后,光感受器细胞开始发生凋亡,24 h达高峰。MNU可时间依赖性地上调即早基因的表达。结论MNU对视网膜的毒性作用是通过增加基因c-jun和c-fos的表达,从而诱导光感受器细胞发生凋亡。

N-甲基-N-亚硝脲对大鼠光感受器细胞毒性作用的形态学改变

目的 观察N—甲基—N—亚硝脲(N—methyl—N—nitrosourea,MNU)对SD大鼠光感受器细胞毒性作用的形态学改变。方法 雌性SD大鼠76只,分12组,正常对照组4只,其余组各6只。于大鼠生后50d,分别一次腹腔注射MNU 40mg/kg、60mg/kg和80mg/kg。在MNU处理后24h、48h、3d和7d,处死大鼠,取眼球,做组织学检查。结果 不同剂量的MNU均引起视网膜损伤,其损伤的程度与MNU剂量呈正比。作用24h后,可见不同程度的视网膜光感受器细胞核固缩和光感受器细胞外节部定向障碍;48h或3d后,可见光感受器细胞丧失;7d后,外颗粒层和光感受层仅剩下少数几层或几乎完全消失。结论 MNU对大鼠视网膜光感受器细胞有选择性的毒性作用,该作用呈剂量和时间依赖性。

骨髓间充质干细胞(MSCs)对N-甲基-N-亚硝脲(MNU)诱导的C57BL小鼠视网膜变性的治疗作用

目的观察骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)对N-甲基-N-亚硝脲(N-methyl-N-nitrosourea,MNU)诱导的C57BL小鼠视网膜色素变性(retinitis pigmentosa,RP)的治疗作用。方法应用不同剂量(30 mg·kg^(-1)、45 mg·kg^(-1)、60 mg·kg^(-1)、75 mg·kg^(-1)、90 mg·kg^(-1))的MNU腹腔注射给予C57BL小鼠和MNU作用不同时间(1 d、3 d、7 d)后,通过视网膜电图(electroretinogram,ERG)和HE染色检测小鼠视网膜的电生理功能和组织形态变化,优化建立稳定的RP动物模型的最佳条件;在此动物模型的基础上,经玻璃体内注射和尾静脉注射给予MSCs移植,并应用ERG和HE染色评估MSCs对MNU诱导的RP的治疗作用。结果与对照组相比,30 mg·kg^(-1)、45mg·kg^(-1)剂量的MNU可引起视网膜形态和功能的轻微损伤,而60 mg·kg^(-1)及其以上剂量的MNU可使视网膜ERG波幅明显降低(均为P<0.001),视网膜外核层(outer nuclear layer,ONL)厚度明显变薄(P<0.001),损伤严重;与对照组相比,60 mg·kg^(-1)的MNU作用后1 d和3 d,视网膜ERG波形开始降低,形态结构开始出现ONL厚度变薄的损伤,作用7 d时,ERG波形呈现熄灭型(均为P<0.001),ONL厚度明显变薄(P<0.001),内外核层融合,损伤严重。与MNU单独作用组相比,60 mg·kg^(-1)MNU作用1 d后给予MSCs移植,7 d后MSCs组内ONL厚度增加(P<0.001),视网膜ERG波形趋于恢复(均为P<0.001)。结论MSCs移植对MNU诱导的视网膜退行性变有一定的治疗作用。

健脾益气明目胶囊对N-甲基-N-亚硝脲诱导大鼠视网膜光感受器细胞损伤的影响

目的:探讨健脾益气明目胶囊对N-甲基-N-亚硝脲(MNU)诱导的大鼠视网膜光感受器细胞变性动物模型的治疗作用。方法:43天龄的雌性SD大鼠33只随机分为3组。健脾益气明目胶囊组以健脾益气明目胶囊溶解后灌胃,正常对照组和模型对照组以等量蒸馏水灌胃,2次/d,连续7 d。给药7 d后,健脾益气明目胶囊组和模型对照组大鼠予MNU40 mg/kg腹腔注射;正常对照组注射等量生理盐水。观察MNU处理后12、24、48、72 h各组大鼠视网膜电图a波及b波的变化,并于MNU作用后7 d处死大鼠,取眼球测定视网膜全层及外核层厚度。结果:正常对照组大鼠不同时间点视网膜电图(ERG)a波和b波的振幅差异无统计学意义(P>0.05);模型对照组在MNU处理后ERG a波和b波的振幅均呈持续性、进行性下降,健脾益气明目胶囊可明显抑制ERG a波b波振幅的降低(P<0.05)。眼病理结果显示,健脾益气明目胶囊组与模型组比较,MNU诱导的大鼠视网膜光感受器细胞损伤显著减轻(P<0.05)。结论:健脾益气明目胶囊可减轻MNU对大鼠视网膜光感受器细胞的损伤程度,促进MNU诱导的大鼠视网膜光感受器细胞损伤的功能恢复。

抗癌新药嘧啶亚硝脲新合成方法的研究

报道了抗癌新药嘧啶亚硝脲的新合成方法，合成中避免使用毒性高的氯乙基异氰酸酯。

亚硝脲类化合物的急性毒性及对耐药艾氏腹水癌小鼠的疗效研究及与构效关系初探

测定了亚硝脲类化合物ＣＮＵ、ＧＡＮＵ、ＡＣＮＵ、ＧＣＮＵ、ＣＬＺ、ＰＣＮＵ、ＢＣＮＵ、ＣＣＮＵ、ＳＴＺＮ、ＭｅＣＣＮＵ、ＦＣＮＵ的小鼠ＬＤ５０分别为５．８、１８．０、２６．０、２７．０、３１．５、３８．０、４８．５、５８．０、１５０．０、１８５．０、５００．０ｍｇ·ｋｇ－１．毒性大小和治疗存活率的高低无正相关。化学结构在１－Ｎ－有脂环或杂环基团则不易产生耐药性．且毒性低疗效高；ＣＮＵ因３－Ｎ－无－ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ基因则毒性增加；１－Ｎ－侧链有氟原子取代其毒性可明显降低。

抑制O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶活性与肿瘤细胞对亚硝脲药物敏感性关系的研究

80％以上的肿瘤细胞为O^6-甲基鸟嘌吟-DNA甲基转移酶(O^6-MT)活性较高的Mer^+型,能够修复亚硝脲药物(NU)造成的DNA烷化损伤,对NU不敏感。本实验证明,用0.75,0.50和0.25mmol/L甲基亚硝脲(MNU)分别处理Mer^+型的HeLaS3,SMMC-7721和表现Mer^-型特征的Cc801,均能明显降低细胞中O^6-MT活性,从而显著提高了三种细胞对嘧啶亚硝脲和双氯乙亚硝脲的敏感性,提示降低O^6-MT活性是使用NU对Mer^+型肿瘤进行有效治疗的前提。

嘧啶亚硝脲对胶质母细胞瘤A-172细胞中Bcl-xL mRNA和蛋白表达的影响

目的探讨嘧啶亚硝脲(ACNU)对人胶质母细胞瘤A-172细胞Bcl-xL mRNA及其蛋白表达和A-172细胞增殖活性的影响。方法用免疫组化SP法、RT-PCR和MTT法分别检测不同浓度ACNU作用于A-172细胞后Bcl-xL mRNA、蛋白的表达。结果不同浓度ACNU作用A-172细胞后Bcl-xL mRNA相对水平均高于未加ACNU作用的A-172细胞(P<0.01),随着ACNU浓度的增加,Bcl-xL蛋白表达逐渐下降,对细胞增殖活性的抑制率逐渐增高;ACNU为25μg/ml时,细胞增殖抑制率增幅最大为54.48%。结论A-172细胞中Bcl-xL mRNA、蛋白呈高表达。ACNU可以诱导降低胶质母细胞瘤A-172细胞中Bcl-xL的表达,促进其细胞凋亡。对A-172细胞增殖活性具有明显抑制作用。

以氨基酸为载体的亚硝脲类化合物的合成及其抗肿瘤活性

合成了16个以氨基酸为载体的亚硝脲类化合物。初步药理试验表明,其中苯甘氨酸酯氯乙亚硝脲(Ⅱ)和苯丙氨酸酯氯乙亚硝脲(Ⅱ_7),在剂量为27mg/kg 时对肉瘤 S37的抑制率分别为79.7和79.8%。剂量为63mg/kg 时,对大鼠 Walker 256癌肉瘤的抑制率,Ⅱ_5为98.5,Ⅱ_7为99%。Ⅱ_5和Ⅱ_7对小鼠 S37的化疗指数分别为7.66和10.33。