氨基修饰亚磷酰胺单体的合成工艺研究

采用易得的6-氨基-1-己醇、磷试剂和4-甲氧基三苯基氯甲烷为原料合成氨基修饰亚磷酰胺单体。通过对影响收率的关键因素进行研究,找到了最佳反应条件:物料比(羟基中间体∶磷试剂)为1∶1.5,25℃下反应3h,收率达86.9%。合成工艺操作方便,收率高,污染小,有广阔的市场应用前景。

聚集诱导发光型核酸探针的制备及其核酸传感原理研究

核酸检测是目前生物诊疗及医学分析领域最为精准的方法之一.其中,广泛应用的聚合酶链式反应(PCR)技术利用TaqMan探针的荧光信号输出,可实现对微量目标序列的高灵敏定量分析.本工作系统性地完成聚集诱导发光(AIE)基元——四苯乙烯(TPE)的亚磷酰胺修饰,并将其设计和制备成一系列单标记特定RNA的核酸探针,为后续高效率利用全自动核酸合成仪制备各类AIE探针奠定基础;利用RNaseA酶特异性切割TPE-RNA1探针中水溶性的RNA部分,通过透射电镜、荧光光谱、质谱等表征证明酶切作用诱发的探针溶解能力变化且伴随着疏水聚集;通过优化探针浓度、反应时间、序列长度等多个参数,实现了AIE效应下荧光增强34.7倍.采用AIE原理取代传统探针中荧光-淬灭基团的双标记策略,扩展了核酸探针的设计策略,并系统表征和探讨AIE型核酸探针的聚集过程,旨在推动更高效、更灵敏的核酸检测探针,拓展其在生物化学检测领域的应用.