目的研究亚致死温度射频消融(RFA)对肝癌干细胞(LCSC)产生及其相关转录因子表达的影响。方法利用小鼠Hep1-6肝癌细胞株和肝细胞癌(HCC)患者临床样品,检测LCSC相关标志物和转录因子的表达。结果不同温度分别刺激Hep1-6细胞后发现,45℃是...目的研究亚致死温度射频消融(RFA)对肝癌干细胞(LCSC)产生及其相关转录因子表达的影响。方法利用小鼠Hep1-6肝癌细胞株和肝细胞癌(HCC)患者临床样品,检测LCSC相关标志物和转录因子的表达。结果不同温度分别刺激Hep1-6细胞后发现,45℃是不能诱导细胞死亡的亚致死性温度。流式细胞仪(FCM)检测显示45℃处理可引起CD13^+、CD44^+、CD90^+、CD133^+Hep1-6细胞水平明显上调,提示45℃温度导致Hep1-6细胞中以上各型LCSC产生增加;实时定量聚合酶链反应(RT-q PCR)检测显示45℃温度导致CD13、CD90、CD133 m RNA水平明显上调。CD13 m RNA水平在5例HCC患者复发肝癌组织中均明显上调,CD133 m RNA在4例复发肝癌中上调,CD90 m RNA仅在1例复发肝癌中上调;FCM检测显示CD13^+LCSC水平在4例复发肝癌中明显上调,CD133^+LCSC水平仅在1例复发肝癌中上调,提示CD13^+LCSC水平上调与45℃温度关系更密切。RT-q PCR检测显示4例CD13^+LCSC上调的复发肝癌患者13个LCSC相关转录因子中Sox2、Stat1明显上调,FCM检测显示45℃处理Hep1-6细胞后Sox2、Stat1 m RNA明显上调。用Sox2、Stat1 si RNA分别沉默了Sox2、Stat1基因,表明Sox2、Stat1均参与了45℃温度诱导的CD13^+LCSC产生。结论 RFA治疗中45℃亚致死性温度所致CD13^+LCSC水平增高与Sox2、Stat1表达有关。该结果对肝癌复发研究有一定借鉴意义。展开更多
文摘目的研究亚致死温度射频消融(RFA)对肝癌干细胞(LCSC)产生及其相关转录因子表达的影响。方法利用小鼠Hep1-6肝癌细胞株和肝细胞癌(HCC)患者临床样品,检测LCSC相关标志物和转录因子的表达。结果不同温度分别刺激Hep1-6细胞后发现,45℃是不能诱导细胞死亡的亚致死性温度。流式细胞仪(FCM)检测显示45℃处理可引起CD13^+、CD44^+、CD90^+、CD133^+Hep1-6细胞水平明显上调,提示45℃温度导致Hep1-6细胞中以上各型LCSC产生增加;实时定量聚合酶链反应(RT-q PCR)检测显示45℃温度导致CD13、CD90、CD133 m RNA水平明显上调。CD13 m RNA水平在5例HCC患者复发肝癌组织中均明显上调,CD133 m RNA在4例复发肝癌中上调,CD90 m RNA仅在1例复发肝癌中上调;FCM检测显示CD13^+LCSC水平在4例复发肝癌中明显上调,CD133^+LCSC水平仅在1例复发肝癌中上调,提示CD13^+LCSC水平上调与45℃温度关系更密切。RT-q PCR检测显示4例CD13^+LCSC上调的复发肝癌患者13个LCSC相关转录因子中Sox2、Stat1明显上调,FCM检测显示45℃处理Hep1-6细胞后Sox2、Stat1 m RNA明显上调。用Sox2、Stat1 si RNA分别沉默了Sox2、Stat1基因,表明Sox2、Stat1均参与了45℃温度诱导的CD13^+LCSC产生。结论 RFA治疗中45℃亚致死性温度所致CD13^+LCSC水平增高与Sox2、Stat1表达有关。该结果对肝癌复发研究有一定借鉴意义。