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氧化亚铁硫杆菌亚铁氧化活性诱变育种理论探讨 被引量:14
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作者 张在海 王淀佐 +1 位作者 邱冠周 胡岳华 《铜业工程》 CAS 2001年第1期12-15,共4页
结合已有的实验研究探讨了氧化亚铁硫杆菌亚铁氧化活性诱变育种过程中出现的几个理论问题 :突变基因性质 ;正突变与细菌修复系统 ;诱变剂选择与“钝化”防止 ;遗传稳定性与抑制基因突变 ;有效的育种程序。以期在进一步诱变育种中加快进... 结合已有的实验研究探讨了氧化亚铁硫杆菌亚铁氧化活性诱变育种过程中出现的几个理论问题 :突变基因性质 ;正突变与细菌修复系统 ;诱变剂选择与“钝化”防止 ;遗传稳定性与抑制基因突变 ;有效的育种程序。以期在进一步诱变育种中加快进程 ,获得遗传稳定。 展开更多
关键词 氧化亚铁硫杆菌 亚铁氧化活性 诱变育种 基因 浸矿
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氯离子对氧化亚铁硫杆菌和氧化亚铁钩端微螺菌活性的影响 被引量:13
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作者 郭勤 韩文艳 +3 位作者 李江 刘亚洁 史维浚 郑福存 《有色金属(冶炼部分)》 CAS 北大核心 2015年第1期42-45,53,共5页
采用连续稀释法分别从江西和广东某铀矿生物冶金现场筛选得到两株亚铁氧化菌。16srDNA鉴定结果表明,细菌分别为氧化亚铁硫杆菌(Acidimicrobium ferrooxidans)和氧化亚铁钩端微螺菌(Leptospirillum ferriphilum)。在氯离子浓度在1g/... 采用连续稀释法分别从江西和广东某铀矿生物冶金现场筛选得到两株亚铁氧化菌。16srDNA鉴定结果表明,细菌分别为氧化亚铁硫杆菌(Acidimicrobium ferrooxidans)和氧化亚铁钩端微螺菌(Leptospirillum ferriphilum)。在氯离子浓度在1g/L以内,对细菌亚铁氧化活性基本没有影响;1-2g/L铁氧化活性有所降低,但是细菌通过调节依然能够适应并维持比较高的活性;氯离子浓度大于2g/L后亚铁氧化活性急速下降,当氯离子浓度大于3g/L后细菌生长受到抑制,亚铁氧化活性很低。 展开更多
关键词 氧化亚铁硫杆菌 氧化亚铁钩端螺旋菌 氯离子 亚铁氧化活性
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嗜酸氧化亚铁硫杆菌的保藏方法 被引量:4
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作者 杨宇 张燕飞 +3 位作者 黄菊芳 蒋东海 陈勇 邱冠周 《中南大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第3期472-475,共4页
对几种适用于中短期保藏嗜酸氧化亚铁硫杆菌的保藏方法进行对比研究。研究结果表明:在多种保藏方法中,采用单蒸水悬浮细菌(pH=6.8),在4℃保藏效果最佳,与传统的传代保藏效果接近;以稀硫酸(pH=2.0),悬浮在4℃、浓缩静置和浓缩菌液用石蜡... 对几种适用于中短期保藏嗜酸氧化亚铁硫杆菌的保藏方法进行对比研究。研究结果表明:在多种保藏方法中,采用单蒸水悬浮细菌(pH=6.8),在4℃保藏效果最佳,与传统的传代保藏效果接近;以稀硫酸(pH=2.0),悬浮在4℃、浓缩静置和浓缩菌液用石蜡油密封在4℃保藏的效果次之;而用9 K基本盐溶液(pH=2.0),悬浮在4℃的保藏效果最差;采用不同保藏方法处理后,该菌的生长迟滞期都有不同程度的延长;而营养缺乏、pH值为7左右、无氧、低盐浓度的环境有利于菌种的保藏。 展开更多
关键词 嗜酸氧化亚铁硫杆菌 亚铁氧化活性 菌种保藏
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铁蛋白重链亚铁氧化酶活性突变体的构建及鉴定
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作者 柳彩芝 苗青 +3 位作者 薛建奇 潘书红 段相林 樊玉梅 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期113-118,123,共7页
[目的]构建小鼠铁蛋白重链(ferritin heavy chain,FTH)亚铁氧化酶活性突变基因的真核表达载体。[方法]针对小鼠FTH基因的亚铁氧化酶活性关键位点(K86、E62和H65),设计并合成6条PCR引物。利用重叠延伸PCR技术,获得小鼠FTH基因的突变体m F... [目的]构建小鼠铁蛋白重链(ferritin heavy chain,FTH)亚铁氧化酶活性突变基因的真核表达载体。[方法]针对小鼠FTH基因的亚铁氧化酶活性关键位点(K86、E62和H65),设计并合成6条PCR引物。利用重叠延伸PCR技术,获得小鼠FTH基因的突变体m FTH(K86Q、E62K和H65G),简写为m FTH(3M)。然后将m FTH(3M)插入到实验室已有的C端带Flag标签的真核表达载体pc DNA3中,插入位置为多克隆位点区域中限制性内切酶Bam HⅠ和HindⅢ之间,从而得到亚铁氧化酶活性缺失的FTH真核表达载体pc DNA3-m FTH(3M)-Flag。重组质粒经酶切和测序鉴定正确后,用脂质体lipofectamineTM2000将其转染到RAW264.7细胞中,检测细胞中带有Flag标签的m FTH(3M)蛋白的表达。[结果]重组质粒酶切得到预期片段,测序显示所构建的m FTH(3M)真核表达载体序列正确,细胞内检测到带Flag标签的m FTH(3M)蛋白信号的强烈表达。[结论]实验成功构建了小鼠FTH亚铁氧化酶活性位点基因突变的真核表达载体pc DNA3-m FTH(3M)-Flag。 展开更多
关键词 铁蛋白重链 亚铁氧化活性 重叠PCR 分子克隆
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Comparison of Fe^(2+) oxidation by Acidithiobacillus ferrooxidans in rotating-drum and stirred-tank reactors 被引量:2
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作者 金建 石绍渊 +2 位作者 刘国梁 张庆华 丛威 《Transactions of Nonferrous Metals Society of China》 SCIE EI CAS CSCD 2013年第3期804-811,共8页
Fe2+ oxidation by Acidithiobacillus ferrooxidans(At.ferrooxidans) under different solid contents by adding inert Al2O3 powder was examined in rotating-drum and stirred-tank reactors.The results show that the bioact... Fe2+ oxidation by Acidithiobacillus ferrooxidans(At.ferrooxidans) under different solid contents by adding inert Al2O3 powder was examined in rotating-drum and stirred-tank reactors.The results show that the bioactivity of At.ferrooxidans in the stirred-tank is higher than that in the rotating-drum in the absence of Al2O3 powder,but the biooxidation rate of Fe2+ decreases markedly from 0.23 g/(L·h) to 0.025 g/(L·h) with increasing the content of Al2O3 powder from 0 to 50%(mass fraction) in the stirred-tank probably due to the deactivation of At.ferrooxidans resulting from the collision and friction of solid particles.The increase in Al2O3 content has a little adverse effect on the bioactivity of At.ferrooxidans in the rotating-drum due to different mixing mechanisms of the two reactors.The biooxidation rate of Fe2+ in the rotating-drum is higher than that in the stirred-tank at the same content of Al2O3 powder,especially at high solid content.The higher bioactivity of At.ferrooxidans can be maintained for allowing high solid content in the rotating-drum reactor,but its application potential still needs to be verified further by the sulfide bioleaching for the property differences of Al2O3 powder and sulfide minerals. 展开更多
关键词 Fe2+ Acidithiobacillus ferrooxidans OXIDATION bioactivity solid content rotating-drum reactor stirred-tank reactor
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梯棱羊肚菌AA1_2家族多铜氧化酶基因的异源表达与生化鉴定 被引量:5
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作者 刘天海 张强 +5 位作者 苗人云 唐杰 张小平 黄忠乾 彭卫红 谭昊 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1139-1151,共13页
典型的漆酶通常属于辅助活性酶第一家族第一亚族(auxiliary activity family 1 subfamily 1,简称AA11家族),而AA12家族的多铜氧化酶通常拥有将二价铁氧化成三价铁的活性,部分AA12家族酶蛋白兼具漆酶活性。梯棱羊肚菌全基因组只有一个AA1... 典型的漆酶通常属于辅助活性酶第一家族第一亚族(auxiliary activity family 1 subfamily 1,简称AA11家族),而AA12家族的多铜氧化酶通常拥有将二价铁氧化成三价铁的活性,部分AA12家族酶蛋白兼具漆酶活性。梯棱羊肚菌全基因组只有一个AA12家族酶基因,该基因编码的酶蛋白是否拥有漆酶功能尚未清楚。本研究主要从酶生化特性的角度,结合酶基因的表达规律,对该基因的功能进行初探。对该AA12家族基因在梯棱羊肚菌生长发育不同阶段的表达水平进行实时定量PCR检测;将该基因编码序列克隆到表达载体中在大肠杆菌中异源表达,层析获得纯化的酶蛋白,对酶蛋白的生化特性进行了鉴定。发现该AA12多铜氧化酶基因在外源营养袋和土壤中的营养菌丝里低表达,在菇原基和子实体中表达较活跃。异源表达获得纯化的酶蛋白分子量约64k Da,表现出亚铁氧化酶(EC1.16.3.1)与漆酶(EC1.10.3.2)双重活性。其亚铁氧化酶活性在pH4最高,漆酶活性在pH6最高。亚铁氧化酶活性与漆酶活性的最适温度均为30℃左右,在30℃温育16h后仍保留70%以上活性。亚铁氧化酶和漆酶活性受Mn^2+、Hg^2+和Pb^2+抑制。对蛋白质变性剂SDS、尿素的耐受性较强。本研究通过酶学证据证实了梯棱羊肚菌AA12家族多铜氧化酶基因编码的酶蛋白具有亚铁氧化酶-漆酶双重活性,系在子囊菌大型真菌中首次发现,为进一步研究铁元素代谢与漆酶活性在羊肚菌子实体形成与发育过程中的作用提供了启示。 展开更多
关键词 AA12家族 多铜氧化 异源表达纯化 漆酶活性 亚铁氧化活性
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