禽多杀性巴氏杆菌交叉保护因子的研究进展

禽霍乱是危害养禽业的重要传染病之一。疫苗免疫接种是防制该病的重要措施,传统疫苗因禽多杀性巴氏杆菌血清型众多且无交叉保护能力而不能有效控制该病。禽多杀性巴氏杆菌交叉保护因子的发现为研制适合各种血清型禽多杀性巴氏杆菌引起感染的广谱疫苗展现了诱人的前景。本文就禽多杀性巴氏杆菌交叉保护因子研究进展进行了综述。

禽多杀巴氏杆菌交叉保护因子的研究

禽多杀巴氏杆菌交叉保护因子（ＣＰＦ）存在于鸡活体培养物中．用鸡活体培养禽多杀巴氏杆菌Ｃ４８－１强毒株（Ⅰ型），菌血症时收获细菌制成死菌苗，免疫鸡对异型菌株Ｐ１０５９（３型）攻击产生交叉保护，而４１℃肉汤培养时Ｃ４８－１菌株不具备这种交叉保护．活体培养的细菌冻融后对异型菌株保护率达１００％，经溶菌酶等处理溶解后的溶解物上清及沉淀对异型菌株产生６６．７％和８０％的交叉保护．但其沉淀经蛋白酶处理后则失去了交叉保护能力．生化分析表明，活体培养的细菌与肉汤培养的细菌其蛋白质与糖含量比不同；ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析表明，有一分子量约１９３２０蛋白成分仅存在于活体培养的细菌中．

多杀巴氏杆菌交叉保护因子的纯北

体内多杀巴氏杆菌膜相关交叉保护因子以去污剂溶解，并通过系列离子交换层析、凝胶过滤和羟磷灰石柱得到纯化。各种层析组分的ＣＰＦ活性通过主动免疫火鸡和被动免疫雏鸡的攻毒辣测定。

多杀性巴氏杆菌的交叉保护因子

感染火鸡组织的多杀性巴氏杆菌可表达一种独特的抗原性,称为交叉保护因子(CPF),它能产生一种免疫性,保护组织抵御同源或异源血清型株的攻击。美国的R.B.Rimler等研究了一种亲和层析法提纯的单克隆抗体(McAb)和蛋白A-胶体金(PACG),来确定CPF在多杀性巴氏杆菌的位置。

禽多杀性巴氏杆菌PlpB基因交叉保护力研究

根据报道的PM70菌株的PlpB基因序列,设计PlpB基因一对寡核苷酸引物。以C48-1菌株为实验材料,成功扩增PlpB基因的全序列,该片段共831bp。将扩增基因插入原核表达载体pGEX-KG,成功构建了重组表达质粒pKG-PlpB,并对pKG-PlpB重组表达质粒进行序列测定,结果表明:扩增序列与GenBank上所报道的PM70株的PlpB基因序列核苷酸同源性在99%以上。将该重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经诱导获得大小约56KDa的表达蛋白。Western blot检测表明,该表达蛋白具有良好的反应原性。