梅迪-维斯纳病毒gag蛋白的原核表达及其交叉反应原性

为鉴定适用于中国小反刍动物慢病毒(Small ruminants lentivirus viruses,SRLVs)血清学诊断的通用蛋白标记物,本研究以梅迪-维斯纳病毒(Maedi-Visna virus,MVV)四川株为模板扩增获得gag基因序列,使用生物信息学方法分析其与中国山羊关节炎-脑炎病毒(Caprine arthritis encephalitis virus,CAEV)分离株gag蛋白氨基酸序列和抗原表位相似性,构建gag基因重组表达载体并转入BL21(DE3)宿主菌进行诱导表达,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western blotting确定其大小、分布和反应原性。结果显示,MVV gag蛋白氨基酸序列与中国CAEV分离株的相似性为74.7%~74.9%,它的11个抗原表位与CAEV gag蛋白的12个抗原表位存在较高的序列相似性,推测其可作为中国SRLVs血清学诊断的通用蛋白质标记物;SDS-PAGE检测结果显示,重组gag蛋白大小约为55000,主要以包涵体形式存在,Western blotting显示该蛋白可与MVV和CAEV感染动物血清发生免疫反应,证实了蛋白序列分析结果。该研究结果可为研制中国SRLVs通用血清学检测技术方法奠定基础。

不同基因型弓形虫GRA7重组蛋白的抗原性鉴定及交叉反应原性分析

弓形虫是一种严重危害公共卫生安全的人兽共患寄生原虫。前期研究发现,相对于弓形虫Ⅰ型株(RH株),ChineseⅠ型株(YZ-2株)GRA7蛋白因缺失1个谷氨酸而形成新的抗原表位,但该表位对GRA7蛋白免疫学功能的影响尚不清楚。分别对弓形虫RH和YZ-2株GRA7基因进行PCR扩增,构建原核表达载体RH-pET30a(+)-GRA7和YZ-2-pET30a(+)-GRA7,并进行体外诱导表达;Western blot分析2种重组蛋白的抗原性及交叉反应原性。结果表明:GRA7基因PCR产物大小630~633 bp;体外诱导表达产物大小约37 ku;2种重组蛋白均能被抗His标签单克隆抗体、GRA7重组蛋白制备的鼠多克隆抗体以及弓形虫速殖子可溶性抗原制备的鼠多克隆抗体所识别;同时,用重组蛋白制备的多克隆抗体可交叉识别2种基因型虫体内的GRA7天然蛋白。Ⅰ型和ChineseⅠ型虫株的GRA7蛋白具有良好的交叉反应原性,该结果为进一步探索弓形虫GRA7蛋白的功能及其抗感染免疫保护作用的研究奠定基础。

Sustainable electrochemical cross‐dehydrogenative coupling of4‐quinolones and diorganyl diselenides

An environmentally friendly method for the synthesis of 3‐organylselenyl quinolones through theelectrochemical cross‐dehydrogenative coupling of 4‐quinolones and diorganyl diselenides wasdeveloped.As a green,atom economic and self‐separating process,the present reaction requiresneither external oxidants nor electrolytes,forming a recyclable catalytic system.