H5Nx禽流感病毒交叉反应性CD4^(+) T细胞表位预测

【目的】评估预先存在的H5Nx交叉反应性免疫记忆,为人类H5禽流感病毒的防治和广谱疫苗的研发提供理论数据。【方法】利用生物信息学方法筛选人源H5Nx禽流感病毒与季节性流感病毒的共同保守的交叉反应性CD4^(+) T细胞表位,进一步分析保守表位嵌套CD8^(+) T细胞表位和B细胞表位情况以及在中国人群中的覆盖率。【结果】92.3%(513/555)的H5Nx CD4^(+) T细胞表位在季节性甲型流感病毒中具有交叉反应性,其中172个表位嵌套CD8^(+) T细胞表位和5个表位嵌套B细胞表位。这些表位与相应HLA-DRB1等位基因在全世界人群中的覆盖率为88.65%。【结论】由于反复接触季节性甲型流感病毒,人群中存在一定水平的的H5Nx交叉反应性免疫记忆,能够为H5Nx感染提供部分保护。

尘螨过敏原的交叉反应性

尘螨是最主要的室内过敏原之一,随着社会生活的现代化,人们对室内居住环境的要求越来越高,由于环境因素而引起的一些过敏性疾病越来越受到人们的关注。本文主要综述了近几年来尘螨过敏原与其他多种螨类、软体动物(蜗牛)和甲壳类动物(虾)以及昆虫(蟑螂、衣鱼、摇蚊、石蚕蛾)等过敏原之间的交叉反应性,对临床过敏性疾病的诊断具有参考价值。

荔枝果实中profilin的表达纯化及其与桦树花粉Bet v 2的交叉反应性研究

目的表达和纯化荔枝果实profilin,并对其免疫学活性及交叉反应性进行研究。方法采用RT-PCR获得整个荔枝profilin的开放阅读框,将其与PET28a载体连接并转化大肠杆菌EscherichiacoliBL21(DE3)进行诱导表达,通过Ni2+亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,采用Western-blot检测其IgE结合活性,并通过ELISA抑制实验对其与桦树花粉profilin的交叉反应性进行研究。结果成功的构建了原核表达载体,并在大肠杆菌中大量的表达了荔枝profilin,纯化后的重组蛋白进行免疫印迹,结果显示15个荔枝过敏患者中有5个存在重组profilin的特异性IgE抗体。ELISA抑制实验发现它们之间存在很高的交叉反应性。结论成功的表达了荔枝profilin,经纯化后具有很好的免疫学活性,为进一步的深入研究奠定了基础。

变应性鼻炎患者血清抗交叉反应性糖类决定簇IgE水平与血清IgE水平和皮肤点刺试验的关联性分析

目的分析变应性鼻炎患者抗交叉反应性糖类决定簇IgE（anti-CCDIgE）水平与血清IgE水平和皮肤点刺试验（SPT）的关联性。方法选取2012年1月—2013年7月北京大学第一医院确诊且符合纳入标准的变应性鼻炎患者和非变应性鼻炎患者161例为研究对象。按照患者是否为变应性鼻炎分为变应性鼻炎组（121例）和对照组（40例）。收集患者一般资料（包括性别、年龄、蜜蜂叮咬情况等）,采用斑点免疫印迹法（dot-IBT）检测血清特异性IgE（s IgE）及anti-CCDIgE表达情况,荧光酶联免疫法（FEIA）检测phadiatop、总IgE（tIgE）表达情况,并进行SPT。分析anti-CCDIgE表达情况与性别、年龄、蜜蜂叮咬情况、s IgE特应性变应原表达情况、phadiatop表达情况、tIgE表达情况、SPT吸入性变应原表达情况的关联性,SPT结果与年龄、性别、phadiatop表达情况、tIgE表达情况的关联性。结果变应性鼻炎组患者s IgE、anti-CCDIgE、phadiatop、tIgE阳性表达率、SPT阳性率均高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。anti-CCDIgE表达情况与性别,年龄,s IgE特应性变应原中的混合树木、葎草、艾蒿、户尘、混合尘螨、混合霉菌、蟑螂、狗毛、猫毛表达情况,phadiatop表达情况,SPT吸入性变应原中的树1、杂草、云杉属、葎草、树2、禾本科/谷、艾蒿、刺槐、松、粉尘螨、户尘螨、烟曲霉菌、白假丝酵母菌、蟑螂、禾本科、霉菌1、霉菌2、动物毛表达情况无关联性（P〉0.05）;anti-CCDIgE表达情况与蜜蜂叮咬情况,s IgE特应性变应原中的豚草表达情况,tIgE表达情况,SPT吸入性变应原中的藜、大豚草表达情况存在关联性（P〈0.05）。SPT结果与性别、tIgE表达情况无关联性（P〉0.05）;SPT结果与年龄、phadiatop表达情况存在关联性（P〈0.05）。SPT阳性率随年龄的增加而增大（χ_（趋势）^2=4.264,P=0.039）。结论变应性鼻炎患者anti-CCDIgE水平与血清IgE（s IgE、tIgE）水平、SPT结果有一定的关联性,anti-CCDIgE表达情况对确诊变应原的SPT和s IgE试验有一定干扰,在分析试验结果时应予以注意。

北京地区人群血清抗交叉反应性糖类决定簇IgE检测与分布特征分析

目的通过调查北京地区人群抗交叉反应性糖类决定簇IgE(anti-CCDIgE)与血清变应原特异性IgE(sIgE)的情况及其与年龄、性别等的相关性,评估anti-CCDIgE分布趋势,分析引发anti-CCDIgE分布的特点,为anti-CCDIgE的临床诊治及预防提供参考依据。方法采用斑点免疫印迹方法 (dot-IBT)对1 377例体检人群进行anti-CCDIgE及19种变应原sIgE的检测。分析anti-CCDIgE与sIgE的关系及不同特征人群anti-CCDIgE阳性率差异。结果北京地区人群总体anti-CCDIgE阳性率为23.7%(327/1 377)。anti-CCDIgE阳性率与血清变应原sIgE阳性项目数呈线性正相关(r=0.986,P<0.05)。女性anti-CCDIgE阳性率(25.3%,260/1 028)高于男性(19.2%,67/349),有过敏症状者anti-CCDIgE阳性率(45.2%,80/177)高于无过敏症状者(20.6%,247/1 200),差异均有统计学意义(χ2值分别为5.344和51.610,均P<0.05)。不同年龄、职业人群anti-CCDIgE阳性率间差异均无统计学意义(P>0.05)。各阳性变应原项目中anti-CCDIgE阳性率居前5位的分别是屋尘(44.6%)、蟑螂(33.9%)、狗上皮(22.6%)、树(22.1%)、虾(21.7%)。结论北京地区人群中anti-CCDIgE阳性率较高,sIgE检测中如有多种sIgE阳性,提示可能存在anti-CCDIgE的干扰,在临床准确判断变应原过敏时应充分考虑anti-CCDIgE的存在。

交叉反应性糖类决定簇IgE对血清特异性IgE检测的影响

目的分析血清变应原特异性IgE(specific IgE,sIgE)检测结果与调查对象实际情况不符合率,探讨交叉反应性糖类决定簇IgE(IgE to carbohydrate cross-reactive determinants,CCD-IgE)对血清sIgE检测的影响。方法通过问卷方式收集1 715例体检人群资料,用斑点免疫印迹法(dot-IBT)检测血清CCD-IgE及19种变应原sIgE。结合问卷与sIgE检测结果,分析sIgE检测阳性与问卷不符合情况及CCD-IgE对sIgE检测的影响。结果各类变应原sIgE检测均存在与问卷主诉不符合的情况,其中花生最高(47.06%);sIgE阳性级别较低时不符合率相对较高;CCD-IgE阳性时较阴性时变应原sIgE阳性率较高(P<0.05);疑似变态反应病组和健康人组不符合者中CCD-IgE阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 CCD可能与血清变态反应原sIgE发生交叉反应,当存在sIgE检测与临床实际情况不符合时应考虑CCD的影响。

北京地区441例荨麻疹患者血清抗交叉反应性糖类决定簇IgE检测及初步分析

血清变应原特异性IgE（sIgE）抗体的检测是寻找荨麻疹患者变应原的常用体外试验方法。但在临床上存在一些荨麻疹患者虽然sIgE水平很高，而无相应过敏症状假阳性）的情况，导致此现象的原因复杂。有学者认为，

谷跗线螨交叉反应性变应原的定位

为明确谷跗线螨Tarsonemus granarius交叉反应性变应原在体内的定位,制作谷跗线螨石蜡切片,HE染色后光镜观察其内部形态结构;选用对尘螨过敏患者的阳性血清特异性IgE抗体作探针,免疫组织化学染色分析其交叉反应性抗原存在位置。HE染色显示谷跗线螨的消化系统占据其体腔的大部分,包括口咽部、中肠、后肠、肛门和唾液腺等结构。免疫组织化学染色显示谷跗线螨的口咽部、中肠、肠内容物、肠壁及生殖腺等均有阳性反应。谷跗线螨体内存在可诱发人体IgE抗体的变应原,变应原在其体内的分布格局与屋尘螨Dermatophagoides pteronyssinus基本一致。

O型人血清中交叉反应性抗体的初步研究

对Ｏ型人血清中ＩｇＭ和ＩｇＧ交叉反应性抗体的性质作了初步研究。实验证明：Ｏ型人血清经Ａ型细胞和Ｂ型细胞吸收后，血清中除抗Ａ和抗Ｂ被完全吸收外，抗Ｂ和抗Ａ效价也下降１～２个稀释度。Ｏ型人血清中除有抗Ａ和抗Ｂ外，还有一种不可分离的抗Ａ，Ｂ。交叉反应性ＩｇＭ抗Ａ，Ｂ的凝集强度一般效价在２～８。Ｏ型血清经２－ｍｅ处理后，ＩｇＧ抗Ａ，抗Ｂ效价在６４～２５６之间，经Ａ型细胞和Ｂ型细胞吸收后，吸收液中抗Ｂ和抗Ａ效价也分别下降。证明交叉反应性抗Ａ，ＢＩｇＭ及ＩｇＧ二种免疫球蛋白都有，但ＩｇＧ抗Ａ，Ｂ的放散能力比ＩｇＭ抗Ａ，Ｂ明显减低，其机制尚待进一步研究。还证明交叉反应性抗Ａ，Ｂ都能被血型物质中和。

ELISA检测TORCH感染的交叉反应性探讨

目的 探讨TORCH四联抗原的交叉反应性。方法 采用间接ELISA检测人群血清中TORCH的IgM及IgG抗体 ;制备四项抗血清进行交叉血清学试验。结果 144份人血清的TORCHIgM阳性率分别为 :TOX 6 .9%、RV 6 .9%、CMV 6 .9%、HSV 2 .8% ,其中 4项阳性 4例 ,3项阳性 4例 ,2项阳性 3例 ;34 3份人血清的TORCHIgG阳性率分别为 :6 1%、8 2 %、10 2 %和 8 7% ,其中 4项阳性 3例 ,3项阳性 14例 ,2项阳性 17例 ,单独阳性 2 6例 ;7份抗血清与相应抗原反应的强度高低不等 ,但同一份抗血清在四种抗原板上的终点滴度基本相似。结论 TORCH四联ELISA检测存在较严重的交叉反应性 。

重组副猪嗜血杆菌血清5型OmpP5高免血清制备及其杀菌活性和交叉反应性分析

目的:探讨致病性副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)血清5型外膜蛋白Omp P5高免血清的杀菌活性和交叉反应性。方法:制备HPS血清5型外膜蛋白Omp P5抗原,免疫BALB/c小鼠制备高免血清,间接ELISA法测定效价,体外杀菌试验测定杀菌率,Western blot检测与不同型HPS菌株之间的交叉反应性,并与制备的HPS血清5型灭活苗高免血清进行比较。结果:高免血清Omp P5效价远高于HPS灭活苗效价;Omp P5高免血清对5型菌株具有良好的杀菌特异性,杀菌效率为96%,而对4、12型菌株杀菌效率较低,仅为31%、39%,杀菌广谱性不如HPS灭活苗高免血清;Western blot检测Omp P5高免血清与不同型HPS菌体抗原均有较好交叉反应性。结论:Omp P5具有较强的免疫原性和良好的交叉反应性,是一个很好的用于鉴定HPS感染的血清学候选工具,可用于副猪嗜血杆菌病的鉴定和诊断以及新型疫苗的研究与开发。

弧菌外膜蛋白OmpK免疫交叉反应性的分析

本研究旨在研究弧菌外膜蛋白（oute rmembrane protein，OMP）OmpK免疫交叉反应的特征，探讨OmpK免疫交叉反应性的分子机制．利用克隆得到5株弧菌的ompK基因，通过比对10种（22株）弧菌的OmpK基因序列发现，ompK基因在弧菌中高度保守，其核苷酸序列的相似性达77％～93％．对副溶血弧菌（V．parahaemolyticus）VPL4—90的ompK基因进行原核表达，利用纯化的OmpK重组蛋白，制备了兔抗OmpK血清．通过westernblot分析发现，OmpK抗血清能够与16种不同的弧菌发生交叉识别反应，其中V．proteolyticus、y．furnissii、V．damsela和V．metschnikovii这4种弧菌OmpK的免疫交叉反应为首次报道，并且证实弧菌OmpK的免疫交叉反应具有种属特异性．通过抗原表位预测和比对发现，弧菌的OmpK具有8个保守的抗原表位，包括7个T细胞表位以及1个T细胞和B细胞的共同表位．流式细胞术分析显示，OmpK抗体能够识别这些相同或相似的抗原表位，提示这些抗原表位可能位于细菌表面．结果表明，这些保守的且位于细胞表面的OmpK抗原表位可能是弧菌OmpK具有免疫交叉反应性的分子基础．

交叉反应性糖类抗原决定簇抗IgE在过敏性疾病中的应用分析

目的通过对交叉反应性糖类抗原决定簇抗IgE水平在过敏性疾病中的应用分析,为临床过敏性疾病的诊疗提供依据。方法应用免疫印迹法,检测交叉反应性糖类抗原糖类决定簇抗IgE抗体(anti-CCD IgE)和20种变应原的血清特异性IgE(sIgE)抗体。结果4568例就诊患者中anti-CCD IgE阳性有335例,阳性率是7.38%,其中1级249例,占74.33%,各阳性级别之间差异有统计学意义,其中两项及两项以上过敏原sIgE呈阳性反应的有79.10%;不同性别中anti-CCD IgE阳性率之间差异无统计学意义(P>0.05),而不同年龄间anti-CCD IgE阳性率间差异有统计学意义(P<0.05),中老年组阳性率稍微高一点,占13.03%;anti-CCD IgE阳性中,各过敏原以尘螨组合1(屋尘螨/粉尘螨)最多,占52.84%,其次是蟑螂50.45%;各过敏性疾病的anti-CCD IgE阳性率普遍较低,anti-CCD IgE阳性率最高的是荨麻疹、湿疹,为9.00%,其次是鼻咽炎和胃肠炎。结论anti-CCD IgE在过敏性疾病人群中较高的流行率,但抗体水平大多是很低,当有多项sIgE阳性时,提示可能会有anti-CCD IgE的干扰;在临床诊断过敏性疾病过程中应充分考虑anti-CCD IgE的影响。

Ⅰ型变态反应中交叉反应性糖类决定簇的研究进展

交叉反应性糖类决定簇(cross-reactive carbohydrate determinants,CCD)是一类广泛存在于动植物糖蛋白中的糖类基团,可诱导人体产生与多种变应原交叉反应的抗CCD特异性IgE抗体(anti-CCDIgE)。研究CCD在人体内的免疫诱导作用及其对人体的致敏性将为Ⅰ型变态反应的临床诊断、治疗及预防提供理论依据。

交叉反应性抗体与临床型新生儿溶血病发生率相关性探讨

目的 :探讨脐带血抗体释放试验阳性结果中存在的交叉反应性抗体 (抗 C)与临床型 HDN发生率的相关性。方法 :用新生儿断脐带血进行 HDN血型血清学检验 ,对抗体释放试验结果阳性的 36 1例足月产健康新生儿按抗 C检验结果分组调查其临床型 HDN发生率。结果 :1在 192例母 /子血型 O/ A组合、抗体释放试验结果阳性的新生儿中 ,存在抗 C与不存在抗 C的新生儿临床型 HDN发生率无显著差别 ( P>0 .0 5 )。在 16 9例母 /子血型 O/ B组合、抗体释放试验结果阳性的的新生儿中 ,存在抗 C与不存在抗 C的新生儿临床型 HDN发生率亦无显著差别 ( P>0 .0 5 )。 2对照组中 ,被抗 C致敏的新生儿红细胞免疫性破坏的完全程度极显著多于临床型 HDN组的患儿 ( P<0 .0 1)。结论 :在脐带血抗体释放试验阳性结果中 ,抗 C的存在与临床型

抗交叉反应性糖类决定簇抗体吸附剂在过敏原体外检测中的应用价值

目的探讨抗交叉反应性糖类决定簇(CCD)抗体吸附剂在过敏原体外检测中的应用价值。方法收集2018年12月至2019年9月杭州师范大学附属医院就诊的92例过敏原特异性IgE(sIgE)阳性患者的静脉血样本,其中CCD指示带阳性62例(CCD阳性组),阴性30例(CCD阴性组)。两组均采用抗CCD抗体吸附剂处理样本后再次进行过敏原检测,对比前后两次检测结果,分析抗CCD抗体吸附剂在过敏原体外检测中的应用价值。结果经抗CCD抗体吸附剂处理后,CCD阳性组有61例CCD指示带转阴,转阴比例为98.4%,其阳性条带数明显减少,部分阳性过敏原sIgE数值明显降低(如树木组合、豚草、艾蒿、蟑螂、葎草、花生、黄豆和蟹);30例CCD指示带阴性过敏原的检测结果处理后无变化。结论抗CCD抗体吸附剂处理样本后可以明显减少CCD干扰引起的假阳性,但不影响真阳性,可以有效提高检测结果的准确性,有利于临床医生确定特异性过敏原,有效预防和控制变态反应性疾病的发生发展。

丙型肝炎病毒高变区1模拟表位的交叉反应性分析

研究丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)高变区1(Hypervariable region 1,HVR1)抗原表位的交叉反应性,获取高反应性的抗原表位。设计并合成5种HVR1模拟表位基因,构建编码HVR1模拟表位的表达载体,表达并纯化表位蛋白。ELISA法检测表位蛋白与35份HCV抗体阳性血清的交叉反应性。包装HCV假病毒(HCVpseudotype particles,HCVpp),评价表位蛋白免疫BALB/c鼠血清在假病毒感染Huh7.5细胞中的作用。结果表明,表达纯化的5种表位蛋白(P1、P2、P5、P6、P8)均可与HCV抗体阳性血清反应,阳性反应率分别为54.3%(P1)、62.9%(P2)、80%(P5)、68.6%(P6)、54.3%(P8)。表位蛋白P6、P8免疫BALB/c鼠血清对HCV假病毒感染Huh7.5细胞具明显的抑制作用。结果提示,选取的HVR1模拟表位在HCV感染免疫与疫苗研制中可能具有潜在的价值。

绵羊肺炎支原体分离株交叉反应性的测定

绵羊肺炎支原体分离株致敏经过鞣酸和戊二醛处理的绵羊红细胞,制备成试验用抗原,与通过攻毒取得的几种血清进行间接血凝试验来检测其交叉反应性。通过检测,绵羊肺炎支原体分离株同无乳支原体、巴氏杆菌等几种可以引起肺炎症状的菌种无交叉反应性。

一种针对鸭Tembusu病毒包膜蛋白Ⅱ结构域hi环独特交叉反应性表位的中和抗体可保护鼠动物模型感染鸭坦布苏病毒

黄病毒是黄病毒科黄病毒属的单股正链RNA病毒。该病毒家族包括登革热病毒(DENV)、西尼罗河病毒(WNV)、日本脑炎病毒(JEV)、蜱媒脑炎病毒(TBEV)、寨卡病毒(Zika virus)等几种重要虫媒传播的高发病率和高死亡率的人畜共患病病毒。