O型人血清中交叉反应性抗体的初步研究

对Ｏ型人血清中ＩｇＭ和ＩｇＧ交叉反应性抗体的性质作了初步研究。实验证明：Ｏ型人血清经Ａ型细胞和Ｂ型细胞吸收后，血清中除抗Ａ和抗Ｂ被完全吸收外，抗Ｂ和抗Ａ效价也下降１～２个稀释度。Ｏ型人血清中除有抗Ａ和抗Ｂ外，还有一种不可分离的抗Ａ，Ｂ。交叉反应性ＩｇＭ抗Ａ，Ｂ的凝集强度一般效价在２～８。Ｏ型血清经２－ｍｅ处理后，ＩｇＧ抗Ａ，抗Ｂ效价在６４～２５６之间，经Ａ型细胞和Ｂ型细胞吸收后，吸收液中抗Ｂ和抗Ａ效价也分别下降。证明交叉反应性抗Ａ，ＢＩｇＭ及ＩｇＧ二种免疫球蛋白都有，但ＩｇＧ抗Ａ，Ｂ的放散能力比ＩｇＭ抗Ａ，Ｂ明显减低，其机制尚待进一步研究。还证明交叉反应性抗Ａ，Ｂ都能被血型物质中和。

交叉反应性抗体与临床型新生儿溶血病发生率相关性探讨

目的 :探讨脐带血抗体释放试验阳性结果中存在的交叉反应性抗体 (抗 C)与临床型 HDN发生率的相关性。方法 :用新生儿断脐带血进行 HDN血型血清学检验 ,对抗体释放试验结果阳性的 36 1例足月产健康新生儿按抗 C检验结果分组调查其临床型 HDN发生率。结果 :1在 192例母 /子血型 O/ A组合、抗体释放试验结果阳性的新生儿中 ,存在抗 C与不存在抗 C的新生儿临床型 HDN发生率无显著差别 ( P>0 .0 5 )。在 16 9例母 /子血型 O/ B组合、抗体释放试验结果阳性的的新生儿中 ,存在抗 C与不存在抗 C的新生儿临床型 HDN发生率亦无显著差别 ( P>0 .0 5 )。 2对照组中 ,被抗 C致敏的新生儿红细胞免疫性破坏的完全程度极显著多于临床型 HDN组的患儿 ( P<0 .0 1)。结论 :在脐带血抗体释放试验阳性结果中 ,抗 C的存在与临床型

交叉反应性抗体与新生儿溶血病的关系分析

目的在临床患者调查中,对新生儿溶血病"三项试验"检查、抗体放散试验阳性的调查中存在的交叉反应性抗体(抗C)与新生儿溶血病(HDN)的关系作初步探讨。方法对母婴血型不合、出生7 d内患高胆红素血症的新生儿静脉血进行HDN血型血清学检测,对抗体放散试验结果阳性的50例再进行抗C的检测。结果在80例母/子血型O/A组合中,抗体放散试验阳性23例,抗C存在6例;在78例母/子血型O/B组合中,放散试验阳性26例,抗C存在4例;另外,存在抗C与不存在抗C的患儿红细胞免疫性破坏的程度即患儿总胆红素水平几乎一致。结论在抗体放散试验阳性结果中,交叉反应性抗体不一定存在,即发生新生儿溶血病的患儿红细胞上不一定存在抗C;但患儿红细胞上有抗C的存在,临床即可诊断为新生儿溶血病。

肺炎链球菌疫苗候选抗原PspA异家族亚类间交叉反应评价

目的:观察肺炎链球菌DNA疫苗候选抗原肺炎链球菌表面蛋白A(PspA)在临床肺炎链球菌自然感染情况下家族分布及异家族亚类间抗原抗体交叉反应情况,探索肺炎链球菌PspA核酸疫苗的抗原组成形式。方法:采集我院42例临床侵入性肺炎链球菌感染菌株,及患者恢复期(第21±3天)的血清样本,同期确诊为非感染性疾病患者36例血清样本为对照组,细菌基因组特异性PCR及测序比对鉴定PspA家族分布,酶联免疫吸附法(ELISA)检测患者血清PspA抗体与PspA蛋白6种亚类抗原的交叉反应情况。结果:42株肺炎链球菌中以PspA家族Fam1-Clade2(31.0%)和Fam2-Clade3(47.6%)的菌株为优势分布,所有侵入性肺炎链球菌感染患者血清中针对PspA-Fam1特异性抗体水平高于针对PspA-Fam2的特异性抗体水平,血清PspA抗体与PspA蛋白6种亚类抗原的交叉反应发现异家族各亚类间交叉反应弱,但同家族亚类间显著交叉反应以Fam1-Clade1和Fam2-Clade3为优势。结论:肺炎链球菌PspA核酸疫苗靶抗原的组成时应同时包括产生高保护性抗体效价和强交叉反应的Fam1及Fam2的优势Clade亚类成分才能有效针对广泛的临床致病肺炎链球菌菌株感染的保护。

小鼠KCTD10特异性抗体制备及其在小鼠背神经上皮和背根神经节中的表达

KCTD10蛋白是一个TNF-α诱导表达的蛋白,能与DNA聚合酶δ的小亚基和PCNA相互作用。但其具体功能尚不清楚。为了研究KCTD10的功能,用小鼠KCTD10融合蛋白免疫新西兰大白兔获得兔抗鼠KCTD10多克隆抗体。由于小鼠KCTD10蛋白与小鼠PDIP1蛋白和TNFAIP1蛋白有较高的蛋白序列相似性,KCTD10抗体同PDIP1蛋白、TNFAIP1蛋白有抗体交叉反应。将同源蛋白PDIP1和TNFAIP1的部分降解片段与抗KCTD10血清在4℃下孵育3h从而消除非特异性抗体,成功地消除了KCTD10多克隆抗体对PDIP1蛋白和TNFAIP1蛋白的交叉反应。用此抗体做小鼠胚胎及胚胎切片的免疫组化,发现KCTD10蛋白在E12.5d的小鼠胚胎背根神经节以及神经管神经上皮中有明显的表达。该结果提示KCTD10可能在小鼠的神经管神经上皮和背根神经节发育中发挥作用。

土拨鼠肝炎病毒核心蛋白质粒的构建、原核表达及多克隆抗体的制备与鉴定

目的构建土拨鼠肝炎病毒核心蛋白质粒并进行原核表达、抗体制备。方法应用基因工程技术将编码截短型土拨鼠肝炎病毒核心蛋白(WHcAg1～149aa)的基因片段装入原核表达载体pQE60上,在JM109菌内进行诱导表达,使用切胶回收及Ni-NTA柱两种方法纯化目的蛋白。将纯化蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,并采用酶联免疫吸附实验、免疫组织化学及Western blot检测抗体的灵敏度和特异性。结果成功地构建了含截短型土拨鼠肝炎病毒核心区基因的质粒并获得表达,经纯化得到了分子量约为16.5kD的重组核心蛋白,免疫家兔获得了高效价的特异性多克隆抗体,而且与HBcAg有交叉反应。结论获得的重组截短型土拨鼠肝炎病毒核心抗原(1～149aa)纯度高,免疫原性强。获得的兔抗-WHc效价高,特异性好,与HBcAg有交叉反应。

交叉反应性糖类抗原决定簇抗体吸附剂在过敏原特异性IgE抗体检测中的应用分析

本研究旨在探讨抗交叉反应性糖类抗原决定簇IgE抗体(anti-CCD IgE)对过敏原特异性IgE(sIgE)抗体检测的干扰,以及anti-CCD IgE吸附剂在过敏原sIgE检测中的应用价值。采用横断面研究,回顾性分析2020年10月至2021年5月就诊于四川大学华西医院并以免疫印迹法行过敏原sIgE检测样本2636例,其中过敏原sIgE阳性样本共计709例。随机收集过敏原sIgE阳性且交叉反应性糖类抗原决定簇(cross-reactive carbohydrate determinants,CCD)指示带为阳性的患者血清样本共46例,sIgE阳性但CCD指示带阴性血清样本1例,使用anti-CCD IgE吸附剂处理这些样本,再次进行过敏原sIgE检测,分析吸附前、后两次检测结果的差异。结果显示,本研究收集样本期间过敏原检测样本的CCD指示带阳性率为2.6%(69/2636)。47例样本经anti-CCD IgE吸附剂处理后,阳性率排名前三的过敏原sIgE从树组合2(柳树/杨树/榆树)、普通豚草、花生变更为尘螨组合、蟑螂和蟹。46例样本的anti-CCD IgE阳性结果全部转阴,sIgE抗体阳性总量下降了62.8%;阳性强度等级≥2的sIgE抗体经anti-CCD IgE吸附剂处理后阳性率显著降低,其中普通豚草阳性率降低达96.2%。阳性样本结果呈多sIgE抗体不同幅度下降,最多涉及11种抗体,最大降幅4级,强阳性(阳性强度等级≥4)sIgE抗体也有较高的转阴比例(25.0%~100%)。约60%样本的阳性sIgE抗体减少2种以上,17.4%样本的sIgE抗体转为全阴。1例anti-CCD IgE阴性样本处理后过敏原sIgE检测结果无变化。综上,普通豚草、葎草、树木组合2(柳树/杨树/榆树)等sIgE易受anti-CCD IgE影响,导致假阳性,经anti-CCD IgE吸附剂处理样本后可明显减少因anti-CCD IgE干扰引起的假阳性;anti-CCD IgE阳性样本使用anti-CCD IgE吸附剂进行预处理很有必要,可使实验室结果更准确,为过敏性疾病的诊断和预防提供参考依据。

禽IBV结构蛋白的免疫反应

用活的和灭活的传染性支气管炎病毒（IBV）接种鸡,然后用ELISA和WB测定单个蛋白S1、S2、M和N的抗体反应。无论是活病毒和灭活病毒接种鸡。所有四种结构蛋白均可诱导产生抗体反应。用活的IBV免疫后,S1、S2和N蛋白产生相似的抗体滴度。而M蛋白的抗体滴度明显偏低,S1、S2和N蛋白ELISA抗体出现的时间和发展过程是相似的。接种后2周首次检出,与病毒中和抗体的出现是一致的。M蛋白的抗体接种4周后首次检出。14日龄接种S1、S2

健康志愿者体内HCoV特异性中和抗体与SARS-CoV-2特异性中和抗体的相关性

目的分析健康人体内HCoV(人新型冠状病毒)特异性中和抗体与SARS-CoV-2(严重急性呼吸综合征冠状病毒2号)特异性中和抗体滴度的相关性。方法将自愿参组的7位健康志愿者作为研究对象,采用ELISA法检测健康志愿者体内HCoV特异性中和抗体及SARS-CoV-2特异性中和抗体滴度;采用方差分析及t检验分析了不同病毒的特异性中和抗体滴度之间的差异,同时采用线性拟合分析了不同中和抗体之间的相关性。结果健康志愿者体内HCoV特异性中和抗体滴度明显高于SARS-CoV-2特异性中和抗体(P<0.0001),且HCoV-HKU1(人冠状病毒HKU1株)特异性中和抗体与SARS-CoV-2特异性中和抗体之间存在正相关性(P<0.05)。结论健康志愿者体内HCoV特异性中和抗体与SARS-CoV-2特异性中和抗体存在正相关,提示HCoV感染可能对SARS-CoV-2具有抗体交叉反应。

登革病毒与寨卡病毒交叉抗体及其引起抗体依赖增强效应的研究进展

黄病毒的大量流行给全世界带来了许多紧迫的挑战,登革病毒(DENV)和寨卡病毒(ZIKV)同属于黄病毒属黄病毒科,人体在相继感染DENV和ZIKV后,可产生交叉反应性抗体,并出现抗体依赖增强(ADE)效应,增加再次感染的严重程度,甚至产生致命的威胁。目前全球还没有消除ADE效应的新型ZIKV和DENV疫苗。因此,关于DENV和ZIKV交叉反应抗体的相关情况及其引起ADE的机制非常值得关注。本文探讨了DENV和ZIKV的流行情况、感染机制,阐述抗体的交叉反应性及交叉抗体引起ADE的机制,为未来这2种黄病毒疫苗的开发、合理设计有效的治疗药物提供新思路。

肠道病毒71型与脊髓灰质炎病毒抗体交叉反应性研究

通过临床血清样本研究及实验动物验证,探讨肠道病毒71型(EV71)与脊髓灰质炎病毒(PV)之间的抗体交叉反应性。以酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测健康儿童血清中IgG型抗体与EV71及PV的反应性;用原核表达与亲和纯化等方法分别获得EV71和PV的衣壳蛋白VP1及非结构蛋白3C;将PV-VP1、EV71-VP1、EV71灭活疫苗及PV灭活疫苗(IPV)分别经皮下免疫BALB/c小鼠制得免疫血清,以蛋白免疫印迹实验分别研究PV-VP1或EV71-VP1小鼠阳性血清与EV71-VP1和PV-VP1的反应情况,进一步以竞争ELISA试验分别研究EV71-VP1对PV-VP1与其特异性免疫血清特异结合的影响。微量中和试验研究PV阳性抗血清对EV71的体外中和效应。结果:已接种PV疫苗但未曾感染EV71的健康儿童的IgG抗体与EV71有较高的反应性,且针对EV71及PV两种病毒的IgG抗体的相对含量成正相关;蛋白免疫印迹实验显示PV-VP1与EV71-VP1免疫的小鼠抗血清中存在交叉抗体,竞争ELISA试验进一步表明EV71-VP1蛋白能明显抑制PV-VP1与其特异性免疫血清抗体的结合,反之亦然。但中和实验揭示PV阳性血清在体外不能中和EV71病毒。PV之间存在大量交叉反应性抗体,但PV免疫后产生的与EV71交叉反应的抗体是非中和性质抗体。非中和抗体可能通过免疫调理效应在EV71病毒的致病的过程中发挥重要作用。

流感疫苗接种引起发作性睡病

在2009年全球A(H1N1)流感病毒大流行期间,多种A(H1N1)大流行流感疫苗被批准应用。一种以AS03-为佐剂的A(H1N1)大流行流感疫苗(Pandemrix)被应用于47个国家,达3 100万剂。在应用一年后,开始出现接种Pandemrix疫苗所引起的发作性睡病的报道。发作性睡病是一种尚无治疗方法的疾病,主要症状表现是患者在白天常发生不可自控的睡眠。报道首先来自于瑞士,然后丹麦,继而欧洲的许多国家。迄今为止,已有1 300多人因接种Pandemrix疫苗发生了发作性睡病,生产Pandemrix疫苗的葛兰素史克(Glaxo Smith-Kline,GSK)公司已承认了两者间的关联。2015年7月1日,科学转化医学杂志的一篇文章揭示Pandemrix疫苗中的流感病毒核蛋白刺激所产生的抗体可以和人下丘脑泌素受体2发生交叉反应,表明Pandemrix疫苗激发的自身免疫反应是其引起发作性睡病的主因,提示有必要显著减少或去除流感病毒疫苗中的流感病毒核蛋白。

改进兔抗BCG血清的特异性以检测TB抗原

本研究以免疫印迹方法证实兔抗BCG与其它细菌抗原(金葡菌、表葡菌,克雷伯氏菌、大肠杆菌)的交叉反应,并以亲和吸附方法将金葡菌交叉反应抗体从市售抗BCG中加以去除。这样在检测脑脊液及其它样本中TB抗原时的假阳性率就可以降低,兔抗BCG的特异性将会增加。我们建立了竞争抑制的ELlSA方法,可以检测ng水平的分枝杆菌的抗原,

树鼩细胞免疫表型分析研究的展望

细胞免疫表型分析广泛地被应用于人类重大疾病的临床诊断和动物模型的研究。树鼩作为一种新兴的实验动物,引起了医学生物界的密切关注。然而,由于树鼩的商业化试剂的缺乏,限制了我们对树鼩疾病模型机制的深入研究,尤其是对树鼩细胞免疫表型的分析。抗体是限制树鼩细胞免疫表型分析发展的关键因素。研究表明,利用"抗体交叉反应性",从已有的和/或商业化的抗体中完全有可能筛选出针对新的种属某些相似抗原的抗体。这种快速、简洁的方法不仅为我们迅速和有效地建立树鼩细胞免疫表型分析平台提供了新的思路,也为促进树鼩模型的应用打下了坚实的基础。

洛阳市1例华支睾吸虫病误诊误治为弓形虫病的调查报告

华支睾吸虫病是由华支睾吸虫感染人和动物引起肝胆病变的一种食源性寄生虫病,多由于人和动物生食或半生食淡水鱼肉引起,在洛阳地区较为少见,临床表现以消化系统病变为主。本文报道了1例33岁男性华支睾吸虫病患者,发病前有食用生鱼片的流行病学史,临床症状和体征以腹部不适和肝胆系统损害为主,淋巴结肿大,实验室检查表现为肝功能异常,嗜酸细胞百分比、嗜酸细胞计数升高,C反应蛋白升高。采用肝吸虫抗体检查,但是因和弓形虫病、肺吸虫病存在抗体交叉反应,造成首次住院误诊误治。患者经吡喹酮片治疗后痊愈,出院38 d后复查,各项指标正常。建议对华支睾吸虫病患者采用诊断性治疗,吡喹酮片是治疗华支睾吸虫的特效药。借此病例报道提醒临床医生提高对华支睾吸虫病认识的敏感性,以减少漏诊和误诊。