蛋白质在离子交换介质中的动态吸附性能

研究了离子交换介质 CM-Sepharose FF 对几种不同的蛋白质——溶菌酶、木瓜蛋白酶、牛血清蛋白的动态吸附性能,考察了pH值、溶液粘度、初始蛋白浓度及吸附剂量等因素的影响。结果表明,这些参数会对吸附剂的动态吸附性能产生不同程度的影响,而这些蛋白质也都显示了相似的规律。采用两相阻力模型描述了蛋白质在离子交换介质的动态吸附性能,计算得到了蛋白质在吸附剂颗粒中的扩散系数,有助于进一步研究蛋白质吸附过程的传质现象。

不同配基密度离子交换介质对CHO表达的乙肝抗原纯化的影响

中华仓鼠卵巢细胞(CHO)表达的重组乙肝病毒表面抗原(HBs Ag)为糖基化蛋白。本文主要采用多步层析法,在离子交换层析分别使用1批进口厂家A和2批国产厂家B(配基密度各不相同)的DEAE离子介质(均为交联琼脂糖含量6%,配基密度范围110-160μmol/ml)。通过对比发现,在范围内波动的不同配基密度,抗原最适洗脱盐浓度不同。配基密度越大,所需洗脱盐浓度越高。需要精确控制每种配基密度的洗脱盐浓度,在保证质量的情况下,提高抗原收率。

接枝多胺聚合物制备大孔阴离子交换色谱介质及其蛋白吸附行为评价

以环氧活化聚甲基丙烯酸酯大孔微球(FastSep-epoxy)为基质,通过接枝聚(烯丙基胺)(PAA)制备了大孔阴离子交换色谱介质(FastSep-PAA)。考察了介质的合成条件对离子交换容量(IC)及蛋白结合容量的影响,发现IC随PAA浓度、反应时间和溶液pH的增加均表现为增长趋势;同时结合蛋白吸附容量的变化选择了最优合成条件。通过扫描电子显微镜观察介质的表面形貌,发现其孔隙连通性较好,且接枝前后介质孔道结构无明显变化,PAA配基密度对介质结构无明显影响。此外,通过压汞法和氮气吸附法测定接枝前后不同介质的孔径尺寸和孔径分布情况,并考察该类介质的孔径与蛋白吸附行为的关系,发现其蛋白结合容量未出现随介质孔径尺寸增加而显著下降的现象,且孔径尺寸增加更有利于蛋白在介质内部传质。在126 cm/h的流速下FastSep-PAA介质的原始孔径(即FastSep-epoxy的孔径)为400 nm时的蛋白动态结合容量(DBC)最高(70.3 g/L),该孔径下介质比表面积大,蛋白可吸附位点较多;原始孔径为700 nm及以下的介质蛋白DBC均随流速增加而均有一定下降;原始孔径为1000 nm的介质蛋白DBC几乎不受流速影响,流速由126 cm/h增加至628 cm/h时蛋白DBC仅下降3.5%,且在628 cm/h的流速下能保持57.7 g/L,蛋白分子在该孔径下的扩散速率受限较小,传质性能优异,这一特性表明该类大孔聚合物阴离子交换色谱介质在蛋白高通量分离中具有较大的优势。

“Grafting from”法制备高载量大孔弱阳离子交换层析介质

针对大孔聚合物层析介质孔径大、比表面积低而导致的蛋白结合容量低的问题,采用“graftingfrom”策略,以大孔聚丙烯酸酯微球为基质,通过氧化还原引发甲基丙烯酸在微球表面接枝聚合,制备了高载量弱阳离子交换层析介质.研究了单体浓度、过硫酸钾浓度及反应温度等因素对蛋白结合容量的影响.所得介质的蛋白静态结合容量和动态结合容量分别达到252.21和157.25mg/mL;同时发现具有一定离子交换容量的该类介质能够在0.2 mol/L NaCl缓冲液中保持100 mg/mL的蛋白结合容量.将该层析介质用于鸡卵清中溶菌酶的纯化,获得了较高的纯化效率.

CT数字影像介质交换和联机通讯的实现

对医学数字图像标准进行了讨论，在此基础上利用磁介质交换方法和建立PC机与CT系统的网络通讯方法，成功地获取CT原始数字图像，通过将原CT格式转换为DICOM标准格式。

金电极介质交换-阴极伏安法对抗坏血酸的测定

提出了一种测定抗坏血酸的新方法。采用金电极作为工作电极，在0．20mol／L的NaOH溶液中，于0．8V电解50s后，改换介质，在含抗坏血酸的试液中反应约10s，再放入0．20mol／L的NaOH溶液中向阴极化方向扫描，可在-0．1V产生灵敏的还原峰，加入抗坏血酸后峰高下降，且下降的幅度与抗坏血酸的质量浓度成正比。抗坏血酸质量浓度在8．0～264mg／L范围内与还原峰电流△/呈良好的线性关系。检出限为3．6mg／L。介质交换法提高了方法的选择性，样品测试中，常见的干扰物质如多巴胺、尿酸等不干扰测定。方法用于血液和饮料中抗坏血酸的测定，结果与国标法相吻合。

流动电解池-介质交换法分离重叠溶出峰的研究——痕量铅、锡的同时测定

本文采用流通电解池一介质交换方法研究了铅和锡在酸性介质中的差示脉冲阳极溶出伏安行为,在流动的含有样品的盐酸溶液中预电解富集,而在静止的不含样品的草酸溶液中溶出,其△Ep≥90 mV,波形完好。确定了同时测定痕量级铅、锡的最佳条件,样品分析结果表明,方法准确、简便、快速、灵敏。

交换耦合复合介质及研究进展

交换耦合复合介质有望解决现有磁记录材料面临的三难问题,是非常有希望的下一代高密度磁记录介质。本文介绍了交换耦合复合介质的概念、物理原理以及交换耦合复合介质研究中的一些理论问题以及研究进展。在各类交换耦合复合介质中,多层纳米线被广泛看好。本文对多层纳米线中畴壁的特性、畴壁的运动以及基于畴壁运动的畴壁辅助磁记录模式的研究进行了重点介绍。

流通池介质交换DPASV法同时测定铜铋锑铊铅锡

本实验用流通池介质交换技术有效的解决了酸性介质中Ｃｕ（Ⅱ）、Ｂｉ（Ⅲ）、Ｓｂ（Ⅲ）、Ｔｉ（Ⅰ）、Ｐｂ（Ⅱ）、Ｓｎ（Ⅳ）阳极溶出峰的重叠，进而实现了六种金属离子的同时测定。

共聚物接枝蛋白离子交换色谱介质制备及性能

高容量蛋白质色谱介质是色谱过程高效化的材料基础和重要前提。采用原子转移自由基聚合(ATRP)技术,以甲基丙烯酸3-磺酸丙酯钾和甲基丙烯酸甲酯(MMA)为单体化合物合成了多种无规共聚物接枝离子交换色谱介质,并对其蛋白质吸附性能进行研究。单体总浓度一定情况下共聚物接枝色谱介质孔道半径(r_(pore))随MMA浓度升高而增大,反映出接枝共聚物链渐趋塌陷的特征。蛋白质吸附结果表明,溶菌酶吸附容量取决于介质的离子交换容量;而抗体吸附容量则与r_(pore)及相应的聚合物层厚度变化密切相关。随着聚合物层厚度的增大,聚合物层对抗体的空间排阻作用增强,抗体吸附容量下降。此外,引入MMA优化共聚物分子链可显著提高蛋白质吸附量,在SEP-g S30/M30介质中抗体和溶菌酶的饱和吸附量分别达到237 mg·g^(-1)和380 mg·g^(-1)。无规共聚物接枝离子交换色谱介质孔道内聚合物层厚度和蛋白质吸附也受无机盐浓度调控。

微型内外介质交换机构仿真、制造及试验研究

首次在空气涡轮起动机上探索微型内外介质交换机构的设计与使用,在30 mm×Φ14 mm圆柱空间内将迷宫式油气分离通道、特斯拉阀和单向球阀三种结构相结合,采用CATIA软件建立三维模型,利用ICEM CFD对内部流场进行网格划分,使用Fluent软件进行流场模拟,并分析其结果。利用3D打印增材制造技术加工该结构,并给出技术路线,最终依靠试验验证该结构的有效性,为后续型号设计提供有价值的数据。

为企业网络提供任何介质交换的OmniSwitch

为企业网络提供任何介质交换的ＯｍｎｉＳｗｉｔｃｈＯｍｎｉＳｗｉｔｃｈ（多层智能化交换机）是一种先进的多层交换平台，能够提供集成的ＬＡＮ和ＡＴＭ交换、ＷＡＮ连接、高速路由、虚拟网和ＩＰ防火墙。由于在设计上把可扩展性和性能作为目的，网络管理者能够在Ｏｍｎ...

钠介质热交换器九管样机模态试验和仿真研究

热交换器的动态特性与电站的安全性能和运行效率密切相关,为考核流体诱发结构振动,本文通过九管样机进行模态试验获得空气、水环境中换热管的固有振动特性,得到空气和水环境中换热管基频分别为102.410 Hz和77.349 Hz,然后利用试验数据推导出液钠介质中换热管的基频修正值为74.711 Hz;最后利用有限元分析方法验证了试验结果的高可靠性,试验与仿真计算的前2阶固有频率结果相对误差在1%以内,仿真分析结果可作为结构设计和优化阶段的重要参考。

十字型微通道制备粒径均一的纤维素层析介质

为了满足层析介质对粒径单分散的要求,利用十字型微通道的聚焦效应,形成粒径均一的纤维素微液滴,经固化成纤维素微球,再偶联配基制成了纤维素层析介质。以离子液体1-乙基-3-甲基咪唑甲基磷酸直接溶解微晶纤维素为水相,葵花籽油为油相,考察了微通道内微液滴的形成条件,优化了纤维素浓度、分散剂浓度、油水两相流速等因素,得到粒径约100μm的纤维素微液滴,CV值小于0.2。微液滴固化再生,得到球形度良好的纤维素微球,湿真密度1.019g.ml-1,孔度94.6%,体均粒径105.5μm;进一步偶联DEAE配基,制得了离子交换层析介质,离子交换容量为123.3μmol.g-1,牛血清白蛋白的饱和吸附容量Qm达到220mg.g-1,有效扩散系数De为1.8×10-11 m2.s-1,体现出较好的蛋白质吸附性能。

复乳法制备大孔琼脂糖分离介质与疫苗结合性能研究

大孔分离介质在分离纯化特别是超大生物分子分离纯化领域具有十分重要的应用意义。受材料性质和制备技术所限制,大孔分离介质以聚合物材料最为常见,针对琼脂糖的大孔分离介质较为少见。通过复乳法制备大孔琼脂糖微球,研究制备条件对微球形貌与成孔情况以及粒径与分布等的影响,发现该微球具备微米级超大孔结构,且制备条件对孔道结构的影响呈现一定规律,琼脂糖溶液浓度、内/外油相与水相比例、初乳转速和成球转速等都对成孔性至关重要。激光共聚焦显微镜实验结果表明,衍生后的大孔琼脂糖分离介质对乙肝表面抗原具有良好的结合能力,使其能够完全进入微球内部。与传统琼脂糖介质相比,大孔琼脂糖介质能够更快速、充分结合大分子疫苗,在超大分子分离纯化领域应用前景广阔。

大尺寸弱阴离子交换晶胶层析一步法分离ATP的实验研究

使用一种新型的大尺寸弱阴离子交换晶胶柱从酵母细胞发酵液中一步分离纯化广泛应用于临床治疗的高能化合物三磷酸腺苷(ATP)。该晶胶柱高150mm,直径140mm,柱体体积达到2300mL。实验测定了晶胶柱的孔隙率和等板高度等基本性能参数。层析过程以去离子水为冲洗液,分别用0.03、0.4和1mol·L-1NaCl溶液在2cm·min-1流速下进行洗脱。发现0.03mol·L-1NaCl溶液能把大部分杂质洗脱,0.4mol·L-1NaCl溶液洗脱后能获得纯度较高的ATP。洗脱下来的ATP样品通过高效液相色谱(HPLC)定量分析,回收的ATP纯度达95%～97%,总回收率49.1%。与其它已有方法相比,本法耗时少,工艺简单,降低了ATP变性的风险;在层析过程中以去离子水代替酸液作为冲洗剂和洗脱液溶剂,降低分离过程成本。

CoPt-TiO_2/Co-TiO_2交换耦合磁记录薄膜的研究

建立包含微结构的微磁学模型,研究软磁层的磁晶各向异性场、软磁层的饱和磁化强度等本征磁性参数对CoPt-TiO_2(16 nm)/Co-TiO_2(4 nm)交换耦合磁记录薄膜磁性的影响。计算得到的CoPt-TiO_2(16 nm)的硬磁薄膜易磁化轴的磁滞回线的矫顽力为6.1 kOe,矩形度为0.98。在交换耦合介质中,当软磁层的厚度δ从0 nm增加到4 nm时,易磁化轴的矫顽力从6.1 kOe减小到4.9 kOe。同时发现,软磁层越软(软磁层的磁晶各向异性场越小,饱和磁化强度越大)时,整个薄膜的矫顽力也越小。

表面接枝法制备大孔强阴离子交换层析介质

目的:开发一种表面接枝聚合制备大孔阴离子交换层析介质的方法,并对该类介质的色谱性能进行评价研究。方法:以聚丙烯酸酯类大孔微球为基质,通过氧化还原引发N,N,N-三甲基-3-(2-甲基烯丙酰氨基)-1-氯化丙铵接枝聚合的方法制备了一种大孔阴离子层析介质;通过单因素实验获得最佳制备工艺条件,考察各反应因素对该介质色谱性能的影响;对蛋白在吸附前后的酯酶样活性进行测定,判断介质与蛋白分子相互作用后活性变化;在不同流速条件下测试介质的耐压性能;使用1 mol/L NaOH溶液测试介质的稳定性能;将介质置于非吸附条件下对蛋白进行吸附,测试其非特异性吸附效果;通过计算不同流速下介质填充柱的塔板高度来研究其柱效,并使用阴离子交换层析法从鸡蛋清内提取高纯度蛋白。结果:在最佳制备条件下,介质蛋白静态结合容量最高可达138.94 mg/mL,介质的蛋白活性回收率可达98%,143~574 cm/h线速度范围内介质的蛋白动态结合容量从99.234 mg/mL减少至93.981 mg/mL;在143~3871 cm/h线速度范围内,柱压线性增加;通过扫描电子显微镜观察介质的表面形貌,发现接枝对介质的贯通孔径无影响;当洗脱液流速为535 cm/h时,其最小塔板高度为0.0599 mm;该阴离子交换介质在非吸附条件下,对牛血清白蛋白的吸附量为0.136 mg/mL,经过1 mol/L NaOH溶液浸泡96 h后,其蛋白静态结合容量仅下降2.4%;经该介质一步纯化鸡蛋清蛋白,可获得较高纯度的溶菌酶、卵白蛋白和卵铁传递蛋白。结论:介质具有较好的传质性能、较高的蛋白活性回收率和较低的非特异性吸附值,并且具有良好的稳定性和刚性。相较于传统介质,该类介质在蛋白高通量分离中展现了较大潜力。