交联琼脂糖凝胶表面修饰对其性状影响的研究

采用活化剂羰基二咪唑(CD I)活化琼脂糖凝胶并对其进行表面修饰,考察活化密度与CDI用量的关系和修饰前后凝胶耐压能力、粒径、外观形态、含水率等的变化。结果显示,琼脂糖表面70%的羟基可被CDI活化,最大活化密度可达4.4 mmol/g干胶,且在一定范围内活化密度与活化剂的加入量成正比。连接了不同分子的凝胶因为氮元素或芳环的引入导致凝胶内部以及凝胶与水分子所形成氢键的强度的变化,使其耐压能力有所提高,平均粒径增大,孔径普遍缩小,固形物的含量有所增加。且上述变化与修饰密度相关,较高的修饰密度下凝胶的各项参数都会发生较大改变。

国产与进口商品化交联琼脂糖凝胶性能对比

从多个方面测定、比较Bio-sep CL 6B与Sepharose CL-6B两种商品化交联琼脂糖凝胶的性能。采用不同分辨率显微镜观察凝胶外观形态、进行耐热试验、分析有机元素及金属元素含量，以及测定二者耐压、流速、色谱特性等。结果表明，两种产品外观均为乳白色球状颗粒，球形形态完好，粒径范围在30—150μm具有较好的分布；均可耐受120℃下30min热处理；有机元素碳、氢、氮以及其它微量金属元素含量相近；两种产品最大耐压都在80kPa以上，最大流速可达7．0mL／min。分离特性测定表明，两种产品色谱分离特性基本相同，对分子量在10^4—10^6道尔顿之间的蛋白能实现较好的分离。

琼脂糖凝胶的N-羟基丁二酰亚胺修饰及其性能鉴定

采用烯丙基缩水甘油醚对国产交联琼脂糖凝胶进行活化,与巯基乙酸反应后,偶联N-羟基丁二酰亚胺(NHS),得到连接臂长度为10个原子、具有对氨基高度特异性的琼脂糖凝胶活化中间体.通过控制琼脂糖凝胶活化双键的量,可使NHS的修饰密度处在较宽范围(20～150μmol/mL),有效减少介质上杂基团的引入并有利于配基密度的设计.活化过程对介质的理化性能无明显影响,活化介质在30min内即可完成对L-苯丙氨酸的偶联,效率在90%以上,且在多种溶液中贮藏30d后配基稳定性良好,几乎无泄露.