产γ-氨基丁酸乳酸菌的分离筛选

从土壤、泡菜、酸奶等样品中分离、筛选出产γ-氨基丁酸(GABA)的乳酸菌,获得较高产GABA的乳酸菌6#菌株,利用HPLC-ELSD检测法精确测定出乳酸菌6#发酵样品中GABA的含量达到0.463g/L,并对此菌株进行了初步的鉴定。

产γ-氨基丁酸乳酸菌的分离鉴定及发酵条件优化

从四川泡菜水中分离筛选出一株产γ-氨基丁酸(GABA)能力较强的乳酸菌W1-9,根据菌落和个体形态、生理生化指标及16S r DNA序列的系统鉴定,菌株W1-9为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。菌株W1-9在含10 g/L谷氨酸(Glu)的MRS培养基中培养3 d,可产生2.18 g/L GABA。通过对菌株发酵培养基及发酵条件优化,结果表明:以黄瓜汁为发酵培养基,初始p H 5.5,底物谷氨酸钠(MSG)添加量12 g/L,菌液接种量1.2%,在该条件下GABA产量达到7.62 g/L。

产γ-氨基丁酸乳酸菌的筛选及诱变育种

利用乳酸菌分离培养基从酸菜汁中分离菌株。经过初筛、复筛后得到的菌株Lp-Lw-131有较好的产γ-氨基丁酸(GABA)能力。对菌株进行形态学鉴定和生理生化实验确定该菌为植物乳杆菌,编号为Lp-Lw-131。利用菌株体内的谷氨酸脱羧酶(GAD)将L-谷氨酸钠脱羧转化成GABA,用比色法测定GABA的产量为0.917g/L。以Lp-Lw-131为出发菌株进行紫外线和硫酸二乙酯(DES)诱变,以致死率为标准确定最佳诱变条件为:紫外照射距离30cm,照射时间90s;DES体积分数为25%醇溶液,处理时间20min,诱变后获得一株突变株Lp-Lw-131-34。连续传代10次后遗传性状稳定,平均GABA产量为1.815g/L,是出发菌株的1.979倍。

酸菜中高产γ-氨基丁酸乳酸菌的筛选和鉴定

从酸菜中分离筛选出产γ-氨基丁酸(GABA)乳酸菌18株,采用改良纸层析结合高效液相色谱法测定,获得1株高产乳酸菌菌株Lb-2,该Lb-2菌株在含10g/L谷氨酸钠的TYG培养基中静置培养48h,发酵液中GABA含量可达13.4g/L。根据乳酸菌的形态特征、生理生化特征和16S rDNA基因序列分析鉴定Lb-2菌株为乳杆菌属(Lactobacillus)的短乳杆菌(Lactobacillus brevis)。

水牛乳中高产γ-氨基丁酸乳酸菌的筛选与鉴定

从新鲜水牛乳中筛选出三株高产γ-氨基丁酸(GABA)的菌株G-24、G-25、G-29。通过菌株形态特征、生理生化特征和16S r DNA序列分析,鉴定这三株菌均为乳酸乳球菌乳酸亚种(Lactococcus lactis subsp.lactis),将其分别接种于10 m L含0.01 g/m L谷氨酸的MRS液体培养基中,37℃培养72 h,其产γ-氨基丁酸含量均可达60 mg/100 m L以上。

产γ-氨基丁酸乳酸菌的筛选及发酵条件初步优化

以白酒糟醅和黄浆水为分离源,筛选出3株高产γ-氨基丁酸的乳酸菌菌株,其中编号为J97的乳酸菌株γ-氨基丁酸产量最高,经鉴定该菌株为乳酸短杆菌。通过对J97号菌株发酵条件的正交实验优化,确定其最佳发酵条件为:初始pH 6.5,发酵温度32℃,发酵时间60h,接种量5%,在此条件下γ-氨基丁酸产量达到11.5g/L。

鲜奶中产γ-氨基丁酸乳酸菌株的筛选与鉴定

从新鲜牛奶中筛选高产γ-氨基丁酸(GABA)的乳酸菌株fmbl12-4,通过形态特征、生理生化特征和16SrDNA序列分析,鉴定菌株为乳酸乳球菌乳酸亚种(Lactococcus lactis subsp.lactis)。当fmbl12-4的湿菌体与100mmol/LL-谷氨酸钠溶液(L-MSG)按1:20(m/V)混合,于30℃、100r/min振荡反应24h,转化液中GABA浓度达到82.36mmol/L。在质量浓度为2.5g/100mL L-MSG的MRS培养基中培养6d,GABA质量浓度达到4.68g/L。

产γ-氨基丁酸乳酸菌的筛选及初步鉴定

γ-氨基丁酸是哺乳动物体内的一种抑制性神经递质,具有许多重要的生理功能。利用MRS培养基从自然生境中分离了1000余株细菌,经纸层析和HPLC检测,发现其中一株能转化谷氨酸钠生成GABA,产量为4.84g/L;转化产物通过HPLC-MS得到了证实。通过形态特征和生化特性鉴定,初步判断该菌为乳酸菌。

高产γ-氨基丁酸乳酸菌菌株的筛选及诱变育种研究

以乳酸菌作为出发菌株,将其接入豆浆(大豆水=1 8)进行发酵,根据发酵过程中γ-氨基丁酸(GABA)产量,筛选出GABA的高产乳酸菌菌株,然后利用紫外线对高产菌株进行诱变处理,筛选得到稳定高产GABA突变菌株。结果表明,保加利亚乳杆菌L2为高产GABA乳酸菌菌株,GABA产量达到1.066 g.L-1。对L2进行紫外诱变处理的最佳照射时间为50 s,在此照射时间下,获得高产GABA突变菌株L2-4,其在含有1%L-谷氨酸的改良MRS培养基和豆浆中的GABA产量分别为4.235和1.394 g.L-1,比原菌株的GABA产量分别提高了25.63%和30.77%。

酸菜中高产γ-氨基丁酸乳酸菌的筛选

从酸菜中筛选到2株相对高产γ-氨基丁酸的乳酸菌（GABA）菌株，酸菜1号和酸菜3号。酸菜1号初步鉴定为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）；酸菜3号初步鉴定为乳酸链球菌（Streptococcus lactis）。实验还对酸菜1号菌株的培养基和培养条件进行了优化：用蔗糖为碳源、蛋白胨和牛肉膏作为复合氮源、培养基初始pH为6．0、培养温度为30-34℃时该菌株发酵产GABA的量最多，发酵过程中的振荡培养（100r／min）和静置培养对GABA的产量无明显影响；在最佳培养基组合和发酵条件下，发酵液中GABA含量可达4g／L以上，表明利用乳酸菌进行富含GABA食品的生产是可行的。

产γ-氨基丁酸乳酸菌的分离及筛选

从土壤、泡菜、酸奶等样品中分离、筛选出产γ-氨基丁酸的乳酸菌,并进行了初步的鉴定。

产γ-氨基丁酸乳酸菌及其应用

γ-氨基丁酸(GABA)是一种在自然界广泛存在的非蛋白质氨基酸,具有降血压、镇静安神、免疫调节等多种生理功能。许多乳酸菌能够利用其谷氨酸脱羧酶催化谷氨酸及其盐类产生GABA。产GABA的乳酸菌菌株种类较多且产量各异,主要来源于泡菜、发酵乳、干酪等酸性食品。谷氨酸脱羧酶直接决定乳酸菌合成GABA的能力,该酶的活性受到底物、辅酶、发酵pH值和发酵时间等多种因素的影响。以高产GABA的乳酸菌作为发酵剂研制富含GABA的发酵乳制品是对乳酸菌益生功能的进一步利用,具有较为广阔的市场价值。因此筛选高产GABA的乳酸菌不仅有利于相关产品的开发,也是研究产GABA乳酸菌相关性质的重要基础。

传统乳制品中产γ-氨基丁酸乳酸菌的筛选

采用薄层层析法和高效液相色谱法,对分离自传统发酵乳制品中的乳酸菌进行了γ-氨基丁酸生成能力的分析。薄层层析结果显示,在质量浓度为10 g/L的L-谷氨酸钠(L-MSG)的TYG液体培养基中,180株乳酸菌中有20株菌可生成γ-氨基丁酸;通过高效液相色谱法定量分析,获得9株生成量较高的菌株,分别为L.lacticsubsp.lactis WH11-1(2.477 g/L)、M10-4-3(1.405 g/L)、L.raffinolactis WZ20-2(1.132 g/L)、L.lacticsubsp.lactis M11-3(1.115 g/L)、L.lacticsubsp.lactis WZ1-2(1.006 g/L),L.plantarum S1-1(0.581 g/L)、L.plan-tarum M5-1-1(0.310 g/L)、L.plantarum M11-2-1(0.225 g/L)和L.salivarius M11-1(0.0.211 g/L)。该项研究为富含γ-氨基丁酸功能性乳制品的开发奠定了基础。

寒地黑土中产γ-氨基丁酸乳酸菌筛选及发酵培养基优化

利用MRS培养基分别从牡丹江、漠河、五常的寒地黑土中筛选产γ-氨基丁酸(GABA)的乳酸菌菌株,对其做形态学观察和生理生化鉴定,并进行了发酵培养基组成的优化实验,分析比较不同碳源、氮源、碳氮比、初始p H和L-谷氨酸浓度对产GABA的影响。结果表明:共筛出五株菌株,分别编号为SbO001、SbO002、SbO003、SbO004、SbO005,可以将五株菌株初步鉴定为链球菌科(Streptococcaceae)。当发酵培养基组分碳源为葡萄糖,氮源为硫酸铵,碳氮比1∶1,初始pH为5.5,底物为1%的L-谷氨酸时,菌株产GABA的能力较好,为1.112 g/L。本实验将为寒地黑土中产GABA乳酸菌的筛选提供一定的理论依据。

高产γ-氨基丁酸乳酸菌菌株的诱变选育与鉴定

本文以从内蒙古传统发酵食品中分离的80株乳酸菌为研究对象,在GYP培养基中进行高产γ-氨基丁酸(GABA)菌株的筛选后,利用紫外线进行诱变处理,得到GABA突变菌株,并对其进行了菌种鉴定。结果表明,从80株供试乳酸菌中筛选出4株高产γ-氨基丁酸的菌株,再经紫外诱变后得到1株高产突变菌株US3-3。该菌株紫外诱变后,其γ-氨基丁酸含量为2.482 g/L,是诱变前提高1.9倍,并对其多次传代稳定性较好,经16S r DNA序列分析,鉴定为乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici)。

发酵鹰嘴豆乳产γ-氨基丁酸乳酸菌的复合诱变选育

采用复合诱变的方式提高乳酸菌发酵鹰嘴豆乳产γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)的能力,为开发富含GABA的功能性食品打下基础。以植物乳杆菌M-6作为出发菌株,分别进行紫外、紫外-氯化锂复合诱变,确定紫外照射最佳时间为240 s,氯化锂最佳质量分数为1.25%。采用谷氨酸钠(monosodium glutamate,MSG)平板法、纸层析法、berthelot比色法和高效液相色谱法对突变株的产GABA特性进行检测,筛选到21株GABA产量高于出发菌株的菌株,其中紫外-氯化锂诱变所得突变株UL-4产量最高,在MRSG培养基(含1%MSG)和鹰嘴豆乳(含0.2%MSG)里的产量分别为899.27 mg/L和369.53 mg/L,比出发菌株分别提高64.25%和30.46%,具有良好的遗传稳定性。

豆豉中产γ-氨基丁酸乳酸菌的分离鉴定

为从豆豉中获得产γ-氨基丁酸的乳酸菌,采用高效液相色谱法对从广西黄姚豆豉中分离筛选得到的16株乳酸菌的产γ-氨基丁酸能力进行了研究。结果表明:菌株HY15的产γ-氨基丁酸能力较好。该菌株在含1%(W/W)谷氨酸钠的MRS发酵培养基中37℃厌氧培养48h后,发酵液中γ-氨基丁酸产量达到0.161g/L。经形态学特征、生理生化试验和16SrDNA基因鉴定,确定菌株HY15为戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)。

产γ-氨基丁酸乳酸菌的分离与鉴定

从泡菜和酸奶中分离出产γ-氨基丁酸(GABA)乳酸菌10株,筛选得GABA高产菌株B、BY和SS。3个菌株在含10 g.L-1谷氨酸钠(MSG)的MRS培养基中培养6 d,发酵液中GABA含量分别达到3.680、3.341和2.700 g.L-1。通过16S rDNA基因鉴定和生理生化鉴定,确定菌株B和SS为乳酸乳球菌乳酸亚种(Lactococcus lactissubsp.lactis);菌株BY为唾液链球菌嗜热亚种(Streptococcus salivariussub sp.therm ophilus)。

黄浆水中高产γ-氨基丁酸乳酸菌的筛选及鉴定

经初筛、复筛,从黄浆水中筛得一株高产γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)的菌株,对其进行形态学及生理生化鉴定,并与Gen Bank上已提交的16S r DNA进行BLAST比对,结果表明,其归属于乳酸杆菌属(Lactobacillus)。由MEGA 6.0软件构建的系统发育树结果表明,该菌株与Lactobacillus plantarum 16S r DNA序列同源性达99%,且与生理生化实验结果一致,因此,确定该菌株为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum),编号为LP-Dfa301,测得其发酵液中GABA产量为5.833 g/L。

产γ-氨基丁酸乳酸菌的分离筛选与微波诱变育种

选择益力多乳酸饮料作为样品,从中筛选出能产γ-氨基丁酸的乳酸菌,初步鉴定为乳酸乳球菌乳酸亚种,γ-氨基丁酸产量为2.11 g/L。对该出发菌株进行微波诱变(700W,脉冲频率2450MHz)处理,得到1株突变菌株,γ-氨基丁酸产量达5.78g/L,经过多次传代稳定性较好。