产前缺氧性适应后胎鼠、新生大鼠脑内凋亡相关基因bcl-2、bax mRNA的表达

目的 通过观察产前缺氧性适应后胎鼠、新生大鼠脑内bcl-2和bax基因mRNA变化,探讨产前缺氧性适应对胎鼠、新生鼠脑保护作用机制。方法 将临产前Wistar孕大白鼠24只随机分成2组,I组为实验组（缺氧性适应组）,Ⅱ组为对照组。两组于缺氧性适应（Ⅱ组模拟）后1、3、8、24、48、72、120、168h各取7只胎鼠或新生鼠断头取脑,分别做bcl-2、bax mRNA测定。结果 1.正常胎鼠、新生鼠脑组织中即有bcl-2和bax表达,从宫内22d到生后第7d,bcl-2、bax基因表达、及bcl-2/bax比值无明显变化,2.缺氧性适应后 8h bax基因表达即有减少,24h降低最为明显,可持续至120h;缺氧性适应后24h bcl-2基因表达开始增加,可持续至72h;bcl-2/bax比值缺氧性适应后8h开始增加,24h达高峰,可持续至72h。结论 产前缺氧性适应后胎鼠、新生鼠脑组织bcl-2基因表达增加,bax基因表达减少,bcl-2/bax比值增加,此变化有时间依从性。

产前缺氧性适应动物模型制备

目的 通过对临产前孕鼠行不同程度的缺氧,找出产前缺氧性适应最合适的缺氧浓度,从而建立产前缺氧性适应动物模型。方法 将孕22天的临产前孕鼠随机分为7组,每只孕鼠两次放入自制的缺氧性适应密封仓中,氧浓度分别降至18％（Ⅱ组）、17％（Ⅲ组）、16％（Ⅳ组）、15％（Ⅴ组）、14％（Ⅵ组）、13％（Ⅶ组）,两次乏氧间隔5分钟,对照组（Ⅰ组）氧浓度21％。Ⅰ-Ⅶ组孕鼠的缺氧适应时间分别为:第一次10min、5min、7.5min、9.83min、11.5min、13.17min、14min;第二次10min、9.33min、11min、15.17min、13.33min、17min、18min。比较各组娩出的新生鼠耐缺氧时间,并应用尼氏染色和透射电镜对各组新生鼠脑组织进行观察,找出最合适的缺氧浓度。结果 Ⅰ-Ⅴ组娩出的均为正常新生鼠;Ⅵ组娩出的55只新生大鼠,皮肤颜色青紫、运动减少10只（18％）,部分新生鼠脑组织正常神经细胞数量减少,部分细胞肿胀,线粒体扩张,可见凋亡细胞;Ⅶ组娩出的52只新生大鼠中,死亡11只（21％）,14只皮肤青紫、肢体运动减少（27％）,部分新生鼠脑组织病理学检查异常。Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组新生鼠耐乏氧时间较对照组明显延长,Ⅳ组、Ⅴ组两组间新生鼠耐乏氧时间有统计学差异。结论2次使孕鼠缺氧（无CO2蓄积）,氧浓度15％。

孕鼠产前缺氧性适应后胎鼠、新生大鼠脑组织热休克蛋白70的表达

目的 通过观察产前缺氧性适应后胎鼠、新生大鼠脑组织热休克蛋白７０（ＨＳＰ７０）变化，探讨产前缺氧性适应对胎鼠、新生鼠脑保护作用机制。方法 将临产前Ｗｉｓｔａｒ孕大白鼠２２只随机分成２组，Ｉ组为实验组（缺氧性适应组）：将孕鼠置于缺氧性适应密封仓中，当氧浓度降至１５％时，将孕鼠放入新鲜空气中５ｍｉｎ，再放入密封仓中，重复第一次过程，然后待其自然分娩。Ⅱ组为对照组：除密封仓不密闭（氧浓度２１％）外，其余同Ⅰ组。两组于缺氧性适应（Ⅱ组模拟）后 １、３、８．２４、４８、7２、１２０、１６８ ｈ分别各取７只新生大鼠断头取脑，１０％甲醛固定，做海马冰冻切片，免疫组化染色评定ＨＳＰ７０免疫反应强度。结果１．正常胎鼠、新生鼠脑组织中无ＨＳＰ７０表达；２．缺氧性适应后８ｈＨＳＰ７０即有表达，可持续至１６８ｈ，但以２４ｈ最强；３．在海马各区和皮层均有ＨＳＰ７０表达，但以海马ＣＡＩ区最强。结论 热休克蛋白（ＨＳＰ７０）参与了产前缺氧性适应的形成。