北冬虫夏草(Cordyceps militaris)单孢菌株配对后对子实体形成的影响与无性型产孢结构关系

由野生子实体分离的低代菌株“ Ｃ．ｍ．Ｈ９５－１”和“ Ｃ．ｍ．Ｈ９７－Ｇ６”的子囊孢子单孢，配对后产生了较大变异，３１％和５０％的配对菌株具有与亲本菌株相同的遗传特性，而且子实体形成能力及生物产量明显增加。配对菌株“ Ｃ．ｍ．Ｈ９７－２６９３”和“ Ｃ．ｍ．Ｈ９７－２６２７”的子囊孢子再配对后，几乎所有的再配对菌株不能回复到亲本菌株的生长型，其子实体的形成能力及生物产量也低于亲本菌株。实验的结果还表明，在ＰＤＡ组合培养基１上，单孢及配对菌株的无性型产孢结构，对子实体形成有着一定的相关性。

分光光度法测定黑曲霉孢子浓度的研究

采用分光光度计测定黑曲霉(Aspergillus niger)xj在不同生长期、不同稀释倍数下孢子悬液的OD_(600nm)值,对比血球板计数法得到的孢子悬液浓度,研究在对数期和稳定期OD_(600nm)值与孢子浓度之间的关系;采用微电影拍摄法观察黑曲霉xj产孢结构形成过程,并绘制固体发酵条件下的生长曲线。结果表明,在10~20倍稀释区间内,稀释倍数与OD_(600nm)值之间呈现良好线性关系(对数期R^2=0.984 8、稳定期R2=0.991 3),且OD_(600nm)值与孢子浓度之间也保持良好的线性关系(对数期R^2=0.995 3、稳定期R^2=0.993 6);通过微电影拍摄法观察到黑曲霉xj产孢结构形成是分阶段进行的过程;在固体发酵过程中,孢子浓度呈现"S"型增长趋势。该研究为测定丝状真菌孢子浓度提供另一种可借鉴的方法。

四株马铃薯甲虫白僵菌菌株的鉴定

【目的】通过形态学特征明确四株马铃薯甲虫致病菌分类地位,探讨利用18S及ITS核酸序列鉴定四株致病菌的可行性。【方法】通过传统形态学特征及18S、ITS序列分别对四株马铃薯甲虫白僵菌1572、1573、1576和1577进行鉴定。【结果】孢子形态、产孢结构、菌落等形态学特征表明四菌株均为球孢白僵菌。四菌株18S rDNA序列分析获得1 665个共同碱基,在GenBank比对,从结果中选择相似度大于98%的序列与四菌株一起构建系统发育树Ⅰ,发现白僵菌属归于一个分支,四菌株均归属于白僵菌属球孢白僵菌。剔除遗传关系比较远的、冗余的属外菌重新构建18S系统发育树Ⅱ,结果四菌株都与Beauveria bassiana(登录号为EU334676.1)分到一个枝上。ITS核酸序列分析获得513个共同碱基,在GenBank比对,显现的序列均属白僵菌属,下载这些序列与四菌株构建ITS系统发育树Ⅰ,发现球孢与布氏白僵菌归属在一个分支。选取Stephen A.Rehner注册的白僵菌属六个分支的代表种及数据库中部分球孢和布氏白僵菌与四菌株一起构建ITS系统发育树Ⅱ,四菌株与代表种Cordyceps bassiana(AY532041.1)分到一个枝上,但在该枝上有三株布氏白僵菌,球孢与布氏白僵菌不能完全区分开。【结论】利用18S和ITS核酸序列均可将白僵菌鉴定到属,根据ITS序列可以确定四株白僵菌归属于球孢白僵菌的分支。