产志贺毒素大肠杆菌在中国牦牛及其肉奶制品中的分布与遗传规律研究

产志贺毒素大肠杆菌是一种潜在危害食品安全和公共健康的致病菌。在中国的牦牛养殖业中存在潜在的食源污染风险。不同疫情报道、肠内菌群多样性研究以及地理和季节性变化的分析揭示了牦牛体内产志贺毒素大肠杆菌的分布情况。通过深入了解产志贺毒素大肠杆菌的风险,为制定更有效的食品安全措施提供了依据,以期为产志贺毒素大肠杆菌在中国牦牛及其肉奶制品中的分布与遗传规律的全面洞察,从而促进食品安全的改进和保护公众健康。

发酵香肠中产志贺毒素大肠杆菌存活和毒力基因表达变化

以产志贺毒素大肠杆菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC)主要血清型O157:H7和O26:H11为实验菌,进行发酵香肠接种实验,研究发酵香肠生产过程中这两种菌的存活情况,并采用反转录实时聚合酶链式反应(reverse transcription real-time polymerase chain reaction,RT-real-time PCR)的绝对定量方法分析不同生产阶段菌体和产品中毒力基因表达变化。结果显示:STEC接种组与未接种组之间乳酸菌数、乳酸含量、pH值、a_(w)值在大多生产阶段无显著差异。香肠生产过程中大肠杆菌O157:H7和O26:H11存活菌数分别减少了1.51(lg(CFU/g))和1.39(lg(CFU/g)),均受到显著抑制(P<0.05),但两菌呈现出不一样的受抑制过程。采用RT-real-time PCR绝对定量,消除菌数差异后发现菌体毒力基因表达在生产后期均显著上调(P<0.05);单位质量香肠中大多毒力基因表达量在发酵初期显著增加(P<0.05),且所有毒力基因在生产末期终产品中仍有较高表达量。本研究表明:虽然发酵香肠生产过程中能有效抑制STEC,但却增强了菌体毒力基因的表达,且终产品中毒力基因存在较高表达量。

产志贺样毒素和肠毒素大肠杆菌分子流行病学(英文)

【目的】人和动物腹泻的主要病原菌为大肠杆菌,本文主要研究贵州省致腹泻大肠杆菌毒力因子的分布类型。【方法】采用PCR技术对各毒力因子的基因分布进行研究。【结果】共分离到333株大肠杆菌,其中产肠毒素大肠杆菌(ETEC)在腹泻的人、猪、牛群中占优势,分别为:人群73(n=112),猪群82(n=106),牛群18(n=115)。在ETEC菌株中检测到热敏肠毒素(lt)和不耐热肠毒素(st)基因,还存在lt/st并存现象。从人、猪、牛群中还检测到产志贺样毒素大肠杆菌(STEC),其中源自猪的STEC的检出率最高。大部分STEC同时携带lt、st或lt和st同时并存。编码F18菌毛的主亚基由fedA基因编码。对所分离大肠杆菌F18菌毛进行的研究结果表明,fedA基因主要与肠毒素基因共存,与stx基因并存的类型较少,25份猪源STEC菌株中仅有4份检测到fedA基因。【结论】贵州省人群、猪群和牛群致腹泻病原菌中以带F18菌毛的ETEC为主,STEC主要分布在腹泻的猪群中。

产志贺样毒素且具侵袭力大肠杆菌(ESIEC)的调查研究

目的 为了解ESIEC易感人群、感染率、临床症状、分离率以及与其它致泻性大肠杆菌的区别。方法 选择 4个市级医院建立调查网 ,凡 1997年 6～ 11月在此医院就诊的腹泻患者 ,均进行流行病学调查并收集大便标本 ,检测常见的腹泻病原菌 ,若培养阴性而大肠杆菌呈优势者 ,对其表型特性、血清学进行检测 ,疑似菌应用DNA菌落原位杂交确定ESIEC。结果 6 71例腹泻病人中共检出 2 0个属种 44 9株致病菌 ,志贺菌检出率为 2 5 48% ,致泻性大肠杆菌为 15 0 5 % ,致泻性大肠杆菌中ESIEC居首位 (6 2 6 % )。采用Inv、SLT、irp 2、ipaB基因探针进行菌落原位杂交检出 42株ESIEC ,各年龄组均有感染者 ,发病率最高为 10岁以下儿童 (33 33 % )。结论 6 71例腹泻病人志贺菌引起的腹泻占首位 ,致泻性大肠杆菌次之 ;在致泻性大肠杆菌中以ESICE为主。

第七讲肠产志贺样毒素且具侵袭力的大肠杆菌

第七讲肠产志贺样毒素且具侵袭力的大肠杆菌中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所（１０２２０６）徐建国Ｏ１５７∶Ｈ７大肠杆菌产生志贺样毒素，属于产志贺样毒素大肠杆菌的范畴。Ｏ１５７∶Ｈ７大肠杆菌之所以能对人造成危害，主要是志贺样毒素在作怪，特别是志贺...

首次发现一种产志贺样毒素具有侵袭力的大肠杆菌

首次发现一种产志贺样毒素具有侵袭力的大肠杆菌中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所（１０２２０６）徐建国，程伯鵾，吴艳萍，黄力保，邓庆东，赖心河，刘秉阳北京市西城区卫生防疫站罗兴祖，李惠芬目前国际上把致泻性大肠杆菌分为五类：产毒性大肠杆菌（ＥＴＥＣ...

产志贺样毒素大肠杆菌的实验室诊断方法进展

近年来,人们逐渐认识到包括O157:H7在内的产志贺样毒素大肠杆菌(STEC)的重要性,并且认识到对人致病的STEC包括多种血清型,其致病性已逐渐成为研究热点。而对STEC疾病的快速诊断、治疗和控制则取决于检测方法的敏感性和特异性。现就其分子生物学检测方法、志贺毒素(STX)的测定,以及直接分离STEC的方法等进行阐述,并比较各种方法的优劣。

三峡地区产志贺样毒素且具侵袭力大肠杆菌的研究

本文对一种新致泻性大肠杆菌 :产志贺样毒素且具侵袭力大肠杆菌 (ESIEC)进行了调查研究。共检测不同来源的标本 90 8件 ,检出ESIEC菌株 10 4株 ,检出率为 11 4 5%。调查证实ESIEC菌株广泛存在于人体、外环境及动物体内 ,以腹泻患者检出率最高达 32 4 3 %。对 68株ESIEC菌株用irp - 2探针杂交阳性 8株占 11 7% ,进一步用irp - 2基因PCR鉴定阳性 5株占 7 4 % ,表明ESIEC是一类新的致腹泻的病原微生物 ,广泛存在于三峡地区 ,对ESIEC的研究具有重要的流行病学意义。

大肠杆菌O139及其所产志贺样毒素SLT-IIe对猪临床相关指征的影响

为了评估大肠杆菌O139及其所产志贺样毒素二型变异体(SLT-IIe)对猪临床相关指征的影响是否一致,试验选取23日龄仔猪15头,随机分为对照组、细菌组、毒素组,每组5只。通过观察和触摸的方法采集各组仔猪的临床症状,通过剖检及HE染色观察各组仔猪脏器的病理变化。结果表明:与对照组相比,毒素组和细菌组呈现面部水肿、共济失调等仔猪水肿病特征性症状,肠腔积液,结肠系膜呈透明胶冻样水肿,胃壁水肿;组织学检查发现模型组小肠绒毛变短,肠黏膜下层及固有层水肿。研究表明,用大肠杆菌O139和SLT-IIe均成功诱导了仔猪水肿病,且用细菌和SLT-IIe诱导的发病猪各项临床指征基本一致。

非O157产志贺毒素大肠杆菌分离株的多位点序列分型研究

目的对国内部分地区非O157产志贺毒素大肠杆菌分离株进行分子分型分析,了解菌株间的遗传进化关系。方法根据mlst.ucc.ie数据库提供的大肠杆菌多位点序列分型(Multilocus Sequence Typing,MLST)方案,对来自我国河南、黑龙江2省的29株非O157产志贺毒素大肠杆菌分离株的7个管家基因进行PCR扩增并测序,通过序列比对确定其等位基因谱及菌株序列型(Sequence type,ST),使用MEGA、eBURST生物信息软件分析不同ST序列群及菌株间的进化关系。结果 29株非O157产志贺毒素大肠杆菌呈现较大的遗传多态性,可分为13个ST型别,其中ST155为优势型别(34.48%)。同时研究发现2个新等位基因型(fumC376、recA214)和3个新序列型(ST2460、ST2467、ST2468)。结论 29株非O157产志贺毒素大肠杆菌菌株之间具有分子多态性,与国际流行菌株具有一定的亲缘关系。加强我国对这一类菌株的检测和监测具有重要的公共卫生意义。

江苏某奶牛场健康奶牛体内产志贺毒素大肠杆菌的分离鉴定及其对小鼠致病性的研究

通过对江苏省某奶牛场连续6个月的定群、定畜跟踪调查,获得产志贺毒素大肠杆菌(STEC)在该牛场分布的广泛性、持续性和血清型多样化的资料,并对一些重要血清型分离株作致病性的鉴定。基于本实验室已经建立的多重PCR方法对stx1、stx2、eaeA、ehxA共4个基因进行检测,对检测出的阳性样品,非O157STEC采用多重PCR结合CT-SMAC平板的分离方法,而O157STEC通过免疫磁珠结合O157显色平板的分离方法。结果表明,该奶牛场STEC的初筛率为16.1%(112/696),分离率为11.1%(77/696)。分离株属于35种O血清型和60种O∶H血清型。该场的优势血清型为O4、O26和O93,O157在该场存在,但并非优势血清型。77个分离株中,stx2基因的检出率为68.8%,远远高于其它毒力基因,如stx1(19.5%)、eaeA(11.7%)和ehxA(20.8%)。该场分离到一些O157和O26血清型的菌株,对小鼠具有较强的致病性。奶牛是STEC的天然宿主,可健康带菌。除了O157STEC外,非O157STEC中一些高致病力菌株对人类的健康也存在威胁。

检测产志贺毒素大肠杆菌的菌落PCR方法

针对产志贺毒素大肠杆菌的毒力基因stx设计特异性引物,并建立一种菌落PCR方法。菌落PCR模拟实验证实,该方法特异性强,能良好的扩增出O157的stx1和stx2基因,而普通大肠杆菌、蜡样芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌则无PCR扩增产物。应用分子检测初筛、选择性培养、菌落PCR相结合的方法,检测实际食品样品,分离检测到一株携带stx1的产志贺毒素大肠杆菌。本实验建立的菌落PCR方法可应用于食品检验。

贵州猪、牛志贺样毒素大肠杆菌的检出与鉴定

以两对合成的寡核苷酸引物 ,通过聚合酶链式反应 ,检测 158份猪和牛腹泻粪便分离物 ,从 8份猪源和 3份牛源分离物中扩增出大肠杆菌志贺样毒素基因片段 ,其生化试验符合大肠杆菌特征 ,经Vero细胞检测均产生志贺样毒素 ,血清学试验证实分属不同的血清型 。

牦牛携带的产志贺毒素大肠杆菌分离株的多位点序列分型研究

目的对牦牛携带的产志贺毒素大肠杆菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC)进行多位点序列分型(Multilocus sequence typing,MLST)分析,了解菌株的遗传进化关系及致病潜力。方法根据E.coli MLST数据库(http://mlst.ucc.ie/mlst/dbs/Ecoli)提供的MLST方案,对青海玉树牦牛中分离的54株STEC分离株的7个管家基因进行PCR扩增并测序,通过序列比对确定其等位基因及菌株序列型(Sequence type,ST),并使用BioNumerics软件构建最小生成树(Minimum spanning tree,MST),分析牦牛ST型与HUSEC及人源主要流行血清群STEC菌株ST型间的进化关系。结果 54株牦牛STEC菌株呈现高度遗传多态性,可分为31个ST型别,其中包括7个新的等位基因型和17个新的ST型,并存在与HUSEC及主要流行血清群STEC亲缘关系相同或相近的ST型别。结论青藏高原牦牛携带的STEC具有遗传多样性及一定的特异性,部分菌株具有对人致病的潜力。

猪水肿病大肠杆菌志贺样毒素Ⅱ型突变体新基因的分子特征

从仔猪水肿病样品中分离的一株大肠杆菌菌株NP96 2 1,抽提染色体DNA ,构建NP96 2 1的总DNA文库 ,经菌落原位杂交筛选、限制酶酶切和Southern印迹等分析 ,获得含有志贺样毒素基因的重组质粒 ,核苷酸序列分析表明 ,该基因的A亚基与SLT IIes的同源性为 97 6 %～ 98 1% ,与SLT IIc、SLT IId及EHECO15 7:H7产生的SLT II的A亚基之间的同源性分别为 93 1%、93 0 %和 92 9% ;B亚基与SLT IIes的同源性为 99 6 2 %～ 10 0 % ,与SLT IIc、SLT IId及SLT II的同源性分别为 81 5 %、81 1%和 81 5 % ;与 2 9种已知序列的SLT II、SLT I及志贺毒素STX进行聚类分析 ,结果证实大肠杆菌NP96 2 1菌株中的志贺样毒素基因属于一种新的SLT IIe亚型。SLT IIe NP96 2 1的A亚基与其它SLT IIe之间存在 7～ 9个氨基酸的差异 ,B亚基的氨基酸序列完全相同 ,与A亚基毒力活性密切相关的氨基酸分别为Thr4、Glu16 7、Arg170和Arg176。

产志贺毒素大肠杆菌的流行病学及致病因子的研究进展

产志贺毒素大肠杆菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC)是一类危害严重的食源性病原菌,能引起人类的严重疾病,如出血性结肠炎、溶血性尿毒症等,牛、羊等反刍动物是引起人类发病的主要宿主来源。作者总结了产志贺毒素大肠杆菌病的流行病学现状,就产志贺毒素大肠杆菌染色体和毒性质粒上的主要毒力因子的研究进展作一综述。

产志贺毒素大肠杆菌流行病学及主要毒力因子研究进展

产志贺毒素大肠杆菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC)是一类能引起包括水样腹泻、出血性结肠炎、尿毒综合症等一系列人体疾病的人畜共患肠道致病菌,其感染在世界范围内包括中国都有过暴发流行。文章阐述了STECO157血清型和非O157血清型的分布特征及流行趋势,同时还对该病的主要毒力因子进行了综述,以期为该病的防控提供科学依据。

牦牛产志贺毒素大肠杆菌主要黏附因子相关基因的分子流行病学调查

为了解中国牦牛产志贺毒素的大肠杆菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC)中主要黏附因子的流行情况,采用PCR方法对来自四川甘孜阿坝等地区健康牦牛的70株STEC的eae、saa、iha3种与黏附相关的毒力基因进行检测,并对部分含有相关黏附因子的阳性分离株的毒力基因进行了克隆及序列分析。结果显示,牦牛STEC中saa、iha的阳性率分别为71.42%(50/70)和78.57%(55/70),无eae基因序列(0/70),saa、iha的测序结果与GenBank上序列的同源性分别为100%和93%～99%。健康牦牛分离的STEC无LEE毒力岛编码eae,其他的一些与黏附相关的主要毒力基因saa、iha的携带率较高。