生物制品中逆转录酶活性检查假阳性结果的原因分析及对策

目的对造成生物制品中逆转录酶活性检查假阳性结果的原因进行分析和讨论,并探讨相应的对策。方法查阅生物制品中逆转录酶活性检查方法的相关文献,并结合实际工作中的检定结果进行分析总结。结果多种因素可造成逆转录酶活性检查结果的假阳性,可针对这些原因采取相应的策略。结论逆转录酶活性检查方法的进一步完善,对于生物制品的质量控制具有十分重要的意义。

化学发光法测定几种天然产物的抗自由基活性

为从天然产物中筛选出具有较好抗自由基活性的药物,利用鲁米诺 H2O2 CuSO4化学发光体系,测定了几种天然产物的抗自由基活性.结果表明抗自由基活性顺序为速溶茶>玉米须水提物>大豆异黄酮>Vc>刺槐花>花生壳丙酮提取物>玉米须醇提取物≈怀山药醇提物.

人类端粒酶逆转录酶基因转染对足叶乙甙诱导Raji细胞凋亡的影响

探讨人类端粒酶逆转录酶 (hTERT)基因转入Raji细胞后足叶乙甙 (VP 16 )对细胞凋亡的影响。采用脂质体介导的转染方法将重组的hTERT基因转入Raji细胞 ,G4 18筛选 ;采用间接免疫荧光标记法及端粒酶聚合酶链反应 酶联免疫测定法检测hTERT蛋白表达水平和端粒酶活性的变化 ;姬姆萨染色及流式细胞仪观测细胞凋亡。结果发现 :转染hTERT入Raji细胞后 ,其表达hTERT的蛋白及端粒酶活性显著增加 (P <0.0 5 )。 10 μmol/LVP 16作用转染hTERT的Raji细胞 4 8h、72h对细胞生长抑制作用不如转染空载体组及未转染组明显 (P <0 .0 5 )。 10 μmol/LVP 16作用转染hTERT的Raji细胞 72h ,光镜下仅可见到很少量的细胞出现凋亡 ,流式细胞仪测定的细胞凋亡率 (4.34±1.0 3) %显著降低 ,分别与转染空载体组 (33.2 1± 3.12 ) %及未转染组 (31.6 3± 3.0 6 ) %比较 ,P <0.0 5。表明端粒酶活性过表达可使Raji细胞对VP

HPLC法测定生物样品中来氟米特活性代谢产物A77 1726

目的 建立用于测定生物样品中来氟米特的活性代谢产物A77172 6的HPLC方法 ,进行药代动力学研究。方法 分析柱为SpherecloneODS柱 (15 0× 4 .6mm ,5 μm) ,流动相为乙酸钠缓冲液 -乙腈 (6 3∶37) ,紫外检测波长 2 90nm。血和肝匀浆样品用乙酸乙酯提取。结果 方法的线性范围为 0 .1～ 10 0 μg·ml-1(血 )和 0 .0 0 1～ 0 .2 5 μg·g-1(肝 ) ,r分别为 0 .9994 5和 0 .99998,检测下限 0 .1μg·ml-1和 0 .0 0 1μg·g-1。A77172 6在血和肝匀浆中的回收率 (% )分别为 98.4 2± 3.4 4和 94 .5 0± 2 .5 3;日间日内RSD 均小于 9.5 7%。结论 本方法各项指标均符合新药报批要求 。

一株不动杆菌次生代谢活性产物的抑菌作用及对果树病害的防治效果

采用菌丝生长速率法在室内测定了鲍曼菌素活性粗浸膏对梨黑斑病、轮纹病、炭疽病及草莓立枯病的毒力,并采用接种法测试了它对梨果实轮纹病的防治效果。结果表明:鲍曼菌素活性粗浸膏抑制梨黑斑病、轮纹病、炭疽病病菌菌丝生长的EC50值分别为0.022、0.027和0.079mg/L。用鲍曼菌素活性粗浸膏333～666mg/L对感染梨轮纹病的果实接种后的防治效果为84%～94%。

消毒剂灭活脊髓灰质炎病毒试验方法的研究

目的:研究消毒剂灭活脊髓灰质炎病毒的试验方法。方法:试验采用细胞感染法,以活细胞染色法(MTT法)和观察细胞病理变化(CPE)法测定中和剂、消毒剂及中和产物对细胞存活性的影响。选择2种常用消毒剂:次氯酸钠和过氧乙酸分别进行悬液定量灭活病毒试验。结果:MTT法测定结果与CPE法观察结果基本一致;过氧乙酸含量为500mg/L作用10min, 对脊髓灰质炎病毒的灭活指数大于4,次氯酸钠有效氯含量300mg/L作用10min对脊髓灰质炎病毒的灭活指数大于4。结论:在预备实验中,MTT法测定中和剂、消毒剂及中和产物对细胞存活性的影响准确可靠;正式试验时,以CPE法观察细胞病理变化更简便易行。

肉品中毒性小分子物酶联免疫测定

目前肉食品中农药残留物、抗生素残留物、激素残留物及一些化学致癌物都采用化学分析法(CA)、薄层层析法(TLC)、气相色谱法(GC)、高效液相色谱法(HPLC)进行测定。由于肉品中残留物含量低、因此样品需较长时间、繁琐预处理且损失较大。

灵芝多糖调节免疫作用的试验

灵芝具有增强免疫的作用,通过动物和细胞试验,做了ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化试验(MTT法)、二硝基氟苯(DNFB)诱导小鼠迟发性变态反应(耳肿胀法)、抗体生成细胞检测(Jerne改良玻片法)、血清溶血素测定(血凝法)、小鼠碳廓清试验、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验(半体内法)、NK细胞活性测定[乳酸脱氢酶(LDH)测定法],用SAS6. 12统计软件中单因素方差分析对各实验组间所得数据进行了比较,明确了一般品质的多糖产品(灵芝全粉)具有免疫调节作用。