嗜热产甲烷杆菌YT—7菌株的分离和特征

采用严格的 Hungate 厌氧技术,从云南省腾冲高温温泉污泥样品中分离一株嗜热自养产甲烷杆菌 YT-7菌株。该菌株细胞呈长杆状,不运动,不形成芽孢,革兰氏染色阳性。在65—70℃下培养时菌体为0.3-0.4×1.5-13μm。分离物仅能利用 H_2/CO_2为能源和碳源,在无机盐液体培养基中生长,细胞最小倍增时间为3.2小时。滚管菌落呈灰白色,半透明,近圆形;落射荧光显微镜检查呈蓝绿色或黄绿色荧光。YT-7菌株的最适生长温度为65—70℃,低于45℃或高于75℃不生长。最适生长 pH 为6.5—7.0。根据形态和生理性状的研究,分离物暂定嗜热自养产甲烷杆菌 YT-7(Methanobacterium thermoautotrophicumYT-7)。

db/db2型糖尿病模型小鼠肠道多形拟杆菌、史氏产甲烷短杆菌与GLP-1分泌的相关性研究

目的研究db/db 2型糖尿病模型小鼠肠道多形拟杆菌、史氏产甲烷短杆菌与胰高血糖素样肽1(GLP-1)的相关性,探索肠道多形拟杆菌、史氏产甲烷短杆菌对糖尿病影响的可能机制。方法6周龄2型糖尿病模型组db/db(n=6)和对照组db/m(n=6)小鼠,观察第7周-第12周中2组小鼠的体质量、空腹血糖水平;第12周之后,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)的方法测定小鼠粪样中肠道多形拟杆菌、史氏产甲烷短杆菌的数量,运用酶联免疫法(ELISA)测定小鼠门脉血和结肠组织匀浆液中GLP-1的水平来反映GLP-1的分泌,并分析肠道菌群的变化与GLP-1分泌的相关性。结果(1)与对照组db/m相比,第7周-第12周的观察过程中模型组db/db小鼠体质量和空腹血糖明显升高(P<0.01);(2)与对照db/m组相比,模型组db/db小鼠结肠中多形拟杆菌、史氏产甲烷短杆菌的数量增加(P<0.05),且空腹血糖与粪样中多形拟杆菌的变化呈正相关。(3)与对照db/m组相比,模型组db/db小鼠门脉血、结肠组织匀浆液中GLP-1水平降低(P<0.05);空腹C肽水平下降(P<0.05)。(4)模型组db/db小鼠结肠内容物多形拟杆菌数量与门脉血、结肠GLP-1含量(r=-0.63,P<0.01;r=-0.35,P<0.01)呈负相关;史氏产甲烷短杆菌数量与门脉血、结肠GLP-1含量(r=-0.17,P<0.01;r=-0.46,P<0.01)呈负相关。结论肠道多形拟杆菌、史氏产甲烷短杆菌与GLP-1的分泌相关,可能是肠道菌群影响2型糖尿病的重要机制。

高温厌氧环境中一株嗜热产甲烷古菌的分离鉴定

本研究采用Hungate厌氧操作技术、液体培养基和固体培养基交替传代的培养方法,从油层采出液中分离到一株产甲烷古菌DH-5。实验结果表明菌株DH-5为严格厌氧菌,菌7体大小为(0.06～0.07)μm×(3.8～8.7)μm,可利用H2/CO2,但不利用其它供试底物;最适生长温度63℃;最适盐浓度0.80 g·L-1;最适pH为7.2;酵母粉为其生长必须因子;最适生长条件下其倍增时间为2.77 h。菌株DH-5与标准株Methanothermobacter thermautotro-phicus DSM 1053T(AY 196660)的16S rRNA基因序列相似性为99.8%。

高温油藏采出液中嗜热产甲烷古菌的分离鉴定

为了进一步从高温油藏中发掘新的微生物种质资源,采用Hungate厌氧操作技术从大港油田油井采出水中分离出一株嗜热自养产甲烷杆菌DL-7。生理生化结果显示菌株DL-7只能够利用H2/CO2生长,不利用甲酸、甲醇、三甲胺、乙酸和二级醇类;最适生长温度60℃;最适盐浓度0.8 g/L;最适pH为7.0～7.5;只有在添加酵母粉的培养基中才可以较好生长。16S rRNA序列比对结果显示菌株DL-7与标准株M.marburgensis DSM 2133T(X15364)的16S rRNA基因序列相似性为99.7%。