产纤维素酶菌株的筛选及产酶条件优化

以羧甲基纤维素钠培养基和液体发酵培养基筛选菌株,经初筛和复筛筛选出目的菌株后,通过观察菌落形态、颜色和孢子形态等方法初步鉴定目的菌株。结果表明,本研究筛选出的2株目的菌株均为黑曲霉。菌株的最佳碳源和氮源分别为1.0%CMC-Na和0.3%酵母膏,最佳培养起始p H值和最适宜温度分别为4和40℃。在此条件下培养7d后菌株1和菌株2的CMCase酶活分别达到0.504 IU/m L和0.277 IU/m L。

一株产纤维素酶菌株的筛选及酶学性质

以羧甲基纤维素钠为惟一碳源,从土壤中筛选出一株产纤维素酶的菌株XW-13,其摇瓶培养液的CMC酶活力为15.05μg/mL,滤纸酶活力为15.13μg/mL。酶学性质试验表明,该酶的最适反应pH 7.0,在pH 5.0～9.0时有较好的稳定性,酶活力保持60%以上。该酶的最适反应温度为40℃,在温度为20℃时基本稳定,保温2 h仍有80%以上的活力。在化合物浓度为0.2 mg/mL的条件下,NH4+、Na+、Fe2+、K+、Ca2+、Mn2+、Zn2+、Mg2+和Li+对酶活力有增进作用,Hg+和Cu2+对酶活力有抑制作用。

兔粪中产纤维素酶菌的分离 筛选与初步鉴定

本研究旨为从兔粪中分离、筛选出酶活性较高的产纤维素酶菌,并对该细菌进行形态学的初步鉴定。利用分离培养基(LB)从普通家兔新鲜粪便样品中分离出细菌群,经纯化后接种到产纤维素酶菌筛选培养基中。经一段时间培养后用0.1%刚果红染色液对筛选培养基进行染色,用1 mol/L氯化钠溶液进行脱色处理,根据培养基中水解透明圈直径与菌圈直径的比值挑选出酶活性较强的产纤维素酶菌株。然后,利用革兰氏染色法进行初步鉴定,利用光学显微镜观察其革兰氏染色的结果及其细菌形态。结果表明:从兔粪中分离并筛选出了具有较高酶活性的产纤维素酶菌菌株SK1和SK6,鉴定后认为是革兰氏阳性菌(G+菌),属于杆菌。研究提示,菌株SK1和SK6的水解效果显著,具有较高的开发价值与应用前景。

高产纤维素酶菌株的筛选及酶活性的测定

为了获得高产纤维素酶菌株,试验从土壤中通过初筛、复筛,得到产纤维素酶的细菌菌株3株,采用DNS法测定了3株菌的纤维素酶活性。结果表明:3株菌的纤维素酶活性分别为340,472,324 U;采用16S rDNA测序法对2号高产纤维素酶菌株进行菌种鉴定,该菌株为枯草芽孢杆菌。

响应面法优化产纤维素酶菌株的产酶条件研究

应用响应面分析方法对产纤维素酶菌株的产酶条件进行了优化,通过以羧甲基纤维素钠酶活(CMC酶活)为评价指标,研究了微晶纤维素与麸皮比例,硫酸铵含量及培养时间对羧甲基纤维素钠酶活的影响。得到优化发酵条件为:微晶纤维素与麸皮比例约为3∶1,硫酸铵含量为6.19g/L,培养时间为3d。经摇瓶发酵实验表明,羧甲基纤维素钠酶的活力有了显著的提高。

产纤维素酶菌及其筛选改良方法研究进展

纤维素酶来源广泛,其中微生物繁殖快、发酵周期短,更适合大规模生产。通过采用理化诱变,原生质体融合,基因工程等技术可进一步筛选出高产纤维素酶的菌种。该文综述了目前关于产纤维素酶菌的研究进展,并对常用的筛选改良菌种的方法进行分别阐述,对比各方法间的优势和局限性,以期为后续研究者提供一些参考。

斑须蝽肠道菌的分离鉴定及产纤维素酶菌株的筛选与酶活力测定

【背景】斑须蝽(Dolycoris baccarum L.)是危害高粱、玉米、大豆等多种作物及果树的植食性害虫,其肠道菌的研究对斑须蝽的防治和肠道功能菌资源的挖掘都十分必要。【目的】了解斑须蝽成虫肠道可培养细菌的组成,筛选出产纤维素酶功能菌株,并检测其酶活性,对部分菌株的产酶条件进行初步探究。【方法】采用传统细菌分离培养法获得斑须蝽肠道菌,结合形态学以及16S rRNA基因序列分析进行鉴定;水解圈法筛选纤维素降解菌,利用3,5-二硝基水杨酸(dinitrosalicylic acid,DNS)法测定菌株产纤维素酶活力。【结果】从斑须蝽肠道中共分离出35株菌,可归为5属10种,其中肠球菌属(Enterococcus)3种,芽孢杆菌属(Bacillus)4种,乳球菌属(Lactococcus)、沙雷氏菌属(Serratia)与泛菌属(Pantoea)各1种。筛选出13株具有产纤维素酶功能的菌株,菌株B8、B22、B23和B25产纤维素酶能力较强,其中沙福芽孢杆菌(Bacillus safensis)B22的产酶能力最为突出(D/d=7.01)。酶活力测定结果显示,在实验设定的梯度范围内,发酵培养基pH为5.0,菌株B8、B23和B25培养24 h、菌株B22培养36 h时产酶活力最强。【结论】斑须蝽肠道可培养菌资源丰富,分离获得的肠道菌中具有产纤维素酶功能的菌株高达37%,可协助食物消化影响宿主健康。发酵时间与发酵培养基pH均影响功能菌株的产纤维素酶活性,菌株B22具有较强的产酶能力可进一步开发利用。

东方蝼蛄肠道菌分离鉴定及产纤维素酶菌株的筛选与酶活力测定

【背景】蝼蛄(Gryllotalpa spp.)是我国分布广泛的农业地下害虫,其肠道菌的组成及功能菌资源的挖掘都有待研究。【目的】获得蝼蛄肠道可培养菌株,对其进行鉴定和产纤维素酶功能菌株的筛选,并检测其酶活性,对活性较高菌株的产酶条件进行探究。【方法】采用传统的微生物分离培养方法,结合分子生物学技术对东方蝼蛄肠道菌进行分离和鉴定,采用羧甲基纤维素钠(carboxymethylcellulose sodium,CMC-Na)水解圈法筛选产纤维素酶菌株,并用3,5-二硝基水杨酸(3,5-dinitrosalicylic acid,DNS)法测定纤维素酶活力。【结果】从东方蝼蛄肠道共分离出23个菌株,可归为7属10种:其中芽孢杆菌属(Bacillus)4种,肠球菌属(Enterococcus)、葡萄球菌属(Staphylococcus)、不动杆菌属(Acinetobacter)、变形杆菌属(Proteus)、肠杆菌属(Enterobacter)和乳球菌属(Lactococcus)各1种。结果显示,除菌株N18外的其余22个菌株均具有产纤维素酶能力,其中菌株N3和N14产酶能力最强,其次是N15和N21。培养基的pH、培养时间、菌液接种量对菌株的产酶能力影响各异。在实验设定的梯度范围内,所测各单因素影响下,均为菌株N3和N14产酶能力最强。【结论】蝼蛄肠道可培养菌资源丰富,获得菌株中高达95%具有产纤维素酶的功能,其中枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)N3和N14产酶能力最强,最具开发潜力。

1株耐高温纤维素酶产生菌的分离与鉴定

从环境样品中筛选得到1株耐高温纤维素酶产生菌A13。形态及生理生化特征测定结果表明,A13菌株与芽孢杆菌属(Bacillus)中地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)的特征基本一致。测定了该菌株的16SrDNA序列并根据16SrDNA构建了系统发育树,在系统发育树中,A13菌株与地衣芽孢杆菌形成一个类群,序列同源性为90%。最终确定该菌株为地衣芽孢杆菌。

一株纤维素分解菌利用枳实废渣产酶条件的研究

以枳实废渣为碳源，对产纤维素酶G2茵进行固体发酵，通过测定FPA、CMC、C1酶活的大小，对其产酶条件进行优化研究。结果表明产酶最适条件为：枳实在发酵前需进行酸处理；氮源为硫酸铵；含水率为70％；初始pH为5～6；发酵周期为6天。在以上最适条件下，G2菌酶活力为FPA：31．8IU／ml，CMC：11．86IU／ml，C1：15．79IU／ml。

降解滁菊茎秆产纤维素酶的红绶曲霉MFCJ鉴定

滁菊产业是滁州市特色产业之一,每年都会产生大量的茎秆,因茎秆中纤维素含量过高,旋耕还田后土壤碳氮比失调,导致了严重的土壤板结,营养比例失衡等一系列问题。纤维素经纤维素酶降解后可转化为添加剂、燃料和化学制品等,是最有前景的资源之一。该研究通过对滁菊种植基地土壤中产纤维素酶分解菌进行分离筛选与鉴定,并对分离出的菌株所产纤维素酶进行了活力检测,筛选鉴定出Aspergillus nomius.MFCJ菌株,能很好地降解滁菊茎秆,使滁菊茎秆得到充分有效的利用。