鸭产蛋循环中IP3R1、SLC4A4基因的组织表达及其对子宫Ca^(2+)浓度的影响

以三穗鸭为研究对象,于产蛋后0、2、5、16 h宰杀并采集各个组织,采用实时荧光定量PCR技术检测1型1,4,5-三磷酸肌醇受体(IP3R1)和碳酸氢钠协同转运蛋白(SLC4A4)基因在各组织中的表达水平,同时测定产蛋循环不同时期子宫的Ca^(2+)浓度,并进行相关分析.结果表明:0~2 h,IP3R1基因在子宫的表达量较低,5 h极显著增高(P<0.01),16 h达到最大值,差异极显著(P<0.01);16 h,IP3R1基因在肾脏、大肠的表达量极显著高于0~5 h(P<0.01);2 h,IP3R1基因在十二指肠的表达量极显著高于0、5、16 h(P<0.01),0 h的表达量极显著高于5、16 h(P<0.01);5 h,IP3R1基因在小肠的表达量显著低于0、2、16 h(P<0.05).16 h,SLC4A4基因在肾脏、大肠、子宫的表达量极显著高于0~5 h(P<0.01);2 h,SLC4A4基因在小肠的表达量显著高于0、5、16 h(P<0.05);0 h,SLC4A4基因在十二指肠的表达量极显著高于2~16 h(P<0.01).5 h,子宫的Ca^(2+)浓度极显著高于0~2 h(P<0.01),在16 h达到最大值,极显著高于0~5 h(P<0.01).0 h,肝脏IP3R1基因的表达量与子宫Ca^(2+)浓度呈显著正相关(P<0.05);5 h,胸肌IP3R1基因的表达量与子宫Ca^(2+)浓度呈显著负相关(P<0.05);16 h,小肠IP3R1基因的表达量与子宫Ca^(2+)浓度呈极显著负相关(P<0.01).5 h,脾脏SLC4A4基因的表达量与子宫Ca^(2+)浓度呈显著负相关(P<0.05);5 h,胰脏SLC4A4基因的表达量与子宫Ca^(2+)浓度呈极显著负相关(P<0.01).以上结果表明,鸭蛋壳形成过程中IP3R1、SLC4A4基因对子宫Ca^(2+)的转运具有一定的作用.

产蛋循环过程中TRPV6、CaBP-D_(28K)和PMCA 1b在蛋壳腺的动态表达

将40羽220日龄ISA蛋鸡分为5组,于产蛋后0、2、4.5、8、16h断头处死,采集蛋壳腺组织,运用Real-time PCR和Western-blot方法检测产蛋循环过程中瞬时性受体单位香草精受体6（Transient receptor potential vanilloid receptor 6,TRPV6）、钙结合蛋白（calbindin D28K,CaBP-D28K）、质膜钙离子ATP酶1b（plasma membrane Ca2＋-ATPase 1b,PMCA 1b）mRNA和蛋白浓度的动态变化。结果显示,卵子未进入蛋壳腺前（产蛋后0~4.5h）,蛋壳腺内TRPV6、CaBP-D28K和PMCA 1bmRNA表达水平较低,随后表达量逐渐升高,在蛋壳钙化过程中达到最大值（产蛋后16h）,与0h相比,TRPV6和CaBP-D28KmRNA表达差异均极显著（P〈0.01）;另外,产蛋循环过程中,TRPV6、CaBP-D28K和PMCA 1b蛋白浓度变化与mRNA变化一致,产蛋后16h到达最大值,其中CaBP-D28K蛋白浓度与0h相比,差异显著（P〈0.05）。结果表明,产蛋循环可调控蛋壳腺内TRPV6、CaBP-D28K和PMCA 1b的表达,并提示钙离子跨细胞转运途径在钙离子进入蛋壳腺形成蛋壳过程中发挥重要作用。

鸭产蛋循环中肌醇1,4,5-三磷酸(IP3R)受体基因的组织表达谱分析

肌醇1,4,5-三磷酸(inositol 1,4,5-triphosphate receptor,IP3R)受体基因是Ca^(2+)跨膜转运活性的关键调控因子,会影响蛋壳品质。为了探究IP3R受体基因在鸭产蛋循环不同时期各组织的表达情况,笔者采用RT-PCR方法检测鸭产蛋后0 h、2 h、5 h和16 h IP3R受体基因在不同组织中的表达情况,并分析其表达调控效应。结果显示,IP3R受体基因在鸭不同产蛋时期各个组织中均存在表达;基因表达变化规律分析发现,子宫中IP3R受体基因的表达量在16 h内均最高(P<0.01),0~16 h肾脏和大肠中IP3R受体基因的表达量极显著升高(P<0.01);小肠和十二指肠中的表达量在0~16 h内极显著下降(P<0.01)。以上结果表明,鸭蛋壳形成过程中,IP3R受体基因的表达对子宫Ca^(2+)释放具有调控作用。本次研究结果为进一步研究IP3R受体基因在鸭蛋壳形成过程中对Ca^(2+)的调控机理提供了参考和理论依据。