阴沟肠杆菌产AmpC酶菌和非产酶菌的耐药性研究

目的 :探讨阴沟肠杆菌分布特征及产 Amp C酶菌和非 Amp C酶菌的耐药性。方法 :对临床分离的 158株阴沟肠杆菌分布科室、感染部位及对 16种抗生素耐药性进行分析 ,并通过酶粗提物头孢西丁三维试验结合 PCR法检测 Am p C酶。结果 :标本来源主要为患者的痰液、尿液、创口分泌物等 ,科室以重症监护室为多 ,感染部位以呼吸道为主 ,耐药性较高的抗生素为头孢西丁、头孢噻肟、头孢曲松等 ,158株阴沟肠杆菌中产 Amp C酶菌株共 3 3株 ,产 Amp C酶阳性率占总菌株数 2 0 .9% ,产 Amp C酶菌株对各种抗生素的耐药率比不产 Amp C酶的明显增高。结论 :阴沟肠杆菌的耐药与产 Amp C酶有关 。

一种新型淀粉酶的鉴定及其产酶菌株的筛选

对筛选到的菌株ZX99产生的一种新型淀粉酶 (异麦芽低聚糖酶 )进行了分析鉴定。ZX99菌株能产生一种胞外淀粉酶 ,该酶能催化淀粉的降解产生异麦芽低聚糖。对原产酶菌株ZX99多次进行紫外线照射诱变后 ,获得了优良、稳定的变异菌株BS3 2 32 ,其产酶水平为原株的 1 60 %。产物薄层层析证明 ,该酶能催化淀粉的降解 ,产生异麦芽糖、潘糖、异麦芽三糖和异麦芽四糖等低聚糖 ,但对普鲁兰基本不起作用 ,由此证明它是一种不同于新型普鲁兰酶 (neopullulanase)和传统淀粉酶 (amylase)的一种新型淀粉酶。

柞蚕肠道菌群分析及产酶菌的筛选与鉴定

【目的】研究柞蚕肠道菌群结构及产酶菌,探寻具有新的生理功能的微生物,用于研制微生态制剂,以提高柞蚕生产的叶丝转化率及抗病能力。【方法】采用培养法分离柞树叶饲喂的5龄柞蚕幼虫肠道细菌,通过生理生化特性结合16S rDNA系统发育分析,对其肠道细菌群落类型进行鉴定,采用筛选培养基筛选产纤维素酶、蛋白酶、脂肪酶的菌株。【结果】获得的柞蚕肠道菌有芽孢杆菌、葡萄球菌、肠杆菌,其中以芽孢杆菌为主要菌群。芽孢杆菌是肠道菌中产纤维素酶、蛋白酶的主要菌群;葡萄球菌产蛋白酶能力较弱;肠杆菌不产酶。【结论】柞蚕肠道菌与家蚕肠道菌群结构相似,筛选出的产酶菌活性较高,可以制备微生态制剂用于蚕业生产。

野生与养殖银鲳消化道菌群结构中产酶菌的对比分析

实验对野生和养殖银鲳胃、幽门盲囊、前肠、中肠、后肠菌群结构进行了定性对比分析,并对产蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、纤维素酶的菌株进行了鉴定。结果发现,野生和养殖种群的消化道菌群结构存在较大差异,且同一种群消化道各部分之间菌群结构也存在较大差异。尽管养殖和野生银鲳均在幽门盲囊中具有最多的可培养细菌菌株,但野生银鲳消化道内主要菌群为嗜冷菌属(Psychrobacter)和Pseudochrobactrum,养殖银鲳消化道主要菌群为不动杆菌属(Acinetobacter)和假单孢菌属(Pseudomonas),两种群共有细菌仅一株,即Psychrobacter piscatorii strain VSD503,但其分别存在于野生与养殖种群银鲳消化道的不同部位。在产酶菌株筛选中发现,野生银鲳消化道内分离到16株产酶菌,其中44%可培养菌能产蛋白酶,56%能产淀粉酶,11%能产脂肪酶,56%能产纤维素酶,部分菌株可产2株以上的消化酶,其中产3种以上酶的菌株有5株,且产酶量丰富。相对于野生银鲳,养殖银鲳消化道内分离到22株产酶菌,主要以产蛋白酶和淀粉酶为主,70%可培养菌可产蛋白酶,21%可产淀粉酶,仅Bacillus thuringiensis strain VITGS可产纤维素酶,无一株菌产脂肪酶,其中只有Bacillus thuringiensis strain VITGS产3种酶但产酶量相对较少。研究可为银鲳人工养殖中潜在益生菌的筛选提供理论依据。

胆红素氧化酶产酶菌株的分离及最佳产酶条件的研究

胆红素是铁卟啉化合物在人体内的代谢产物之一,主要来源于衰老红细胞崩解后的血红蛋白,随胆汁排泄。凡能引起胆红素的生成过多或使肝细胞对胆红紊的摄取、结合、排泄过程发生障碍的因素,都可使血中胆红素浓度增高,出现高胆红素血症。因此,测定血中胆红素水平对临床诊断肝胆疾病,溶血等有着重要的意义。

一步法制备高果糖浆工程及产酶菌体营养价值研究

利用克鲁维酵母菊粉酶酶解菊粉制作高果糖浆 ,优选的酶解条件是 :菊糖浓度15.0 % ,酶作用剂量 2 2U/g ,50℃下作用 6～ 36h ,底物水解率 >95%。水解产物中果糖占95%以上 ,葡萄糖占 5%以下 ,不含其它糖。产酶酵母所含营养物质非常丰富。真蛋白含量4 3.10 % ,赖氨酸、蛋氨酸、胱氨酸、色氨酸分别是 3.0 2、0 .58、0 .4 4、0 .52mg/kg ,维生素B1和B2含量分别是 5.53和 6 0 .70mg/kg ,重要微量元素铜、锌、铁、锰的含量分别是 19、110、170和 15mg/kg。在本研究设计工艺下 ,高果糖浆和高值兼用酵母生产可以一举两得。

复方B-内酰胺类抗生素对临床常见产酶菌的体外抗菌活性比较

目的 比较哌拉西林 /舒巴坦、氨苄西林 /舒巴坦、头孢哌酮 /舒巴坦、哌拉西林 /三唑巴坦联合制剂与哌拉西林、氨苄西林及亚胺培南 /西司他丁对 471株临床分离产酶菌的体外抗菌作用。方法 以琼脂平皿两倍稀释法测定最低抑菌浓度 (MIC)。结果 哌拉西林 /他唑巴坦的体外抗菌作用稍强于哌拉西林 /舒巴坦 ,两者比较哌拉西林显示出较强的抗菌活性。氨苄西林 /舒巴坦与氨苄西林比较显示出较强的抗菌活性 ;头孢哌酮 /舒巴坦对产酶G-杆菌的 MIC90 值 ,较哌拉西林 /舒巴坦、氨苄西林 /舒巴坦、哌拉西林 /三唑巴坦低 8～ 16倍 ;亚胺培南 /西司他丁比较哌拉西林 /舒巴坦、氨苄西林 /舒巴坦、头孢哌酮 /舒巴坦、哌拉西林 /三唑巴坦具有更强的抗菌活性。结论 哌拉西林 /舒巴坦、氨苄西林 /舒巴坦、头孢哌酮 /舒巴坦、哌拉西林 /三唑巴坦及亚胺培南 /西司他丁对临床常见产酶菌均有很好的抗菌活性。

九孔鲍肠道中产酶菌株的筛选及其与深圳湾菌株的比较

对九孔鲍肠道环境中的微生物进行了初步的分离和筛选。试验结果表明,在鲍鱼消化道中存在着能分泌蛋白酶、脂肪酶和纤维素酶的微生物。同时,将九孔鲍肠道中分离筛选获得的菌株与深圳湾水体中分离筛选的微生物作了相应的比较,通过分析鲍鱼肠道内菌群的特点,找出能分泌多种酶的有益微生物,再把它作为益生菌用于饲料工业,将提高饲料的利用率,促进鲍鱼的生长。

工厂化循环水养殖条件下云纹石斑鱼消化道产酶菌的分离鉴定

采用16S r DNA-PCR菌群分离鉴定的方法,对循环水养殖条件下云纹石斑鱼(Epinehelus moara)幼鱼的胃、幽门盲囊、前肠、中肠和后肠的菌群结构进行了鉴定,用产酶菌筛选培养法对产消化酶的菌株进行了分离鉴定,并测试了各菌株消化酶的活力。研究发现,云纹石斑鱼幼鱼消化道内可培养的主要菌群为假单胞菌属(Pseudomonas)、微小杆菌属(Exiguobacterium)、不动杆菌属(Acinetobacter)、寡养单胞菌属(Stenotrophomonas)和葡萄球菌属(Staphylococcus),其中产消化酶的菌株占可培养菌的55.6%。在产酶菌中,同一株菌产3种酶的有5株;产2种酶的有9株;中肠和后肠的菌株数最为丰富,胃次之,幽门盲囊和前肠菌群种类较少;产脂肪酶的菌株都集中在中肠。产消化酶的菌株主要以产蛋白酶和淀粉酶为主,且产酶量丰富,产蛋白酶活力最高达(87.732±1.134)U/m L;淀粉酶活力为(77.176±0.599)^(73.458±0.574)U/m L;产纤维素酶的菌仅一株,且酶活力较低。分析得知,消化道的菌群结构直接影响了外源性消化酶的种类与活性。本研究为工厂化循环水养殖条件下产酶有益菌的筛选提供了理论依据。

头孢唑林联合舒巴坦对90株产酶菌的体外抗菌活性

用液体培养基试管二倍稀释法测定头孢唑林联合舒巴坦对常见临床分离产酶菌的最低抑菌浓度（ＭＩＣ），并与头孢唑林进行比较。９０株产酶菌中金葡球菌２０株、表葡球菌４株、大肠埃希氏菌３５株、克雷伯氏菌２５株、其它６株，产酶菌鉴定采用ｎｉｔｒｏｃｅｆｉｎ试棒。结果９０株产酶菌中３４株（３７．８％）对头孢唑林耐药（ＭＩＣ≥３２ｍｇ／Ｌ），而仅有１９株（２１．１％）对头孢唑林／舒巴坦（２１）耐药，两者比较有显著差异（Ｐ＜０．０５）。头孢唑林／舒巴坦（２１）对其中６５．６％菌株显示出协同或累加抗菌作用，与头孢唑林比较，ＭＩＣ降至其１／２～１／２８，其中包括２５株耐头孢唑林菌株。此外，对３５株产酶菌株测试，头孢唑林／舒巴坦（２１）较头孢唑林／舒巴坦（１１）显示出更强的体外抗菌活性。

氟化物对家蚕耐氟和氟敏感品种肠道中留存产酶菌群落组成和多样性的影响

【目的】研究氟化物对家蚕Bombyx mori肠道内留存产酶菌的影响,有助于了解家蚕耐氟和氟敏品种的耐氟力差异。【方法】分别给家蚕耐氟品种T6和氟敏品种734添食NaF溶液浸泡后的新鲜桑叶,至5龄第3天取材。采用筛选培养基筛选产蛋白酶、纤维素酶、脂肪酶、淀粉酶的菌株,并结合16S rDNA系统发育关系,对菌株进行分类鉴定。【结果】家蚕肠道内产消化酶细菌有芽孢杆菌属Bacillus、葡萄球菌属Staphylococcus、肠杆菌属Enterobacter和不动杆菌属Acinetobacter和微小杆菌属Exiguobaterium,其中芽孢杆菌Bacillus sp.、葡萄球菌Staphylococcus sp.和不动杆菌Acinetobacter sp.细菌可同时产4种酶。氟中毒后T6肠道内产酶菌由5种减少到4种,734肠道内产酶菌由2种减少到1种。【结论】家蚕肠道内留存的产酶菌与家蚕自身的耐氟能力相关。

尼罗罗非鱼肠道中产酶菌株的研究

从尼罗罗非鱼肠道中分离出41株好氧菌和6株厌氧菌。好氧菌中31株为革兰氏阴性菌,10株革兰氏阳性菌;厌氧菌中,革兰氏阳性菌5株,革兰氏阴性菌1株。41株好氧菌中有31.7%的菌株能分泌蛋白酶(13株菌);有39.0%的菌株能分泌脂肪酶(16株菌);有17.1%的菌株能产淀粉酶(7株菌),有36.6%的菌株能产纤维素酶(15株菌)。其中,产3种酶的有7株菌,产2种酶的有9株菌,产1种酶的有12株菌,不产酶的有13株菌。好氧菌在尼罗罗非鱼消化食饵过程所起的作用大;6株厌氧菌中仅有1株菌能产脂肪酶和纤维素酶,对尼罗罗非鱼消化食饵所起作用相对不大。优化罗非鱼肠道中微生物菌群的结构很有必要。

九孔鲍养殖水体中产酶菌群的研究

为了解九孔鲍养殖环境中细菌生理菌群的生态作用,对分离自养殖水体的33株菌株的产酶能力和种类进行了研究。结果表明,具有分泌胞外蛋白酶、脂肪酶和纤维素酶能力的菌株分别为39.4%、57.6%和30.3%;在这33株菌中,产至少一种胞外酶的菌株比例高达63.6%。API鉴定结果表明,在有能力分泌胞外蛋白酶、脂肪酶和纤维素酶的菌株中,弧菌菌群所占的比例分别为46%、42%和40%,而其中河流弧菌又占各弧菌菌群比例的83.3%、62.5%和100%。充分阐明弧菌,尤其是河流弧菌为优势菌,在鲍鱼养殖微生物态中起的重要作用。

舒巴坦与拉氧头孢配比对产酶菌的体外抗菌活性研究

目的评价拉氧头孢与舒巴坦的不同配比对143株临床分离产酶菌的体外抗菌作用。方法用平皿二倍稀释法对拉氧头孢/舒巴坦与三代头孢菌素头孢噻肟和舒巴坦复合抗生素氨苄西林/舒巴坦及头孢哌酮/舒巴坦的体外抗菌作用进行了测定。结果拉氧头孢对6种标准超广谱β内酰胺酶TEM-1、TEM-3、SHV-1、SHV-2、SHV-5、SHV-18具有高度的稳定性,MIC≤1.0μg/mL;对去遏制持续高产AmpC酶标准菌株的MIC=8.0μg/mL。对临床分离的ESBL_s菌株的MIC_(50)值拉氧头孢(0.5μg/mL)比头孢噻肟、氨苄西林/舒巴坦和头孢哌酮/舒巴坦分别低32倍、64倍和16倍、敏感率大99.1％。对临床分离产AmpC酶菌株的MIC_(50)值(8.0μg/mL)分别比头孢噻肟、氨苄西林/舒巴坦低4倍和8倍,与头孢哌酮/舒巴坦相同,敏感率为81.0％;对临床分离产SSBL菌株的MIC_(50)值(16μg/mL)比头孢噻肟、氨苄西林/舒巴坦低8倍,与头孢哌酮/舒巴坦相同,敏感率为41.7％;对临床分离高产诱导酶菌株的敏感率为100％。各种比例的舒巴坦都不能降低拉氧头孢对标准产酶株和临床产酶株的MIC值。结论拉氧头孢对临床分离的各种产酶菌耐药率极低,对包括质粒及染色体介导的各种β内酰胺酶的稳定性较高,可作为临床治疗由肠杆菌科细菌所致医院内感染的用药。

低温木聚糖酶及产酶菌株的研究方法

木聚糖酶的底物木聚糖是自然界中继纤维素之后含量第二丰富的可再生资源—半纤维素的主要组成部分,因此木聚糖酶在纸浆、造纸工业、食品和饲料等各行业中都有广泛应用。广义的木聚糖酶是指能够降解半纤维素木聚糖的一组酶的总称,包括多种内切酶和外切酶。

产酶菌研究及霉菌毒素的风险控制

酶在动物饲料中的使用可以提供一个更广泛的“军械库”控制霉菌毒素。 酶早已被用来提高动物饲料营养物质的消化率。因此，它能提高动物生产效率，同时也降低行业的环境影响。研究新发现，一些产酶菌可能被加到动物饲料中用于对特定霉菌毒素的降解，科学地称为生物转化。

大闸蟹肠道中产酶菌株及其胞外酶的研究

从健康成年大闸蟹肠道中分离出细菌36株。革兰氏染色结果表明,11株为革兰氏阳性菌,25株为革兰氏阴性菌。52.8%的菌株能分泌蛋白酶,44.4%的菌株能分泌脂肪酶,58.3%的菌株能分泌淀粉酶,41.7%的菌株能分泌纤维素酶。36株菌均能产酶,其中产4种酶的有1株,产3种酶的有9株,产2种酶的有14株。由于这些产酶菌株的作用,使得大闸蟹的肠道菌群能够维持平衡,提高饲料的消化利用率,促进大闸蟹生长。

豆豉纤溶酶产酶菌的筛选及菌种保藏

[目的]从豆豉产品中筛选分离活性较高的豆豉纤溶酶产酶菌,并对菌种进行保藏。[方法]用自制的猪血粉为底物配制筛选培养基进行豆豉纤溶酶产酶菌的筛选,然后根据水解圈的大小筛选活性高的产酶菌株,最后将其保藏于LB培养基中。[结果]成功从湖南、广东、江西等地产的豆豉中筛选到一株溶栓活性相对较高的产酶菌。[结论]该研究为新型溶栓药物的开发奠定了基础。