产青霉素酶淋病奈瑟菌的DNA检测

目的 了解产青霉素酶淋病奈瑟菌 (PPNG )耐青霉素的分子机制。 方法 收集常州地区 5 0株淋病奈瑟菌 ,应用TEM基因通用引物套式聚合酶链反应 (nPCR)和以TEM 1的 3’末端及与之相邻基因的 5’末端为靶基因的PPNG型特异引物nPCR两种方法进行配对检测。 结果 TEM 1型的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、沙雷杆菌、不动杆菌经TEM通用引物nPCR扩增均能呈现 5 35bp的目的条带 ,而经PPNGTEM 1基因型特异引物nPCR扩增无任何条带出现。 5 0株淋病奈瑟菌检测结果 :TEM通用引物nPCR与PPNGTEM 1基因型特异引物nPCR扩增结果一致 ,有 32例呈阳性 ,阳性率均为 6 4 %。对 31号菌株PPNGTEM 1基因型特异引物nPCR产物进行全自动DNA测序 ,测得的序列与NCBI已登录的 3种质粒序列 (gi 15 0 36 2、gi 17774 2 2、gi 17774 2 8)高度同源。 结论 常州地区 6 4 %的淋病奈瑟菌为PP NG。由于PPNGTEM 1基因型特异的nPCR只能扩增含TEM基因的PPNG ,因此本检测有望用于淋病患者病灶部标本的PPNGDNA流行病学研究和用药参考。

产青霉素酶淋病奈瑟菌重复序列PCR分型研究

目的研究某地区产青霉素酶淋病奈瑟菌(penicillinase-producing Neisseria gonorrhoeae,PPNG)的基因型特征。方法利用重复序列引物建立重复序列聚合酶链反应(PCR)分型方法,并用此方法对12株PPNG进行基因分型。结果重复序列PCR是一种简便、快速、可靠和分辨率高的基因分型方法,12株PPNG共分为6种基因型,其中A型6株(占50%),F型2株,B、C、D、E型各1株。结论该地区PPNG主要流行株基因型为A型。通过重复序列PCR分型研究,可了解PPNG的基因型流行特征,为调查和控制其传播途径及传染源提供分子流行病学依据。

产青霉素酶淋病奈瑟菌的基因检测

目的 了解常州地区产青霉素酶淋病奈瑟菌 (penicillinase -producingNeisseriagonorrhoeae,PPNG )在淋病奈瑟菌中的构成比。方法 用套式聚合酶链反应 (nestedpolymerasechainreaction ,nPCR)对分离自常州地区的 81株淋病奈瑟菌进行PPNG特有耐药基因检测。结果 81株淋病奈瑟菌中有 62株检出耐药基因 ,即PPNG已占淋病奈瑟菌总数的 76 5 %。结论 常州不仅存在PPNG 。

无锡地区淋病患者产青霉素酶淋球菌基因检测

为了解无锡地区淋病患者产青霉素酶淋球菌(PPNG)的流行情况,采用套式聚合酶链反应技术(nPCR)对本地区2000年4月～9月来无锡市第一人民医院就诊的217例淋病患者泌尿生殖道拭子标本进行了PPNG种特异β-内酰胺酶基因检测,并随机抽样对1例PPNGnPCR阳性产物进行了全自动DNA序列测定。结果∶217例淋病患者PPNGnPCR总的检出率为27.65%(60/217),其中男性尿道拭子标本中的检出率为33.87%(42/124),女性宫颈拭子标本中的检出率为19.35%(18/93),男女淋病患者中PPNG的检出率有显著性差异(P<0.05)。nPCR阳性产物DNA测序结果显示其序列与Sanchez-Pescador等报道的PPNG典型株(DIS282)的序列高度同源(99.2%)。结果表明无锡地区淋病患者PPNG的感染率较高,nPCR不失为早期诊断PPNG感染及开展PPNG分子流行病学研究的良好手段。

406株淋病奈瑟氏菌对青霉素G敏感度的测定

对青岛地区流行的４０６株淋病奈瑟氏菌进行青霉素最小抑菌浓度的测定（ＭＩＣ）。结果，对青霉素Ｇ高度敏感者（ＭＩＣ＜０．０６ｍｇ／Ｌ）９９株，占２４．５％；中度敏感（ＭＩＣ在０．１２５～０．５ｍｇ／Ｌ）２３８株，占５８．５％；总敏感率为８３．０％。耐药（ＭＩＣ≥１ｍｇ／Ｌ）者６９株，占１７．０％；在耐药菌株中有２３株ＭＩＣ≥１６ｍｇ／Ｌ，且这２３株耐药菌的β－内酰胺酶试验均为阳性。表明耐青霉素株在青岛地区流行的淋病奈瑟氏菌中占有较大比例，应予以重视。

产色头孢菌素法检测淋病奈瑟菌β-内酰胺酶的临床应用评价

目的评价产色头孢菌素法检测淋病奈瑟菌β-内酰胺酶的临床应用效果。方法采用产色头孢菌素法常规检测淋病奈瑟菌临床分离株的β-内酰胺酶;同时采用纸片酸度定量法将保存的上述淋病奈瑟菌菌株进行β-内酰胺酶检测,与产色头孢菌素法检测结果不一致者采用PCR方法检测淋病奈瑟菌的β-内酰胺酶基因,以两种方法结果一致者为真结果,对产色头孢菌素法检测的结果进行评价。结果检测74株淋病奈瑟菌分离株,产色头孢菌素法阳性28株,阳性率37.8%;纸片酸度定量法阳性25株,阳性率33.8%;两种方法结果一致者69株,一致率93.2%,5株结果不一致菌株中,其中1株纸片酸度法阳性,产色头孢菌素法为阴性,但β-内酰胺酶基因阳性,4株产色头孢菌素法为阳性,纸片酸度法和β-内酰胺酶基因均为阴性,74株淋病奈瑟菌的β-内酰胺酶基因阳性25例,产色头孢菌素法敏感性96%,特异性91.8%。结论产色头孢菌素法操作简便,敏感性高,适合临床筛查淋病奈瑟菌的β-内酰胺酶。

“革兰阴性双球菌检验诊断淋病”的探讨

<热带病与寄生虫学>2000年第29卷第1期发表了"29例妊娠期合并淋病报道",文中"该29例患者全部经病原学确诊,方法为取宫颈管分泌物作革兰氏染色涂片镜检,均见到革兰氏阴性双球菌"[1].原文作者仅据此确诊29例妊娠期妇女合并淋病,我们认为不妥.性传播疾病(Sexually transmitted disease)病原体培养与鉴定现状不容乐观[2],妇科病人淋病的诊断误诊率尤高[3].现就革兰阴性双球菌检验诊断淋病问题结合文献复习探讨如下.

1999年广州地区所见淋球菌对抗生素耐药性结果分析

目的了解广州地区所见淋球菌对抗生素的耐药性及产青霉素酶淋球菌（ＰＰＮＧ）和高水平耐四环素淋球菌（ＴＲＮＧ）的流行状况。方法用琼脂稀释法测定最低抑菌浓度（ＭＩＣ）以及用纸片碘量法检测β－内酰胺酶。结果１６７株淋球菌检出 ＰＰＮＧ ９株（５．４％）、ＴＲＮＧ １６株（９． ６％）、环丙沙星耐药率达 ７８． ４％，高度耐药株（ＭＩＣ≥１６ｍｇ／Ｌ）３７株（２２．２％），头孢三嗪、壮观霉素未发现耐药菌株，且抗菌活性最强，头孢三嗪敏感性是上升趋势。结论持续监测淋球菌的耐药性十分重要。

广西桂林地区淋病奈瑟菌耐药检测结果分析

目的 分析广西桂林地区淋病奈瑟菌(Neisseria gonorrhoeae, NG)对七种抗生素的耐药性,为临床合理用药提供实验室依据。方法 采用纸片酸度法检测产青霉素酶淋病奈瑟菌(penicillinase-producing Neisseria gonorrhoeae,PPNG),运用琼脂稀释法测抗生素的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration, MIC)。结果 从淋病患者标本中分离菌株361株,其中高度耐四环素淋球菌(tetracycline-resistant Neisseria gonorrhoeae, TRNG)和青霉素耐药并PPNG分别为112株(60.22%)和146株(54.89%)。青霉素敏感0株(0.00%),环丙沙星敏感1株(0.28%),四环素敏感28株(7.76%),阿奇霉素敏感236株(65.37%),未发现大观霉素耐药菌株;头孢曲松和头孢克肟敏感分别为341株(94.46%)和354株(98.06%),其非敏感分别为20株(5.54%)和7株(1.94%)。结论 大观霉素、头孢曲松和头孢克肟可作为桂林地区治疗淋病的首选药物;持续监测NG耐药性对于指导临床合理用药和发现耐药变化具有十分重要的意义。

2013-2018年浙江省部分地区性病门诊淋病奈瑟菌耐药监测结果分析

目的分析浙江省部分地区性病门诊淋病奈瑟菌(淋球菌)临床分离株对6种抗生素的耐药变化趋势。方法2013-2018年对浙江省部分地区性病门诊临床分离培养的淋球菌采用琼脂稀释法测定青霉素、四环素、环丙沙星、阿奇霉素、头孢曲松、大观霉素的最小抑菌浓度(MIC);采用纸片酸度法测定质粒介导的产青霉素酶淋球菌(PPNG)菌株。结果6年间共监测672株淋球菌。PPNG和质粒介导的高度耐四环素淋球菌(TRNG)的检出率分别为48.81%(328/672)、45.09%(303/672),各维持在45.71%~52.85%和35.00%~66.32%之间,已处于较高水平,均无明显变化趋势(χ^2=1.372、1.424,P>0.05);环丙沙星耐药率高达100.00%(672/672),未发现敏感株;阿奇霉素耐药率由2013年的12.00%上升到2018年的28.32%,平均24.26%(163/672),变化趋势有统计学意义(χ^2=6.035,P<0.05);头孢曲松的低敏率为9.08%(61/672),大观霉素耐药率为0.60%(4/672),两者的MIC50和MIC90均有一个稀释度的增加,呈显著的变化趋势(χ^2=18.876、8.132,P<0.01)。结论头孢曲松和大观霉素适合作为浙江省部分地区治疗淋病的一线药物,但头孢曲松的低敏率逐年上升,应长期监测其耐药性的动态变化。